漿膜腔積液涂片和細胞塊雙方法檢測白血病細胞在臨床中的應用

張功亮，黃金長，彭 芳，曾金林，王 建，郭廣秀，肖軍蘭，湛 曦，陳 青，余燕琪

(江西省贛州市人民醫院病理科，江西 贛州 341000)

漿膜腔積液是白血病患者常見的臨床表現[1]，診斷漿膜腔積液中的白血病細胞難度較大。本文對有骨髓涂片對照的伴發漿膜腔積液的白血病病例1例，用漿膜腔積液涂片加細胞塊方法對其細胞形態、免疫表型等特征進行分析，探討如何用漿膜腔積液涂片加細胞塊檢測方法正確診斷漿膜腔積液中的淋巴造血組織腫瘤。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 患者男性，75歲，因頭暈，乏力，胸悶3月余入院。查體：重度貧血外貌，全身皮膚黏膜未見出血點和瘀斑，脾臟中度腫大。血常規：白細胞：13.2×109/L，中性粒細胞百分比：45.2%，單核細胞百分比 22.3%，紅細胞 1.98×1012/L，血紅蛋白 59g/L，血小板75×109/L。血涂片異常白細胞形態觀察：見有幼稚細胞。骨髓涂片：有核細胞增生明顯活躍，原粒細胞20%，早幼粒細胞1%，原單4%，幼單11.5%，診斷：急性粒-單核細胞白血病。X線：雙側胸腔中度積液。

1.2 漿膜腔積液標本由臨床醫師采集，制備細胞離心涂片和細胞塊切片，細胞涂片采用瑞氏染色，細胞塊切片采用蘇木素-伊紅染色。

1.3 免疫細胞化學 用3μm厚細胞塊石蠟切片做免疫細胞化學檢測，使用的第一抗體有LCA、MPO、CD117、CD34、CD68、Calretini。 抗體均購自福建邁新生物技術開發有限公司，免疫細胞化學染色采用SP法。陽性信號定位：LCA陽性信號位于細胞膜;MPO、CD117、CD68、Calretinin 陽 性 信 號 位 于 細 胞質；CD34陽性信號位于細胞膜或細胞質。

2 結果

2.1 血性胸水500ml。

2.2 細胞涂片 查見大量形態一致中等偏小的幼稚細胞(約占70%～80%)，另見部分中性粒細胞和淋巴細胞(圖 1)。

2.3 細胞塊切片均查見形態一致中等偏小的細胞，散在分布，細胞胞質少，核圓形或卵圓形，染色質細膩(圖 2)。

2.4 免疫細胞化學特征：腫瘤細胞表達MPO(圖3)、CD117、CD34 和 CD68，淋巴細胞表達 LCA,間皮細胞表達Calretinin。

圖1 細胞涂片中形態一致中等偏小的腫瘤細胞約占70%～80%瑞氏染色 ×400

圖2 細胞塊中腫瘤細胞形態一致中等偏小，細胞胞質少，核圓形或卵圓形 HE染色×200

圖3 腫瘤細胞MPO陽性 SP法 ×400

2.5 胸水細胞涂片和細胞塊切片診斷：查見髓系白血病細胞。

3 討論

漿膜腔積液是白血病患者常見的并發癥，多數白血病患者發生漿膜腔積液是由于腫瘤浸潤漿膜或器官所致，出現漿膜腔積液提示預后不良[1，2]。漿膜腔積液中白血病細胞的特征是較多散在的形態較一致的不成熟細胞，但不同類型的淋巴造血組織腫瘤細胞形態不同，需要借助輔助方法來進一步確診。細胞塊的應用彌補了細胞涂片方法單一的缺點，使細胞標本得以保存，具有了連續切片的可能，有利于進行多項檢查 ，而且操作方法簡便，無需特殊儀器。用細胞塊石蠟切片可以進行多種抗體的免疫細胞化學檢測，操作方便[3，4]。免疫細胞化學染色操作簡便，陽性物質定位準確、敏感性高、特異性強，使用免疫表型來協助確定細胞學診斷，不僅可以區分是否是白血病細胞，而且可以進一步確定腫瘤細胞的免疫表型，從而提高腫瘤細胞學診斷的準確性[5]。以漿膜腔積液為首發癥狀的淋巴造血組織腫瘤容易誤診，需要與良性淋巴細胞增生性病變以及其他小圓細胞腫瘤等進行鑒別診斷。

本例為急性粒-單核細胞白血病患者的血性胸腔積液，積液涂片全片70%～80%為幼稚細胞，這些細胞形態一致中等偏小，散在分布，細胞胞質少，核圓形或卵圓形，染色質細膩，免疫表型表達LCA、MPO、CD117、CD34和CD68，胸水細胞涂片和細胞塊切片診斷：查見髓系白血病細胞。細胞病理診斷漿膜腔積液的白血病細胞難度較大，本文介紹的經驗為及時發現白血病細胞和檢測該病的復發提供依據。

[1]周道銀,惠小陽,凌 勵,等.漿膜腔積液檢出白血病細胞的觀察分析[J].檢驗醫學,2004,19(3):206-208.

[2]Bolanowski M,Kuliszkiewicz-Janus M,Sokolska V.Diffuse malignant lymphoma type B with optic chiasm infiltration,visual disturbances,hypopituitarism,hyperprolactinaemia and diabetes insipidus.Case report and literature review[J].Endokrynol Pol,2006,57(6):642-647.

[3]蘇學英,許 霞,唐 源,等.漿膜腔積液中的淋巴造血組織腫瘤細胞病理診斷分析[J].中華病理學雜志,2009,38(8):542-546.

[4]蘇學英,潘 云,唐 源,等.淋巴母細胞性淋巴瘤／白血病26例細胞病理學分析[J].臨床與實驗病理學雜志,2006,22(5):545-548.

[5]尚士瑄,趙小丹,肖學英.細胞塊切片免疫組化染色在腫瘤細胞學診斷中的應用[J].腫瘤基礎與臨床,2010,23(6):514-515.