bax/bcl-2蛋白比值及凋亡細(xì)胞在妊娠期高血壓疾病胎盤組織中的表達(dá)趨勢(shì)研究

楊向方,譚麗麗,李燕廣,陳建賓,丁雪梅,姬宏宇

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病,多數(shù)病例在妊娠期出現(xiàn)一過性高血壓、蛋白尿等癥狀,分娩后隨即消失。該病嚴(yán)重影響母嬰健康,全身小動(dòng)脈痙攣是其病理生理學(xué)基礎(chǔ),胎盤病理表現(xiàn)是其主要特點(diǎn)之一。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 6例正常產(chǎn)婦及 18例妊娠期高血壓產(chǎn)婦,各組選取年齡 (27.5±2.1)歲,孕周 (37.5±3.8)周;妊娠期高血壓的診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)按照樂杰主編的第 7版 《婦產(chǎn)科學(xué)》的分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確定。

1.2 取材及方法 胎盤娩出后,直視下迅速取母面中央 (避開鈣化灶、機(jī)化灶、出血灶)約 1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm小塊胎盤組織,4%多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,3μm厚度連續(xù)切片,每例切取相鄰 3個(gè)切片,免疫組化 SP法檢測(cè) bax、bcl-2蛋白表達(dá),TUNEL法檢測(cè)凋亡細(xì)胞,凋亡試劑盒、免疫組化試劑盒均購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 結(jié)果判定 10×40倍光鏡觀察,免疫組化 SP法檢測(cè)bax、bcl-2蛋白陽性表達(dá),胞漿呈棕黃色;細(xì)胞核內(nèi)存在棕黃色顆粒者為凋亡細(xì)胞。每例相鄰的 3個(gè)切片分別檢測(cè) bax、bcl-2蛋白及凋亡細(xì)胞,各隨機(jī)選取 10個(gè)視野計(jì)數(shù)并取平均數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)應(yīng)用 SPSS 16.0軟件統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料以 (±s)表示,采用單因素方差分析,以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

正常妊娠組、妊娠期高血壓組、子癇前期輕度組與子癇前期重度組 Bax/Bcl-2陽性細(xì)胞表達(dá)比值、凋亡細(xì)胞數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05,見表1)。

表1 bax/bcl-2蛋白比值及凋亡細(xì)胞數(shù)比較 (±s)Table1 The generalsituations in four groups

表1 bax/bcl-2蛋白比值及凋亡細(xì)胞數(shù)比較 (±s)Table1 The generalsituations in four groups

組別 例數(shù) Bax/Bcl-2陽性細(xì)胞表達(dá)比值 凋亡細(xì)胞數(shù)正常妊娠組 6 1.13±0.05 3.01±0.09妊娠期高血壓組 6 1.53±0.79 9.13±0.57子癇前期輕度組 6 1.70±0.08 13.51±1.05子癇前期重度組 6 1.94±0.08 17.92±0.39

3 討論

在哺乳動(dòng)物中,bcl-2基因家族及其相關(guān)蛋白在調(diào)控細(xì)胞凋亡過程中起重要作用[1]。Bax是 Bcl-2的同源基因,功能與 Bcl-2基因相反,當(dāng) Bax基因高表達(dá)時(shí),其相關(guān)蛋白 Bax蛋白之間可形成同源二聚體,促進(jìn)細(xì)胞凋亡[2-3]。妊娠期高血壓疾病產(chǎn)婦胎盤局部缺血缺氧,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,嚴(yán)重影響胎盤功能[4]。早期已有研究 bax、bcl-2蛋白表達(dá)對(duì)胎盤組織的影響[5]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,隨著妊娠期高血壓疾病病情的加重,Bax/Bcl-2蛋白的比值上升,與 TUNEL法測(cè)定細(xì)胞凋亡表達(dá)趨勢(shì)一致,說明 Bax/Bcl-2蛋白比值改變,影響了胎盤組織的凋亡及損傷,反映了病情嚴(yán)重程度,表明 Bax/Bcl-2蛋白比值及凋亡細(xì)胞表達(dá)與妊娠期高血壓疾病演變有密切關(guān)聯(lián)。

1 Shimohama S,Fujimoto S,Sum ida Y,etal.Differential expression of rat brain Bc l-2 fam ily proteins in development and aging[J].Biochem Biophys ResCommun,1998,252(1):92-96.

2 Zhang H,Li Q,Li Z,et al.The protection of Bcl-2 overexpression on rat cortical neuronal injury caused by analogous ischemia/reperfusion in vitro[J].Neurosci Res,2008,62(2):140-146.

3 Hetz C,Vitte PA,Bombrun A,et al.Bax channel inhibitors prevent m itochondrion-mediated apoptosis and protect neurons in a model of global brain ischemia[J].JBiol Chem,2005,280(52):42960-42970.

4 Difederic OE,Genbace VO,Fisher SJ.Pre-eclampsia is associated with wide spread apoptosisofplacenta lcytotrophoblasts within the uterine wall[J].Pathol,1999,155:293-301.

5 趙麗娜,駱?biāo)脒h(yuǎn),吳璇,等.妊娠高血壓疾病患者胎盤組織中細(xì)胞凋亡調(diào)控基因 bax和bc l-2蛋白的表達(dá)及意義 [J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2007,16(14):1887-1905.