杜仲葉提取液對運動訓練大鼠血脂及其運動系統的影響

張偉東 劉麗芳

(黑龍江八一農墾大學軍事體育部，黑龍江 大慶 163319)

大量研究表明，杜仲葉提取液具有調節血壓、降低血糖、調節血脂、抗菌、抗病毒、抑制腫瘤細胞生長等藥理作用，以及延緩衰老、美白養顏、滋陰補腎、強壯筋骨等功效〔1～4〕。杜仲的主要功效成分有木脂素類、環烯醚萜類、苯丙素類、黃酮類、多糖類、杜仲抗真菌蛋白，此外杜仲還含有豐富的營養成分有氨基酸、脂肪酸、維生素、微量元素等〔5〕。本文觀察杜仲葉提取液對運動訓練后大鼠血脂和骨骼、肌肉以及心肺的影響，為杜仲提取液的臨床應用提供實驗依據。

1 材料和方法

1.1 試驗藥物 杜仲葉提取液(含量55%以上)。購自西安阿房宮藥業有限責任公司。

1.2 動物 雄性SD大鼠，體重180～220 g。購自陜西中醫研究所實驗動物中心，嚙齒類動物飼料喂養，自由飲食。實驗環境:室溫18℃ ～26℃，相對濕度45% ～65%，自然光照。

1.3 方法 將動物隨機分為安靜組、訓練組和藥物+訓練組，分籠飼養。訓練組和藥物+訓練組在60 cm×60 cm×65 cm的內壁光滑的玻璃池中進行無負荷游泳訓練，水溫25℃ ±1℃，水深55 cm，每日游泳訓練20 min，每周6 d，星期日休息，共4 w。用雙蒸水配成1%杜仲葉提取液水溶液，自由飲食。安靜組喂以同體積的雙蒸水，至訓練之日起每日給藥。在最后一次訓練至力竭。

1.3.1 血脂測定 所有大鼠摘眼球取血。總膽固醇(TC)含量、甘油三酯(TG)含量測定采用酶比色法測定，高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VDL)含量測定采用清除測定。

1.3.2 羥脯氨酸含量測定 收集處死大鼠血液、左腿部肌肉、左腿股骨、頸部皮膚、心、肺等組織器官各3～5 g。除血液外其他樣品均置生理鹽水中洗凈血液，并用濾紙吸干、稱重，再分別(包括血液)以pH7.2檸檬酸緩沖液低溫勻漿，每份樣品按10 mg加6 mol/L HCl 2 ml，125℃加熱2 h消化，取消化液2 ml加10 mol/L NaOH 1 ml，再用蒸餾水加至5 ml，過濾，取過濾液0.2 ml加檸檬酸緩沖液、氯氨T各1 ml，置室溫10 min，過氯酸2 ml，反應5 min，再加100 ml/L對二甲基氨基苯甲醛1 ml，置60℃水浴中20 min，冷卻后用724分光光度計在562 nm處比色測定。對尿液的測定，以處死小白鼠前1 d收集的全部尿液，先加酸分解，然后在過量的丙氨酸條件下用氯氨T氧化羥脯氨酸，硫代硫酸鈉中止氧化，再用對二甲基氨基苯甲醛試劑顯色測定羥脯氨酸含量。

1.4 統計學處理 計量資料以x±s表示，兩組間數據比較行t檢驗。

2 結果

2.1 杜仲葉提取液對大鼠血液TC含量的影響 訓練后大鼠血清TC的含量無明顯變化，但給藥組血清TC含量顯著降低，說明杜仲葉提取液能明顯的降低運動訓練大鼠血清TC含量。見表1。

表1 杜仲葉提取液對運動訓練大鼠血清TC、TG含量的影響(x ± s，n=6)

2.2 杜仲葉提取液對大鼠HDL、LDL和VLDL含量的影響與安靜組比較，訓練組HDL含量無明顯變化，但LDL、VLDL的含量顯著升高;但給藥+訓練組與訓練組、安靜組比較血清HDL的含量顯著升高，LDL、VLDL的含量明顯降低。見表2。

表2 杜仲葉提取液對大鼠血清HDL、LDL和VLDL含量的影響(x ± s，n=6)

2.3 羥脯氨酸含量測定 給藥+訓練組大鼠肌肉、骨骼、皮膚、心、肺中羥脯氨酸合成均顯著增加，而單純運動也在一定程度上對羥脯氨酸合成有促進作用;血液和尿液中羥脯氨酸含量，運動與安靜組變化均不太明顯，給藥+訓練組組變化明顯。見表3。

表3 杜仲對不同組別大鼠組織中羥脯氨酸含量的影響(x ± s，n=6，mg/g)

3 討論

運動系統主要由骨骼、肌肉和關節構成，并與機體的心肺功能關系密切。膠原蛋白(Collagen)又稱膠原，是由三條肽鏈擰成的螺旋形纖維狀蛋白質。膠原蛋白是動物結締組織重要的蛋白質，結締組織除了含60% ～70%的水分外，膠原蛋白占了約20% ～30%。人體成分中有16%左右是蛋白質，膠原蛋白占體內蛋白質總量的30% ～40%，故成年人體內約有3 kg左右膠原蛋白，主要存在于皮膚肌肉、骨骼、牙齒、內臟(如胃、腸、心肺、血管與食道)與眼睛等處。杜仲可通過改變肌肉、骨骼、皮膚、心、肺中膠原蛋白合成的能力進而影響運動系統的功能。膠原蛋白由纖維細胞合成，膠原纖維由許多膠原微纖維組成，膠原微纖維則由原膠原組成。原膠原肽鏈中含有羥脯氨酸及羥賴氨酸殘基，它們常在原膠原α肽鏈Y位置上出現，而不帶羥基的脯氨酸則常在X位置上出現。羥脯氨酸及脯氨酸總數在原膠原分子中約占22%左右，也是維持原膠原分子三聯螺旋構型的重要組成部分。因此測定體內組織中羥脯氨酸(γ羥基β吡咯烷α羧酸)含量則可充分表現組織膠原蛋白合成的能力，而膠原蛋白分解又可釋放出游離的羥脯氨酸或含羥脯氨酸的寡肽，通常5%～10%隨尿排出。膠原蛋白合成過程中，先形成原膠原再經過聚合及共價交聯，才產生膠原微纖維，未經共價交聯的原膠原分子較膠原纖維更易分解，當膠原蛋白合成增強時可溶性原膠原分子增多，分解隨尿排出的羥脯氨酸也會增多。因此，尿中羥脯氨酸排出量不僅是膠原分解強度的指標也與體內膠原合成密切相關。本研究說明運動本身有一定促進膠原蛋白合成的能力，但均沒有給藥組明顯。總之，杜仲對機體組織膠原蛋白合成有明顯的促進作用，將有利于機體加速體內膠原蛋白的新陳代謝，有防止機體衰老、保持組織器官結構的完整性和增強其功能的作用。杜仲葉提取液能消除機體內的自由基，從而提高肌肉運動能力和抗疲勞的能力〔6〕，對運動訓練大鼠補充杜仲可以提高大鼠的運動能力。

1 盛軍利，孫桂菊.杜仲的功效學研究現狀及其應用前景〔J〕.醫學綜述，2006;12(16):1022-4.

2 董大鵬，張學俊，王慶輝，等.杜仲葉中抗氧化活性成分的提取〔J〕.貴州工業大學學報(自然科學版)，2006;35(4):1-3.

3 張瑛朝，張延敏，郭代立，等.復方杜仲葉合劑對人體降壓作用的實驗研究〔J〕.中成藥，2001;23(6):418-21.

4 羅麗芳，吳衛華，歐陽冬生，等.杜仲的降壓成分及降壓機制〔J〕.中草藥，2006;37(1):150-2.

5 程光麗.杜仲有效成分分析及藥理學研究進展〔J〕.中成藥，2006;28(5):723-5.

6 趙 暉，李宗友.杜仲葉藥理作用研究(Ⅱ)-抗疲勞及愈傷作用〔J〕.國外醫學·中醫中藥分冊，2000;22(4):211-5.