宮頸癌患者人乳頭瘤病毒基因檢測分型研究

邱小華,劉 偉

人乳頭瘤病毒 (human papillomavirus,HPV)是一種嗜上皮性病毒,在人和動物中分布廣泛,有高度的特異性。HPV感染與宮頸癌的關系最初在19世紀 70年代提出,此后許多流行病學和分子生物學研究均毫無疑問地證實了 HPV與宮頸癌的病因學聯系。但宮頸癌與 HPV基因型分布的地區差異性的關系尚待進一步探討。本研究應用基因芯片方法對 125例宮頸癌患者宮頸脫落細胞進行了 23種 HPV基因分型檢測,并探討HPV基因型與宮頸癌類型的關系,以進一步了解宮頸癌患者中 HPV感染的基因分布情況與地區關系,為宮頸癌的預防、高危人群的篩查和特異性疫苗的研制提供一定的試驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本取自 2006年 1月—2008年 6月來我院婦科住院就診的 125例宮頸癌病例。其中經病理診斷鱗癌患者93例,腺癌患者 28例,鱗腺癌患者2例。

1.2 試劑與儀器 HPV基因分型檢測試劑盒由深圳亞能生物技術有限公司提供;采用 Line-geme-fqd-33A PCR擴增儀。

1.3 采樣 以專用的宮頸脫落細胞采集器進行采樣,樣本收集后立即送檢待檢測。

1.4 統計學方法 采用 SPSS 10.0軟件包進行統計分析,計數資料采用 χ2檢驗,以p＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸癌患者 HPV感染率及主要基因型分布 125例宮頸癌患者標本中檢測出 116例 HPV感染,陽性率為 92.8%。93例宮頸鱗癌中,HPV陽性 89例,陽性率為 95.7%。28例腺癌中,HPV陽性 22例,陽性率為 78.6%。在 2例鱗腺癌中分別檢出 HPV6、18。

2.2 宮頸癌標本中不同 HPV基因型的感染率 125例宮頸癌患者標本中分別檢測出 9種 HPV基因型,分別為 HPV6、11、16、 18、31、 33、 45、 58、59型。在所有 116例感染 HPV的標本中,單一感染較為常見,共計 85例占 73.3%,主要為HPV16、18感染;單一低危型 (HPV6、11)3例,占 2.6%;雙重感染 22例,占 17.6%,其中包括 HPV16/18型 6例,HPV16/33型 5例,HPV11/16型 5例,HPV10/59型 1例;多重感染 9例,占 7.8%,主要表現為高低危型混合感染 (見表1)。

表 1 125例宮頸癌 HPV基因型的檢出率Table 1 The detected ratios of HPV genotypes in 125 cervical cancer patients

3 討論

宮頸癌是威脅婦女健康的主要惡性腫瘤之一,全世界每年約有 50萬宮頸癌新發病例,其中亞洲約占 38萬,全世界每年約有 23萬女性死于宮頸癌。我國每年約有 15萬宮頸癌新發病例,每年約有 8萬人死于宮頸癌[1-3]。在我國,由于篩選制度尚不完善,普及面不廣泛,加之很多婦女對宮頸疾病的危害認識不夠,宮頸癌的發病率明顯高于發達國家?，F有的流行病學和生物學資料已經證明,高危型 HPV持續感染是宮頸癌及其癌前病變的主要病因[4]。統計結果表明,90%以上的宮頸癌均可檢測到 HPV DNA[5]。我國宮頸癌高發區的篩選資料也顯示,幾乎所有的宮頸癌 HPV均陽性[6]。本研究中宮頸癌患者宮頸脫落細胞標本中 HPV感染率為 92.8%,其中鱗癌 95.7%、腺癌 78.6%,說明 HPV感染的基因型與宮頸癌的類型密切相關。宮頸癌中 HPV檢出率因地區標本類型和檢測方法不同而有差異,國際腫瘤研究所 (IARC)曾報道,宮頸癌組織中總的HPV感染率高達 99.7%[7]。日本學者應用特異性 PCR的方法檢測 383例宮頸癌的 HPV,檢出率為 86.3%[8]。本研究應用基因芯片技術對 125例宮頸癌脫落細胞進行檢測,結果顯示HPV感染率達 92.8%,與目前普遍認為的 90.0%宮頸癌組織攜帶有 HPV DNA的觀點相符。HPV基因型分布有地區差異,2003年 Clifford等[9]對全球各大洲 10 058例宮頸癌進行了分析,發現 HPV16為全球最主要的基因型,而其他基因型在各地區的分布有所差異,如 HPV45在非洲相對較多,HPV33在歐洲相對較多,而 HPV52、58在亞洲較多。Lo等[10]對北京、上海、廣州、四川和香港5個地區 809例宮頸癌患者進行HPV檢測,結果發現 HPV16所占比例為 79.6%,并顯示宮頸癌中主要 HPV基因型是 HPV16、18、58、52,其構成比分別為79.6%、7.50%、3.80%和 2.36%。而 Clifford等研究發現宮頸癌中常見基因型及其感染率從高到低依次為 HPV16、18、33、45、31、58、52。本研究通過對 125例宮頸癌患者中 HPV基因型的檢測發現,各基因型檢出率由高至低依次為 HPV16、18、59、33、58,結果與 Lo等報道結果一致,表明 HPV16為最主要的基因型,HPV18位居第二,其他各基因型所占比例較少。本研究中 HPV18的感染率為 19.8%,比 Lo等報道的7.50%和洪蝶等[11]報道的 3.5%更高,而與 Clifford等報道的結果相近。本研究在 125例宮頸癌 HPV檢測中發現 6例(4.25%)HPV59感染與文獻報道不一致,提示各地區宮頸癌中感染的 HPV基因型存在差異。此外還發現少數標本中存在HPV31、33、45高危型,但感染率較低,表明該地區宮頸癌患者感染 HPV基因型的多樣化,并以高危型為主。

文獻報道宮頸癌患者 HPV雙重感染并不少見,但各家報道的感染率不一致。本研究發現汕頭地區宮頸癌 HPV雙重感染達 17.6%,與Kay等[12]報道的 16.0%相近,高于洪蝶等[11]報道的 9.5%。有學者報道,HPV16是雙重感染中最常見的基因型,HPV16、18、33常有雙重感染,故認為 HPV的多重感染與 HPV基因型有關[13]。本研究 HPV雙重感染的 22例均含有 HPV16。不同地區不同種族人群對不同的 HPV基因型的易感性不同,而且不同的 HPV基因型對不同種族人群致癌性的強弱也存在差異[14]。本研究應用基因芯片對宮頸癌患者宮頸脫落細胞進行檢測,結果顯示汕頭地區宮頸癌患者中 HPV的基因型多樣,且均為高危型感染,早期對廣大女性進行 HPV檢測,能及時發現和確定宮頸癌高危人群,預防和早期發現宮頸癌及癌前病變都具有重要的意義。

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11 洪蝶,呂衛國,葉楓,等.宮頸癌及上皮內瘤變人乳頭瘤病毒基因型的檢測 [J].現代婦產科檢測,2006,15(1):36-38.12 Kay P,Soelers R,Nevin J,et al.High prevalence of HPV16 in South African women with cancer of cervix and cervical intraepithelial heoplasia[J].J Med Virol,2003,71(2):265-273.

13 陳仲波,羊正炎,俞華,等.宮頸癌患者人乳頭瘤病毒基因分型的研究 [J].中國全科醫學,2010,13(6):1871.

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