2型糖尿病合并下肢血管病變患者與晚期糖基化終末產物及脂聯素相關性研究

楊生

下肢血管病變是2型糖尿病常見的大血管病變之一，其發病率及致殘率極高，成為下肢血管閉塞導致截肢的主要原因。晚期糖基化終末產物 (AGEs)通過與其受體結合，損害血管的完整性，啟動及加速糖尿病動脈粥樣硬化和血管并發癥的發生發展。脂聯素 (ADPN)是脂肪組織專一表達的一種蛋白質，具有抗胰島素抵抗和動脈硬化的作用。AGEs和ADPN與糖尿病大血管病變的發生、發展關系密切。本研究旨在探討2型糖尿病患者AGEs及ADPN水平與下肢血管病變的相關性，為臨床防治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2008年2月—2009年12月內分泌科住院的2型糖尿病患者144例為實驗組。按有無下肢血管病變將其分為兩組:單純2型糖尿病組 (B組)68例，其中男36例，女32例;平均年齡 (52.3±7.3)歲;2型糖尿病合并下肢血管病變組 (A組)76例，其中男40例，女36例;平均年齡 (50.7±6.3)歲。2型糖尿病診斷依據1999年WHO糖尿病診斷標準，下肢血管病變診斷依據彩色多普勒超聲證實存在下肢動脈硬化、斑塊形成或血管閉塞。排除急慢性感染、腦血管疾病、惡性腫瘤、嚴重肝腎疾病、急性心肌梗死、免疫系統疾病、半年內手術或創傷史者。選擇同期我院體檢中心健康體檢正常者59例為正常對照組 (C組)，其中男28例，女31例;平均年齡 (46.3±6.6)歲，均無急慢性內外科疾病。3組受檢者性別、年齡間有均衡性。

1.2 方法

1.2.1 雙下肢動脈血管彩超檢查 受檢者取靜息仰臥位，采用日本ALOKA10型多普勒超聲診斷儀，測定雙下肢動脈血管走行、管壁光滑程度以及動脈斑塊特點，作為糖尿病下肢血管病變診斷依據。

1.2.2 生化指標檢測 受檢者晨起抽空腹血檢測血清空腹血糖 (FPG)、糖化血紅蛋白 (HbA1c)、總膽固醇 (TC)、三酰甘油 (TG)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL－C)及低密度脂蛋白膽固醇 (LDL－C)。

1.2.3 AGEs及ADPN水平測定 受檢者于實驗前晚8時開始禁食8～10 h，晨起抽取空腹肘正中靜脈非抗凝血5 ml，靜置30min，將血清放入3 000 r/min離心機常規離心10min，取上層液分兩份放入1.5 ml E－P管中，置于－70℃冰箱保存，待測AGEs及ADPN水平。AGEs水平測定采用競爭性酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)，試劑盒由美國Genelab公司提供。ADPN水平測定采用ELISA雙抗體夾心法定量測定，試劑盒由Rapid Bio實驗室生產 (美國)。

1.3 統計學方法 利用SPSS 11.0軟件進行統計分析，計量資料采用 (x－±s)表示，均數間比較采用方差分析，而變量間關系采用直線相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組觀察指標水平比較 3組受檢者BMI、TC、HDL－C水平比較，差異均無統計學意義 (P＞0.05);而 FPG、HbA1c、TG、LDL－C、AGEs、ADPN水平比較，差異均有統計學意義 (P＜0.05)。其中與C組相比，A組及B組ADPN水平均明顯降低 (P＜0.05)，而 AGEs、FPG、HbA1c、TG、LDL－C水平均明顯升高 (P＜0.05);與B組相比，A組AGEs水平升高 (P＜0.05)，A組ADPN水平降低 (P＜0.01，見表1)。

表1 3組觀察指標水平比較 (x－±s)Table 1 Comparison of the level of observed indexes in three groups

2.2 AGEs及ADPN與各因素相關性分析 AGEs與 FPG、LDL－C、HbA1c均呈正相關 (P＜0.05)。ADPN與BMI、FPG均呈負相關;與HDL－C呈正相關 (P＜0.05，見表2)。

表2 AGEs及ADPN與各因素相關分析Table 2 Analysis of the relation between AGEs and ADPN with factors

3 討論

糖尿病下肢血管病變的主要病理改變是動脈粥樣硬化，其主要臨床表現為患肢變涼、麻木，間歇性跛行，靜息時感到疼痛、麻木和感覺異常等，嚴重者可由于組織血液供應不良導致患肢壞疽、截肢，甚至死亡［1］。AGEs及ADPN參與動脈粥樣硬化的形成，與糖尿病合并下肢血管病變關系密切。

AGEs先由還原糖葡萄糖的羰基 (醛基或酮基)與生物分子 (如蛋白質或脂質)的游離氨基反應形成早期可逆產物醛亞胺 (如糖基化血紅蛋白)，再經分子內重排形成更穩定的糖－蛋白加合物，進一步脫水和凝聚形成不可逆的終末產物，呈棕黃色，可發熒光［2］。該過程稱為非酶糖基化反應，又稱maillard反應。AGEs與低密度脂蛋白、載脂蛋白B形成共價交聯，沉積在血管壁引起管腔進行性狹窄，糖化的LDL－C顆粒固定于糖化了的管壁蛋白上，從而促進了纖維脂質斑塊的形成［3］。AGEs刺激內皮細胞增加誘導型一氧化氮合酶mRNA表達，誘導內皮細胞凋亡，促進細胞外基質、促凝血因子、組織因子、血小板與平滑肌細胞接觸，引起單核巨噬細胞遷移，吞噬脂質，啟動動脈粥樣硬化的病理過程，促進早期動脈粥樣硬化斑塊形成［4］。本研究結果顯示糖尿病合并下肢血管病變患者AGEs水平明顯高于單純糖尿病患者及正常人，糖尿病合并下肢血管病變AGEs水平高于單純糖尿病患者，提示AGEs是糖尿病合并下肢血管病變的危險因素之一。從AGEs的形成過程中可以看出，還原糖是一個重要的因素，有關研究表明高血糖程度是AGEs形成的關鍵因素［5］。本研究結果顯示FPG、HbA1c及LDL－C與AGEs呈正相關，是促進晚期糖基化終末產物形成的因素，提示糖脂代謝紊亂可以促進AGEs的形成，控制糖脂代謝紊亂可以延緩或阻止糖尿病合并下肢血管病變的發生發展。

ADPN是由脂肪細胞特異性分泌的具有類似膠原結構的血清蛋白，具有增加胰島素敏感性，調節糖、脂代謝，抗動脈粥樣硬化及抗炎等多種生理作用。有學者在對冠狀動脈的研究中發現，動脈粥樣硬化患者血清ADPN水平明顯低于陰性對照組，并且隨動脈粥樣硬化程度的加重而下降［6－8］。本研究結果顯示糖尿病合并下肢血管病變患者及單純糖尿病患者ADPN水平均明顯低于正常人，糖尿病合并下肢血管病變患者ADPN水平低于單純糖尿病患者，提示低ADPN水平是糖尿病合并下肢血管病變發生發展的危險因素。一般認為，超重、肥胖者血清ADPN水平較正常體質量者下降，隨BMI的增加ADPN水平下降。ADPN可以促進脂肪酸的氧化，降低血TC的水平，并通過增加胰島素敏感性促進葡萄糖代謝［9－11］。本研究結果顯示，ADPN與BMI、FPG呈負相關;與HDL－C呈正相關，與上述報道相符。肥胖、糖脂代謝紊亂影響體內ADPN水平，是糖尿病合并下肢血管病變的危險因素。

綜上所述，AGEs是糖尿病下肢血管并發癥的獨立危險因素，低ADPN是動脈粥樣硬化發生和病變程度的重要標志因子，檢測體內AGEs及ADPN水平可能對預防和早期診斷糖尿病下肢血管并發癥有一定的臨床意義，此結果尚需進行多中心、大樣本、更嚴格病例控制在內的大規模研究。

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