體外累計釋放率優化龍牙楤木中物質基礎成分齊墩果酸緩釋片的工藝研究

陳大忠，于永軍，王海龍，王艷紅，楊炳友，石朗

(1.黑龍江中醫藥大學中醫藥研究院，黑龍江 哈爾濱 150040;2.黑龍江省軍區醫院，黑龍江 哈爾濱 150001;3.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040;4.黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院，黑龍江 哈爾濱 150040)

龍牙楤木中物質基礎成分齊墩果酸，是在東北道地中藥材龍牙楤木中提取、分離后獲得的。目前，以膠囊劑劑型在臨床上用于治療黃疸型肝炎、遷延性肝炎、酒精肝和脂肪肝等［1－2］。國內對于齊墩果酸單體緩釋制劑有文獻研究報道，本實驗結合文獻對齊墩果酸緩釋制劑的研究［3］，采用重復正交實驗考察骨架緩釋材料的類型、骨架緩釋材料的用量、填充劑的種類比例和粘合劑的種類，確定出龍牙肝泰緩釋片的最佳工藝。

1 儀器與藥品

Waters 600E－2487型高效液相色譜儀(美國);Millennium 32色譜工作站數據處理系統(美國);電子分析天平BS124SGC－06(北京賽多利斯儀器有限公司);乙腈(色譜級);水為重蒸餾水;其他均為分析純;齊墩果酸對照品(中國藥品生物制品檢定所);羥丙基甲基纖維素(HPMCK100、HPMCK15、HPMCK4M，上海COLORCON有限公司)。

2 方法與結果

2.1 緩釋片累積釋放度的測定

2.1.1 色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18柱(250mm ×4.6mm，5μm);流動相:乙腈－0.1%磷酸溶液(67∶33)［4］;檢測波長:210nm;流速:1.0mL·min－1;柱溫:30℃［5］。

2.1.2 累積體外釋放度的方法

按照2010年版《中國藥典》體外釋放度試驗法的轉藍法測定，轉速100rpm·min－1，釋放介質選用0.5%十二烷基硫酸鈉溶液［磷酸鹽調 pH值為(7.0±0.1)］，溫度為(37 ±0.5)℃。分別在 2、6、12h取樣5ml(同時補充等體積同溫介質)，濾過，精密取續濾液20μl注入液相色譜儀，測定峰面積。再精密稱取齊墩果酸對照品適量，加甲醇溶解并稀釋制成濃度為0.102mg·mL－1的對照品溶液，精密吸取對照品溶液20μl注入液相色譜儀，外標法測定不同時間的累計釋放度。

2.2 正交實驗設計重復試驗優化緩釋片制劑工藝

2.2.1 正交實驗設計

根據各單因素對緩釋片釋放度影響的預考察，針對影響釋放度貢獻大的4因素，即 HPMC分型(黏度)、HPMC用量、填充劑比例關系和粘合劑的分型，采用3水平正交實驗，見表1。

表1 正交實驗表因素水平表

表2 緩釋片制劑工藝正交實驗方案與結果(n=3)

2.2.2 正交實驗方案與結果

利用2h、4h和6h三個時間點的累計釋放度(Q)作為綜合指標，采用公式:Y=Q12h－［(Q2h－30%)2+(Q6h－50%)2］1/2計算綜合分值。由于4因素占據了正交實驗表L9(34)中的所有列，故9個處方試驗中，對每個處方試驗進行3次重復試驗，對其27次試驗數據結果進行統計學分析，結果見表2、表3。

表3 正交實驗結果方差分析

根據正交實驗分析結果表明，各因素對緩釋片制劑釋放度影響的大小順序為:C＞D＞A＞B，由方差分析顯著性確定最佳緩釋片制劑工藝應為A1B2C3D2，即親水凝膠骨架材料 HPMCK4M使用量35%，填充劑MCC(微晶纖維素)與乳糖比例為1∶1，粘合劑采用6%PVP(聚乙烯吡咯烷酮)溶液。

3 討論

3.1 在正交實驗設計考察影響緩釋片的主要4因素HPMC分型(黏度)、HPMC用量、填充劑比例關系和粘合劑的分型過程中，采用了正交實驗表L9(34)試驗方案，由于考察的4因素占滿了正交表的所有列，誤差項空白列缺省。因此，對9個處方試驗增加了每個實驗重復3次的試驗方法，利用誤差項SSe作為對照方差分析，結果準確、合理，根據最終確定的最佳制劑工藝，骨架材料的選擇與相關文獻［6］報道基本一致。

3.2 在正交實驗的處方篩選綜合評分K值計算參考了法莫替丁緩釋片綜合評分思想［7］，根據2005版《中國藥典》二部的要求，緩釋片應在2h釋放(Q2)接近30%，6h釋放(Q6)接近50%為宜，［(Q2－30)2+(Q6－50)2］1/2反映了2h、6h的釋藥偏差，二者越小越好;12h釋藥應大于75%，因此，K=Q12－［(Q2－30)2+(Q6－50)2］1/2越大越好。

［1］杜施霖，遲寶榮.龍牙楤木皂苷對大鼠酒精性肝病防治的作用［J］.吉林大學學報:醫學版，2005，31(1):64－67.

［2］吳勃巖，祝司霞，王晶.龍牙楤木葉總皂甙對荷瘤鼠尾變型p53表達的影響［J］.中醫藥學報，2005，33(1):38－39.

［3］劉亞妮，易以木，陳華庭，等.齊墩果酸緩釋片的研制及體外釋放度考察［J］.中國醫院藥學雜志，2008，28(5):345－347.

［4］何文斌，何作民，黃婉鋒.HPLC法測定齊墩果酸膠囊中齊墩果酸含量［J］.中國藥事，2008，22(6):485－486.

［5］韋建華，李耀華，蔡少芬，等.HPLC法測定柿子中齊墩果酸與熊果酸的含量［J］.中國實驗方劑學雜志，2010，16(13):48－50.

［6］祝志賢，梁秋文.苦參堿緩釋片的制備及其釋放度的研究［J］.廣東藥學院學報，2008，24(6):569－571.

［7］曾環想，潘三衛，陳濟民，等.法莫替丁緩釋片的制備工藝及其體外釋放特性的研究［J］.中國藥學雜志，1997，32(4):213－216.