免疫組化在肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本鑒別診斷中的應(yīng)用

牛春波,賈飛勇,辛 華,王雪梅,王麗萍*

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院,吉林長春130033;2.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 兒內(nèi)科)

本研究旨在分析肺小細(xì)胞癌(SCLC)與鱗狀細(xì)胞癌(SCC)相關(guān)蛋白表達(dá)特點(diǎn),探討免疫組化方法在兩者鑒別診斷中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇吉林大學(xué)中日聯(lián)誼2009年1月-2010年8月支氣管鏡活檢標(biāo)本,均為10%中性福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,HE染色制片。顯微鏡觀察支氣管鏡活檢標(biāo)本的病理形態(tài),首先篩選診斷小細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌共60例,觀察兩種類型肺癌的病理形態(tài)特點(diǎn);并選擇病理形態(tài)不能確切分型而疑似兩種類型的標(biāo)本29例,其中男17例,女12例,年齡42-65歲,并進(jìn)一步檢測實(shí)驗(yàn)組癌組織CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6及 P63蛋白表達(dá)。

1.2 方法

1.2.1 形態(tài)學(xué)分型判斷 觀察HE染色切片病理形態(tài)特征,做出初步形態(tài)學(xué)分型鑒別。

1.2.2 蛋白表達(dá)檢測及結(jié)果判定 應(yīng)用免疫組化SP法檢測29例支氣管鏡活檢標(biāo)本各相關(guān)蛋白表達(dá) ,CD56、PAX-5、TTF1、CgA、Syn、CK5/6 及 P63 均為即用型抗體,購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司,按試劑盒說明書步驟進(jìn)行染色。用PBS代替一抗作陰性對照,用已知陽性組織作為陽性對照。CD56和CK5/6為細(xì)胞膜陽性,PAX-5、TTF1及P63為細(xì)胞核陽性,CgA和Syn為細(xì)胞漿陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS10.0軟件進(jìn)行進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間比較用 χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 肺小細(xì)胞癌的病理形態(tài)特征 小細(xì)胞癌細(xì)胞體積小,約是靜止淋巴細(xì)胞的2-3倍,組織處理好時(shí)觀察細(xì)胞略偏大。細(xì)胞呈圓形或橢圓形,胞質(zhì)少,染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁不明顯或缺乏核仁,核分裂易見。細(xì)胞排列呈梁狀、緞帶狀、巢狀等,可見菊形團(tuán)形成。低分化鱗癌細(xì)胞核略大,短梭形或橢圓形,核染色質(zhì)較粗糙,核仁明顯,胞漿豐富,細(xì)胞界限清楚,常可見間橋,癌細(xì)胞巢周圍可有基底細(xì)胞樣排列。部分病例兩種類型肺癌存在形態(tài)上的重疊。

2.2 肺小細(xì)胞癌與非角化鱗狀細(xì)胞癌的免疫表型

見表1,2。

表1 實(shí)驗(yàn)組肺癌的相關(guān)蛋白表達(dá)(n=29)

表2 肺小細(xì)胞癌與非角化鱗狀細(xì)胞癌的免疫表型對比(n=29)

3 討論

本研究檢測肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本CD56陽性率較高(20/21例),其在小細(xì)胞癌的表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記,是肺細(xì)胞癌最穩(wěn)定表達(dá)的蛋白標(biāo)記[1-5]。PAX-5是一種B細(xì)胞特異性激活蛋白(BSAP),是一種新的B細(xì)胞標(biāo)記,用于B細(xì)胞淋巴瘤的病理診斷。最近有報(bào)道PAX-5在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中有不同程度的表達(dá)[6],小細(xì)胞癌和Merkel細(xì)胞癌陽性表達(dá),而在類癌表達(dá)陰性,被用于分化差的神經(jīng)內(nèi)分泌癌的鑒別診斷,并可作為CD56和其它神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記陰性時(shí)的補(bǔ)充診斷標(biāo)記。本研究檢測肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本,PAX-5陽性率也很高(13/21例),且一例CD56陰性小細(xì)胞癌標(biāo)本PAX-5陽性,可作為其與低分化鱗狀細(xì)胞癌鑒別診斷的標(biāo)記。甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子(TTF-1)是在正常甲狀腺和肺上皮細(xì)胞表達(dá)的一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,在肺和甲狀腺的組織發(fā)生和細(xì)胞分化過程中起重要的調(diào)節(jié)作用。文獻(xiàn)報(bào)道在TTF-1在肺小細(xì)胞癌表達(dá)陽性率達(dá)80%-100%,而在鱗狀細(xì)胞癌陽性率小于10%。本研究結(jié)果顯示肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本,TTF-1陽性率也很高(20/21例),而低分化鱗狀細(xì)胞癌只有少數(shù)病例表達(dá)(1/8),表明TTF-1結(jié)合其他蛋白標(biāo)記指標(biāo),可作為其與低分化鱗狀細(xì)胞癌鑒別診斷的標(biāo)記。P63和CK5/6是肺鱗狀細(xì)胞癌的診斷標(biāo)記物[7]。P63同P53一樣屬于腫瘤抑制基因家族成員,廣泛表達(dá)于多種器官來源的具有鱗狀上皮分化潛能的基底細(xì)胞和儲備細(xì)胞,很少表達(dá)于肺小細(xì)胞癌和肺腺癌。CK5/6是上皮細(xì)胞標(biāo)志物,其在近60%的鱗狀細(xì)胞癌陽性表達(dá),在小細(xì)胞癌很少表達(dá)。本研究結(jié)果顯示肺小細(xì)胞癌支氣管鏡活檢標(biāo)本,P63和CK5/6的陽性率很低(2/21及1/21例),而低分化鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本大多陽性表達(dá)(均7/8例),表明兩者可作為小細(xì)胞癌與低分化鱗狀細(xì)胞癌鑒別診斷的標(biāo)記。

聯(lián)合檢測多種蛋白表達(dá)能夠準(zhǔn)確鑒別肺小細(xì)胞癌和低分化鱗狀細(xì)胞癌,免疫組化方法在兩種類型肺癌的病理鑒別診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

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