蓼子樸提取物對小菜蛾生物活性的初步研究

摘要：以小菜蛾為試蟲，對蓼子樸（Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ．）不同部位乙醇提取物進行殺蟲活性比較，篩選出活性最高部位，然后采用不同溶劑對其進行萃取分離，得到不同溶劑萃取物，測試各萃取物對小菜蛾的觸殺和拒食活性。結果表明，蓼子樸全草提取物活性最高，濃度為５０ ｇ／Ｌ時，對小菜蛾３齡幼蟲７２ ｈ的觸殺校正死亡率和２４ ｈ的非選擇性拒食率分別可達９６．６７％和１００．００％；不同溶劑萃取物中，氯仿萃取物的活性最高，對小菜蛾３齡幼蟲７２ ｈ的觸殺校正死亡率和２４ ｈ的非選擇性拒食率分別達到８０．００％和９６．４６％。

關鍵詞：蓼子樸（Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ．）；小菜蛾；殺蟲活性

中圖分類號：Ｓ４８２．３文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）13－2655-03

Preliminary Study on Bioactivity of Extracts from Inula salsoloides Ostenf. against Plutella xylostella

ＺＨＡＯ Ｔａｎｇａ，ＬＩＮ Ｋｕｎｂ，ＹＡＮＧ Ｍｉｎ－ｌｉｂ

（ａ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ； ｂ．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｅｎｅｒｇｙ Ｓｏｕｒｃｅｓ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，

Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ． ａｇａｉｎｓｔ Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ was compared；and the part with the highest insecticidal activity was screened out． Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔ was used for extractive separation． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｆｏｒ ｃｏｎｔａｃｔ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ａｎｔｉｆｅｅｄａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ３ｒｄ ｉｎｓｔａｒ ｌａｒｖｅ ｏｆ Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ． ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ５０ ｇ／Ｌ， ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｂｙ ｃｏｎｔａｃｔｉｎｇ ｉｎ ７２ ｈ ａｎｄ ｎｏｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｆｅｅｄａｎｔ ｒａｔｅｓ ｉｎ ２４ ｈ ｒｅａｃｈｅｄ ９６．６７％ ａｎｄ １００．００％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｔｈｅ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ． Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｉｔｈｉｎ ７２ ｈ ａｎｄ ｎｏｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｆｅｅｄａｎｔ ｒａｔｅｓ ｗｉｔｈｉｎ ２４ ｈ ｗｅｒｅ ８０．００％ ａｎｄ ９６．４６％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ．； Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ； insecticidal activity

植物源農藥以其高效、低毒、低殘留、對環境安全友好而備受人們的關注，成為農藥發展的一個方向，越來越受到廣大農藥研究者的青睞。從植物中提取、分離新的天然活性化合物是新農藥創制開發的研究熱點［１］。

蓼子樸（Ｉｎｕｌａ ｓａｌｓｏｌｏｉｄｅｓ Ｏｓｔｅｎｆ．）是菊科（Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ）旋覆花屬多年生草本植物，分布于寧夏、內蒙古、遼寧、河北、山西、陜西、甘肅、青海和新疆等?。▍^），花及全草都可入藥。已有文獻報道蓼子樸具有一定的抑菌殺蟲活性，如李玉平等［２］報道蓼子樸對小麥赤霉病菌、蘋果炭疽病菌、辣椒疫霉病菌、玉米大斑病菌具有很強的抑菌活性；屈秋耘等［３］報道蓼子樸對大皺鰓金龜、蒙古麗金龜、八字白眉天蛾有較高的毒殺效果；張宏利等［４］報道蓼子樸對粘蟲有較好拒食和毒殺效果。

蓼子樸在寧夏鹽池縣被作為農田雜草處理［5］。研究其殺蟲活性，可為蓼子樸的綜合利用及無公害植物源農藥的開發提供科學依據，開辟新的蟲害防治途徑，變廢為寶。本研究以小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ Ｌ．）為試蟲，對蓼子樸不同部位乙醇提取物及不同溶劑萃取物的觸殺活性及拒食活性進行比較，篩選出活性較高的部位，為下一步提取分離其活性成分奠定基礎，同時為更好地開發利用蓼子樸植物資源提供參考。

１材料和方法

１．１材料

１．１．１供試植物蓼子樸采自寧夏中寧縣境內。采集全草，自然條件下陰干。將部分全草按照根、莖、葉、花分離歸類。植物陰干后粉碎，過４０目篩（粒度為４２０ μｍ），低溫保存備用。

１．１．２供試昆蟲小菜蛾： 室內人工繼代飼養（飼養環境：溫度２３～２５ ℃，濕度６０％～７０％，每天光照１４ ｈ），試驗時挑取健康均勻的３齡幼蟲供試。

１．２方法

１．２．１不同部位提取物的制備［6］采用乙醇浸漬超聲法：分別稱取一定量蓼子樸全草、根、莖、葉、花的粉碎物，每克樣品加８ mL體積分數為９５％的乙醇，室溫浸泡２４ ｈ后超聲提?。矗?ｍｉｎ，過濾，濾渣再加溶劑浸提，重復提取３次，合并３次濾液。濾液用旋轉蒸發儀減壓濃縮，蒸干溶劑，得乙醇提取物，稱重后置于４ ℃冰箱中保存備用。根據下列公式計算出浸膏得率。

浸膏得率＝×100%

１．２．２不同溶劑萃取物的制備將蓼子樸乙醇提取物浸膏加１０倍體積的蒸餾水熱溶，超聲波助溶懸浮后，裝入分液漏斗中，依次用等體積石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇各萃取３次。將各萃取液及剩余水相分別在旋轉蒸發儀中減壓濃縮至稠膏，并稱重，記錄各相萃取物質量。并按下列公式計算各相萃取物的得率。

萃取相浸膏得率＝×100%

１．２．３供試藥液配制稱取一定量浸膏，用５０％（體積分數，下同）丙酮溶液配成所需濃度的藥液，置于４ ℃冰箱中保存備用。

１．２．４生物活性測定

１）觸殺活性測定。采用浸漬法［7，8］：用圓形打孔器（直徑１．５ ｃｍ）將新鮮甘藍葉打成葉碟，十字交錯放入培養皿（直徑７ ｃｍ）中，將小菜蛾３齡幼蟲放入圓桶狀濾網中，浸于蓼子樸乙醇提取液中，１０ ｓ后迅速取出，用濾紙吸干多余藥液，置于葉碟上，每處理１０頭，重復６次。對照用５０％丙酮溶劑作相同處理。將培養皿置于人工氣候箱中（溫度為２４℃±１ ℃，相對濕度為６５％±５％，光照為１４ ｈ／ｄ，下同）觀察，處理２４、４８、７２ ｈ后觀察試蟲的死亡情況，計算死亡率及校正死亡率。

死亡標準：蟲體失水皺縮，無法取食，觸之不動。

死亡率＝×100%

校正死亡率＝×100%

２）非選擇性拒食活性測定。采用浸葉法［9］：用圓形打孔器（直徑１．５ ｃｍ）將新鮮甘藍葉打成葉碟，放入供試藥液中浸漬５ ｓ（對照葉碟僅以５０％丙酮作相同處理），取出晾干放入培養皿中（內墊濾紙，用棉花球吸蒸餾水保濕）。每皿中放入４片相同處理葉碟，葉碟十字交錯放置，每皿接入１０頭饑餓６ ｈ的３齡小菜蛾，每組重復６次。將培養皿置于人工氣候箱中觀察，于２４、４８ ｈ后用坐標方格紙測定取食面積，計算拒食率。

非選擇性拒食率＝

×100%

１．２．５數據處理用ＤＰＳ７．０５專業統計軟件對試驗數據進行系統分組分析，數據之間的差異用Ｄｕｎｃａｎ's新復極差法進行比較。

２結果與分析

２．１蓼子樸不同部位乙醇提取物的殺蟲活性比較

采取乙醇浸漬超聲法分別對蓼子樸的花、葉、莖、根及全草進行提取，浸膏得率由高到低依次為：葉（２２．１８％）＞莖（１６．１１％）＞根（１５．１３％）＞花（１０．４３％）＞全草（１０．２２％）。

分別對小菜蛾３齡幼蟲進行觸殺和非選擇性拒食活性測定，結果（表１、表２）表明，蓼子樸全草乙醇提取物對小菜蛾具有明顯的觸殺和拒食活性，在濃度為５０ ｇ／Ｌ時，７２ ｈ的觸殺校正死亡率和２４ ｈ的非選擇性拒食率分別為９６．６７％、１００．００％。

２．２蓼子樸不同溶劑萃取物對小菜蛾的殺蟲活性比較

依次用不同極性溶劑對蓼子樸全草乙醇浸膏進行液－液分配萃?。?］分離，得不同溶劑萃取物。不同溶劑萃取物得率由高到低依次為：水萃取物（３８．８３％）＞石油醚萃取物（１４．７５％）＞氯仿萃取物（１４．２８％）＞正丁醇萃取物（１４．２１％）＞乙酸乙酯萃取物（４．３６％）。

分別測試各萃取物對小菜蛾的觸殺活性和拒食活性，結果（表３、表４）表明，觸殺活性由高到低依次為：氯仿萃取物＞石油醚萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞水萃取物＞正丁醇萃取物；觸殺活性隨著處理時間的延長而逐漸增大。拒食活性由高到低依次為：氯仿萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞石油醚萃取物＞正丁醇萃取物＞水萃取物，２４ ｈ的拒食效果高于４８ ｈ的拒食效果。氯仿萃取物的活性最高，當濃度為２５ ｇ／Ｌ時，處理７２ ｈ的觸殺校正死亡率和２４ ｈ的非選擇性拒食率分別為８０．００％和９６．４６％。

３結論與討論

蓼子樸全草的乙醇提取物對小菜蛾３齡幼蟲的活性最高，對小菜蛾具有顯著的拒食和觸殺活性。氯仿萃取物對小菜蛾的活性最好，表明蓼子樸氯仿萃取物中活性組分較多。觸殺試驗中，觸殺活性隨著處理時間的延長而逐漸增大。在非選擇性拒食試驗中，２４ ｈ的拒食效果高于４８ ｈ的拒食效果。

蓼子樸全草較其他各部位對小菜蛾的觸殺和拒食活性高，這可能是蓼子樸各部位所產生的協同效果比其中任何單一部位的效果好，即各部位在一起所產生的增效作用。拒食活性隨著處理時間的延長而呈減弱趨勢，可能是蓼子樸中有拒食活性的成分易揮發，活性持續期短；也可能是長時間喂養下小菜蛾的感受器對該環境敏感性下降的緣故。本研究中出現了同一供試樣品的觸殺和拒食活性強弱不同的現象，可能與不同成分及不同作用方式對小菜蛾的作用機理不同有關，此問題有待進一步研究探討。

參考文獻：

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［３］ 屈秋耘，栗一民． 榆林沙區的殺蟲植物及其應用前景［Ｊ］． 陜西林業科技，１９８３（３）：８５－８９．

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［9］ 李進步，方麗平，薛建平，等． 半夏乙醇提取物對小菜蛾幼蟲生物活性的研究［Ｊ］． 中國農學通報，２００９，２５（５）：２２３－２２７．

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