正交設計法對黃芩提取工藝的研究

于千，張楊

(1.沈陽醫學院醫學教育研究中心，遼寧沈陽110034;2.大連華立金港藥業有限公司)

黃芩［1］為唇形科植物黃芩 (Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，性苦味寒，清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎，用于濕溫、暑濕、胸悶嘔惡，濕熱痞滿、瀉痢、黃疸、肺熱咳嗽、高熱煩渴等。主要有效成分為總黃酮類化合物和黃芩苷。本實驗主要選用黃芩苷及黃芩總黃酮的含量為主要評價指標，對提取工藝進行正交設計，優化其制備工藝，確定黃芩的最佳提取工藝。

1 材料與方法

1.1 材料 供試黃芩藥材采自遼寧，經鑒定為Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。黃芩苷對照品 (批號110715201005)購自中國藥品生物制品檢定所。

1.2 檢測方法

1.2.1 總黃酮的檢測方法 取黃芩提取物30 mg，精密稱定，加入70%乙醇30 ml，加熱回流2 h，放冷至室溫，甲醇定容于50 ml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液。另取干燥至恒重的黃芩苷對照品25 mg，加70%乙醇定容于50 ml量瓶中，搖勻，作為對照品溶液備用。

1.2.2 黃芩苷的檢測方法［1］色譜條件:流動相:甲醇－水 －磷酸 (47∶53∶0.2);檢測波長:280 nm;對照品溶液的制備:取干燥恒重的黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 m l含60μg的溶液，即得。供試品溶液的制備:取黃芩提取物0.1 g，精密稱定，加70%乙醇40 ml，加熱回流3 h，放冷，濾過，加70%乙醇定容于100 ml量瓶中，搖勻，即得。

測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

2 提取工藝的研究

2.1 水提取工藝的研究 有文獻［2］報道溫度、加熱時間對黃芩苷水溶液穩定性有影響，溫度越高，時間越長，分解越多。因此對黃芩的以下三種煎煮方式進行比較，并以總黃酮和黃芩苷為考察指標進行綜合評價和分析。

2.1.1 煎煮方法 方法一:取黃芩10 g，精密稱定，加入涼水100 ml，加熱煮沸2 h，濾過，蒸干;方法二:取黃芩10 g，精密稱定，加入50℃溫水中，再加熱煮沸2 h，濾過，蒸干;方法三:取黃芩10 g，精密稱定，直接加入100℃沸水中，煮沸2 h，濾過，蒸干。

2.1.2 結果 本實驗以黃芩苷和總黃酮為考察指標，按1.2項檢測方法進行檢測，并加權綜合評分，每項指標含量最高的為50分，其他的按比例折合成相應的分數，兩指標得分相加，即總分。考察結果詳見表1。

表1 黃芩不同提取方法考察

從表1可見，三種煎煮方法中的方法三提取物中總黃酮和黃芩苷的含量最高，綜合評分最高。

2.2 正交實驗研究 本實驗是對最佳提取方法進行優化，并以黃芩苷和總黃酮為考察指標，加權綜合評分，其中總黃酮含量50分，黃芩苷含量50分，采用L9(34)正交試驗考察最佳提取純化工藝，因素水平見表2，正交試驗結果見表3，方差分析見表4。

表2 因素水平表

表3 正交實驗分析結果

表4 方差分析表

2.3 結果分析 表1提示，三種煎煮方法中的方法三提取物中總黃酮和黃芩苷的含量和綜合評分均最高，因此，確定煎煮方法為取黃芩10 g，精密稱定，直接加入100℃沸水中，煮沸2 h，濾過，蒸干。

直觀分析和方差分析結果表明:加水量和提取時間差異有顯著性，因此選擇均數最高的水平為最佳方法，另外由于提取次數差異無顯著性。根據節能原則，選擇提取一次為最佳提取次數。故確定最佳水提工藝為A3B2C1，即取黃芩適量，直接加12倍量沸水中，提取一次，每次1 h。

3 討論

本實驗主要選用黃芩苷及黃芩總黃酮的含量為主要評價指標，對提取工藝進行正交設計優化其制備工藝，確定黃芩的最佳提取工藝。最佳煎煮方法不僅可以讓有效成分在煎煮過程中最少量的損失，而且可以最大量的提取和利用，為大批量生產和制劑提供基礎。

［1］國家藥典委員會.中國藥典，I部［S］.北京:中國醫藥出版社，2010:283.

［2］雷濘菲，彭書明，周嘉峪，等.黃芩中黃芩苷提取工藝的研究 ［J］.時珍國醫國藥，2007，18(11):2664－2666.