抗核抗體譜檢測(cè)在彌漫性結(jié)締組織病診斷中的價(jià)值

何建偉，李 靜，程 江，曹薇薇

彌漫性結(jié)締組織病是風(fēng)濕性疾病中的一大類，包括很多種疾病，如:系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (SLE)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 (RA)、混合性結(jié)締組織病 (MCTD)、原發(fā)性干燥綜合征 (pSS)、系統(tǒng)性硬化病 (SSc)、多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)、血管炎等［1］。以上均是自身免疫性疾病，當(dāng)自身抗原變性、損傷、移位及免疫功能失調(diào)、免疫耐受破壞、原發(fā)或繼發(fā)性免疫缺陷或障礙和免疫識(shí)別紊亂時(shí)，會(huì)對(duì)自身抗原產(chǎn)生抗體，即自身抗體，從而造成免疫性病理?yè)p傷或功能障礙，引發(fā)自身免疫性疾病。彌漫性結(jié)締組織病病變累及多個(gè)系統(tǒng)，臨床癥狀個(gè)體差異較大，診斷也較困難。但由于此病患者的血清中均會(huì)出現(xiàn)特異或相對(duì)特異的自身抗體，臨床醫(yī)生大多依據(jù)抗核抗體 (ANA)檢查診斷此類疾病。本研究對(duì)2009年1—12月在我院行ANA檢查的854例住院患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，旨在探討ANA譜與彌漫性結(jié)締組織病發(fā)生的相關(guān)性及對(duì)臨床診斷的價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 213例彌漫性結(jié)締組織病患者中男74例，女139例;年齡28～70歲，平均 (41.6±12)歲;其中 SLE 89例，RA 83例，PM/DM 17例，MCTD 12例，SSc 6例，pSS 3例，血管炎3例，均根據(jù)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)和實(shí)驗(yàn)室檢查確診。選取同期非彌漫性結(jié)締組織病患者641例作為對(duì)照組。其中男402例，女239例;年齡18～82歲，平均 (45.4±18.3)歲。包括血液系統(tǒng)疾病 (如白細(xì)胞減少癥、白血病、貧血、骨髓異常增生癥、真性紅細(xì)胞增多癥)、慢性肝炎伴肝功能異常、各種腎病伴腎功能異常、甲狀腺疾病 (甲狀腺功能亢進(jìn)、甲狀腺功能減退、甲狀腺炎)、皮膚系統(tǒng)疾病 (銀屑病、過(guò)敏性皮炎、濕疹)、呼吸系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病等。

1.2 方法 所有患者于上午8:00～9:00空腹采集靜脈血5 ml，分離血清，保存于-20℃待測(cè)。采用德國(guó)歐蒙公司試劑，免疫印跡法檢測(cè)ANA譜，按說(shuō)明書(shū)操作，結(jié)果以出現(xiàn)一條黑色標(biāo)志線判為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 不同組別間率的比較用χ2檢驗(yàn)，p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

彌漫性結(jié)締組織病與非彌漫性結(jié)締組織病患者自身抗體譜的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。SLE患者中抗dSDAN抗體、抗組蛋白抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體陽(yáng)性率分別為 46.1%、19.1%、23.6% 和 68.5%，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)。MCTD患者抗組蛋白抗體、抗U1nRNP抗體陽(yáng)性率分別為 16.7%和66.7%，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)。SSc患者抗 Scl-70抗體陽(yáng)性率為66.7%，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)。pSS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗CENP-B抗體陽(yáng)性率分別為 66.7%、66.7% 和 33.3%，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)。血管炎患者抗 CENP-B抗體陽(yáng)性率為33.3%，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05，見(jiàn)表1)。

表1 各種結(jié)締組織病患者與對(duì)照者的ANA陽(yáng)性率比較〔n(%)〕Table1 Comparison of ANA positive rates between patients with diffuse connective tissue disease and controls

3 討論

ANA是最常出現(xiàn)于結(jié)締組織性疾病患者血清中的一組自身抗體的總稱，其靶抗原主要是真核細(xì)胞的核成分，也包括細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞骨架成分。ANA有3個(gè)組成部分:抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和可提取的核抗原 (extractable nuclear antigen，ENA)，ENA 又 包 括 抗 Sm、抗U1nRNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70抗體等多種自身抗體［2］。本研究ANA譜的檢測(cè)，就是測(cè)定上述3種不同類型的自身抗體。

本研究結(jié)果顯示抗dsDNA抗體陽(yáng)性率在SLE患者為46.1%，顯著高于MCTD的 25.0%、PM/DM 的 5.9% (P ＜0.05)。pSS和SSc患者抗 dsDNA抗體均為陰性。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道:抗dsDNA抗體在SLE患者中的陽(yáng)性率為37.9% ～78.0%。抗dsDNA抗體是SLE最重要的標(biāo)志性抗體，美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)已經(jīng)將抗dsDNA抗體列為SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一［2］，而且抗dsDNA抗體與SLE的活動(dòng)性有明顯的相關(guān)性，與狼瘡性腎炎密切相關(guān)。SLE患者定期檢測(cè)抗dsDNA抗體有助于監(jiān)控臨床病情變化和治療效果。

本研究結(jié)果表明SLE患者的抗Sm抗體陽(yáng)性率為 23.6%，在 RA、SSc、pSS、PM/DM、血管炎患者中抗Sm抗體均為陰性。據(jù)報(bào)道:抗Sm抗體在SLE中陽(yáng)性率為20%～40%，診斷SLE具有很高的特異性，是目前公認(rèn)的SLE的血清標(biāo)記抗體，且不受糖皮質(zhì)激素治療的影響［3］。本研究結(jié)果與報(bào)道的相符。同時(shí)，本研究中76.4%的SLE患者Sm抗體呈陰性，說(shuō)明抗Sm陰性并不能排除SLE診斷。

本研究中抗組蛋白抗體在多種疾病出現(xiàn)，其在SLE患者中陽(yáng)性率達(dá)到19.1%，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中達(dá)到6.0%，在MCTD患者中達(dá)到16.7%。目前，抗組蛋白抗體與病情的相關(guān)性報(bào)道不一［4］。有學(xué)者認(rèn)為，抗組蛋白抗體是狼瘡患者主要自身抗體之一，在整個(gè)病程中效價(jià)波動(dòng)很大，提示抗組蛋白抗體可能參與SLE發(fā)病。但對(duì)SLE不具有診斷特異性。

本研究中，抗U1n-RNP抗體出現(xiàn)于多種自身免疫性疾病，包括MCTD、SLE、RA、PM/DM、pSS、SSc等。在MCTD中抗U1nRNP抗體陽(yáng)性率達(dá)66.7%，在SLE中達(dá)25.8%，在 RA中達(dá)7.2%，在 SSc中為33.3%，在血管炎中為33.3%。抗U1n-RNP抗體在MCTD中的陽(yáng)性率明顯高于其他彌漫性結(jié)締組織病的陽(yáng)性率。據(jù)葉應(yīng)嫵等［2］報(bào)道:抗 U1n-RNP抗體是MCTD的標(biāo)志性抗體但不是特異性抗體，在RA、pSS和血管炎中都有一定的陽(yáng)性率。本研究結(jié)果中pSS患者抗U1n-RNP抗體無(wú)一例陽(yáng)性，與此報(bào)道不相符，可能與pSS患者例數(shù)較少有關(guān)，待加大樣本量后進(jìn)一步分析。

本研究中，pSS患者抗SSA抗體陽(yáng)性率為66.7%，SLE患者抗SSA抗體陽(yáng)性率為68.5%，二者間無(wú)明顯差異。既往有文獻(xiàn)報(bào)道20%～60%的SLE患者可檢測(cè)到此抗體，抗 SSA抗體也見(jiàn)于 RA、pSS、皮肌炎等疾病中，陽(yáng)性率在3% ～7%［2］。抗SSA抗體在部分正常人中的陽(yáng)性率為0.1%，這意味著抗SSA抗體診斷pSS的特異性并不高。本研究結(jié)果表明抗SSA抗體在RA、MCTD、SSc、PM/DM中陽(yáng)性率為9.6% ～33.3%，無(wú)明顯差異，而且非彌漫性結(jié)締組織病患者抗SSA抗體陽(yáng)性率為4.6%，均高于文獻(xiàn)報(bào)道的陽(yáng)性率，考慮與試驗(yàn)條件和新疆西北人群的患病率不同有關(guān)。本研究結(jié)果表明，單-抗SSA抗體對(duì)pSS的診斷特異性較低。

本研究中抗SSB抗體在pSS中的陽(yáng)性率為66.7%，在SLE中為37.1%、在RA中為 4.8%、在 MCTD 中為 8.3%、在PM/DM中為5.9%，在其他彌漫性結(jié)締組織病如SSc、血管炎中無(wú)一例呈陽(yáng)性。抗SSB抗體診斷pSS的特異性較高。據(jù)報(bào)道:抗SSB抗體主要見(jiàn)于pSS，是pSS的血清特異性抗體［2］。抗 SSA與抗SSB抗體幾乎同時(shí)出現(xiàn)，因此，抗SSA和抗SSB抗體被認(rèn)為是pSS的標(biāo)志性抗體，聯(lián)合檢測(cè)抗SSA和抗SSB抗體有助于確診pSS病。

抗Scl-70抗體被視為SSc的血清特異性抗體［2］，本研究中 SSc患者抗 Scl-70陽(yáng)性率為66.7%。此外，SLE、RA和MCTD等僅1例陽(yáng)性外，其余都是陰性，抗Scl-70抗體陽(yáng)性有助于SSc的確診。

本結(jié)果顯示，抗CENP-B抗體在SLE、RA、pSS、PM/DM、血管炎等多種自身免疫性疾病中出現(xiàn)，且陽(yáng)性率比較無(wú)明顯差異。據(jù)報(bào)道:抗CENP-B抗體對(duì)彌漫性結(jié)締組織病無(wú)特異性診斷價(jià)值［2］。本研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)。

有必要指出:上述自身抗體譜僅是自身抗體中的一小部分，還有很多自身抗體因技術(shù)原因并未提純以供特異性疾病檢測(cè)和診斷。因此，為確定患者是否存在各種各樣的自身抗體，首先用間接免疫熒光法檢測(cè)血清中的各種自身抗體，以便于彌漫性結(jié)締組織病篩查，然后用線性免疫法檢測(cè)是哪一種或哪幾種自身抗體，以便于對(duì)彌漫性結(jié)締組織病的鑒別診斷，這一觀點(diǎn)在許多學(xué)者的試驗(yàn)中得到證實(shí)［5-6］。

綜上所述，通過(guò)檢測(cè)分析ANA譜再次證實(shí)自身抗體譜檢測(cè)結(jié)果與彌漫性結(jié)締組織病密切相關(guān)，為診斷和鑒別診斷該病提供了重要依據(jù)。

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