自擬壯心湯對心力衰竭患者細胞因子水平和氧化應激狀態的影響

蘇延峰，張吉新，畢寶林，張 穎

心力衰竭又稱充血性心力衰竭（CHF），是一種復雜的臨床癥狀群，發病率高，可由任何原因的初始心肌損傷，引起心肌結構和功能的變化，最后導致心室泵血功能低下。現已明確，導致心力衰竭發生發展的基本機制是心室重塑，且越來越多的證據顯示細胞因子和氧化應激在其中起著重要作用。壯心湯是筆者依據中醫基礎理論結合長期臨床實踐總結的自擬治療心衰的中藥方劑，為了進一步闡明其治療心力衰竭的作用機理，探索應用中醫藥抗心力衰竭的新途徑，筆者對治療后40例心力衰竭患者的細胞因子水平和氧化應激狀態作了臨床觀察。

1 資料與方法

1.1 一般資料 心力衰竭患者80例，采用隨機單盲原則分為兩組。治療組40例：男22例，女18例；年齡25～72歲，平均（55.5±3.3）歲；病程1～15年，平均（2.2±4.5）年；其中心功能Ⅱ級5例，Ⅲ級24例，Ⅳ級11例；冠心病18例，高血壓病13例，擴張性心肌病9例。對照組40例：男23例，女17例；年齡24～68歲，平均（43.8±13.1）歲；病程1～14年，平均（1.9±4.2）年；其中心功能Ⅱ級7例，Ⅲ級25例，Ⅳ級8例；冠心病16例，高血壓病14例，擴張性心肌病10例。兩組一般資料無統計學差異（P>0.05）。心衰西醫診斷及分級標準依照Framingham心力衰竭診斷標準[1]及美國紐約心臟學會（NYHA）心功能分級標準[2]制定。中醫辯證分型參照文獻[3，4]制定心氣陽虛、血瘀水停證標準。臨床明確診斷為冠心病、高血壓病、擴張型心肌病的患者，心功能Ⅱ～Ⅳ級并符合上述中醫證候診斷標準者納入試驗。并排除下列疾病：①急性心肌梗塞發生泵衰竭；②肝、腎等重要臟器功能衰竭導致心力衰竭及合并肝、腎和造血系統嚴重原發病；③各種難以糾正的惡性心律失常；④已系統應用ACEI或/和β受體阻滯劑者；⑤未滿規定觀察而中斷治療或不按規定用藥者。

1.2 治療方法 對照組采用CHF常規治療，包括洋地黃類、利尿劑及ACEI等，治療組在常規治療的基礎上加用具有益氣溫陽活血利水功效的壯心湯（生黃芪30 g、黨參20 g、熟附子10 g、吳茱萸10 g、川芎15 g、丹參15 g、水蛭9 g、茯苓15 g、桂枝10g、陳皮12 g、枳實12 g），水煎服，1劑/d，2次/d。兩組療程均為60 d。

1.3 觀察指標及監測方法 檢測兩組CHF患者治療前后血清TNF-α、IL-6、MDA、SOD的含量變化。兩組患者于治療前及療程結束后清晨各抽取靜脈血10 ml，分離血清，置于-20℃冰箱內保存待測。血清TNF-α、IL-6測定采用雙抗體夾心ELISA法，SOD、MDA的測定分別采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法。TNF-α試劑盒由北京邦定生物醫學公司提供；IL-6試劑盒由比利時 INNETICS公司出品；SOD、MDA試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

2 結 果

兩組治療前后血清TNF-a、IL-6、MDA及SOD的水平見表1。顯示治療組治療后各指標改善優于對照組（P<0.05）。與組內治療前比較*P<0.05；與對照組治療后比較ΔP<0.05

表1 兩組CHF患者治療前后血清TNF-α、IL-6、MDA及SOD水平（±s）

表1 兩組CHF患者治療前后血清TNF-α、IL-6、MDA及SOD水平（±s）

SOD（μmol/ml）治療組治療前 102.05±34.86 16.02±7.88 2.21±0.52 31.96±5.89治療后 81.95±22.91*Δ 10.95±2.89*Δ 1.30±0.28*Δ 41.06±7.12*Δ對照組治療前 99.10±30.01 15.01±6.20 2.10±0.53 32.11±5.49治療后 85.02±29.93* 12.21±2.97* 1.86±0.39* 36.12±7.19*組別 TNF-α（pg/ml）IL-6（pg/ml）MDA（μmol/L）

3 討 論

近年來，越來越多的證據表明細胞因子是充血性心力衰竭的病理生理和發病機制中的重要因子。它通過介導左室重構、降低心肌收縮力、使β-腎上腺素受體失偶聯等作用引發或加重心衰。與CHF有關的細胞因子主要有TNF-α、IL-6。TNF-α作為一個多效應的細胞因子，在CHF的發生發展中發揮著重要的作用，參與了心衰惡液質、基因誘導、細胞凋亡、介導心肌抑制、心室重構等過程，由此促進心功能不全的發展。TNF-α可從多方面發揮其對心肌的負性變力作用。許多資料都支持NO是TNF-α負性變力作用的重要介質，CHF時TNF-α通過誘導iNOS表達導致大量NO生成，并通過NO介導的cGMP的增加使肌絲對Ca2+的反應性降低，從而引起對心肌的負性變力效應[5]。在體外實驗中，當TNF-α濃度>50 U/ml時便可促進蛋白質合成及減少蛋白質降解，促進小分子熱休克蛋白的表達，參與心臟的修復過程；也可刺激IL-1及IL-6生成，它們都已被證實有明顯的致心肌肥厚作用[6]。TNF-α通過激活基質金屬蛋白酶引起膠原纖維基質的降解以及誘導了心肌細胞凋亡導致心肌細胞數量減少，從而使心肌細胞發生空間結構上的重排[7]。在調節細胞凋亡的多種因素中，TNF-α可通過抑制內皮型NOS（eNOS）蛋白表達，誘導iNOS蛋白表達，促進NO生成，誘發心肌細胞的凋亡。同樣，IL-6不僅調節免疫和炎癥反應，還能介導心肌重構和心功能不全。IL-6及其相關的細胞因子通過刺激其共同的糖蛋白130受體亞單位在心肌細胞的表達而影響心肌肥厚[8]。

自由基在心肌損傷中起著十分重要的作用，它能與細胞膜上的不飽和脂肪酸結合產生脂質過氧化反應，破壞細胞膜的正常結構。SOD是體內重要的抗氧化酶，可反映機體清除氧自由基的能力，MDA是體內氧自由基攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸引發過氧化反應的毒性產物，其含量高低間接地反映機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度，可以作為判斷體內氧化應激程度的指標。

本文結果顯示，治療后兩組血清TNF-α、IL-6水平均明顯下降 （P<0.05），而治療組較對照組降低更顯著 （P<0.05），考慮與方中川芎、水蛭有明顯抑制血清TNF-α表達的作用有關[9]。治療后兩組血清MDA水平明顯下降，SOD水平顯著上升（P<0.05），而治療組與對照組比較，效果則更為顯著（P<0.05），這可能是方中黃芪、川芎、丹參、桂枝、陳皮能夠升高血漿SOD水平，降低過氧化脂質含量，增加自由基清除的緣故[9-11]。研究表明益氣溫陽活血利水的壯心湯對包括TNF-α、IL-6在內的細胞因子及機體氧化應激狀態具有一定的調控作用，筆者認為上述作用可能是多種藥物配伍后藥效協同發揮的結果。

心功能不全的患者，其血清 TNF-α、IL-6、MDA濃度均明顯增高，且隨心功能的好轉或惡化而一致變化；同時，CHF患者的血清SOD含量與心衰程度呈負相關，證實TNF-α、IL-6、MDA、SOD關系密切，相互作用，相互影響，共同參與CHF的發生發展。因此，調控細胞因子、減輕機體氧化應激的綜合治療對CHF患者的預后非常重要。本文結果顯示，在常規治療的基礎上，加用益氣溫陽活血利水的中藥——壯心湯，能夠顯著降低CHF患者血清TNF-α、IL-6、MDA水平，提高SOD含量，改善患者心肌重構，抑制細胞因子，減輕機體的氧化應激狀態，從而進一步闡明了壯心湯治療心力衰竭的療效機理，從而為尋找更加有效地抗心衰中藥提供了新的途徑。

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