止嗽退熱合劑主要藥理作用研究*

王之梅 萬(wàn) 鵬 黃崇剛 張家繼

1重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院（重慶400700）2重慶市中藥研究院（重慶400065）3重慶市中醫(yī)院（重慶400021）

止嗽退熱合劑主要組成藥為金銀花、連翹和桔梗等，具有廣譜抗菌、抗病毒和解熱止咳作用，對(duì)感染性發(fā)熱的退熱明顯。根據(jù)中醫(yī)學(xué)辨證施治的理論，為充分發(fā)揮藥效成分的作用，利用現(xiàn)代加工方法開(kāi)發(fā)制備的止咳退熱合劑具有較強(qiáng)的疏散風(fēng)熱、宣肺祛痰止咳作用，適用于風(fēng)溫發(fā)熱表證。本文對(duì)其安全性和止嗽、退熱藥理作用進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 藥物 止嗽退熱合劑（棕黃色液體，生藥含量為5.64g/mL，由北碚區(qū)中醫(yī)院提供，批號(hào)：100412）臨用前用蒸餾水配制后使用。陽(yáng)性對(duì)照藥：復(fù)方磷酸可待因溶液（香港澳美制藥，批號(hào)：1003301），阿司匹林腸溶片（石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號(hào)：090713），臨用前用蒸餾水配成混懸液使用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠，雄性，SPF級(jí)，重慶市中藥研究院動(dòng)物室提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）20070006；昆明種小鼠，雄性，SPF級(jí)，重慶市中藥研究院動(dòng)物室提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）20070006。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在重慶市中藥研究院藥理研究室3級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.3 儀器及試劑 多功能誘咳引喘儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站，型號(hào)：YLS-8A。電子體溫計(jì)，杭州華安醫(yī)療保健用品有限公司，型號(hào)：DT-OIA。氨水，重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20090608；角叉菜膠，Sigma，批號(hào)：116K0105

1.4 氨水誘發(fā)小鼠咳嗽試驗(yàn)[1]將小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只小鼠，即止咳退熱合劑高劑量組（26g/kg）、中劑量組（13g/kg）、低劑量組（6.5g/kg）、磷酸可待因組（6.7mL/kg）和對(duì)照 組（0.5%CMC-Na），給藥體積 10mL/kg。各組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7d。末次給藥后1h將小鼠置于多功能誘咳引喘儀內(nèi)，以28%濃氨水通過(guò)誘咳引喘儀進(jìn)行噴霧，觀察小鼠的咳嗽反應(yīng)（以腹肌收縮、張大嘴為咳嗽），記錄從放入小鼠到發(fā)生咳嗽的時(shí)間（即潛伏期）和3min內(nèi)小鼠咳嗽次數(shù)。

1.5 角叉菜膠致大鼠發(fā)熱試驗(yàn)[1]實(shí)驗(yàn)前用體溫表測(cè)大鼠肛溫2次，連續(xù)3d，選取溫度波動(dòng)不超過(guò)0.3℃的動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)。將大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，即止咳退熱合劑高劑量組（26g/kg）、中劑量組（13g/kg）、低劑量組（6.5g/kg）、阿司匹林組（0.025g/kg）、對(duì)照組（0.5%CMC-Na），給藥容積10mL/kg。按上述分組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)5d。末次給藥后5h于大鼠后腳兩爪囊跖皮下各注射1%角叉菜膠混懸液0.1mL/足致熱，注射后分別于0.5、l、1.5h各測(cè)定大鼠肛溫1次。

1.6 止嗽退熱合劑最大給藥量毒性試驗(yàn)[2]根據(jù)預(yù)試結(jié)果，給予6只小鼠（雌雄各半）一次性最大質(zhì)量濃度（5.64g/mL），最大給藥體積（0.4mL/10g，相當(dāng)于成人臨床每日用藥量的347.08倍）的止嗽退熱合劑灌服，無(wú)動(dòng)物死亡，不能測(cè)出小鼠LD50，故進(jìn)行最大給藥量測(cè)定。參照文獻(xiàn)[3]要求，采用藥物組與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照比較。適應(yīng)性飼養(yǎng)后，30只健康小鼠均用于試驗(yàn)。按體質(zhì)量分為止嗽退熱合劑組（20只）、對(duì)照組（10只）。飼養(yǎng)于普通級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，分盒飼養(yǎng)，采取耳標(biāo)進(jìn)行標(biāo)記。小鼠禁食不禁水12h，按最大質(zhì)量濃度（5.64g/mL），最大給藥體積（0.4mL/10g）每日兩次灌服，間隔4h，對(duì)照組給予蒸餾水。記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況，連續(xù)觀察14d。同時(shí)記錄給藥后第1、2、3、7、14日的體質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)小鼠進(jìn)行解剖觀察。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)均以（±s）表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 止嗽退熱合劑對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽的影響 見(jiàn)表1。止嗽退熱合劑各劑量組能明顯延長(zhǎng)濃氨水所致小鼠咳嗽的潛伏期和減少小鼠咳嗽次數(shù)。

表1 各組小鼠咳嗽潛伏期、咳嗽次數(shù)比較 （±s）

表1 各組小鼠咳嗽潛伏期、咳嗽次數(shù)比較 （±s）

與對(duì)照組比較，*P＜0.05,**P＜0.01。 下同。

組 別 n 潛伏期（s）咳嗽次數(shù)（次）對(duì)照組 10 35.90±5.59** 38.10±7.09**止嗽退熱合劑高劑量組 10 41.50±6.49** 30.80±7.22**止嗽退熱合劑中劑量組 10 45.20±5.51** 24.10±7.03**止嗽退熱合劑低劑量組 10 46.00±6.41** 23.30±7.41**磷酸可待因組 10 50.40±5.91** 19.10±4.46**

2.2 止嗽退熱合劑對(duì)角叉菜膠致發(fā)熱大鼠肛溫的影響 見(jiàn)表2。嗽退熱合劑中、低劑量組在1、1.5h時(shí)間段能明顯抑制角叉菜膠所致的大鼠肛溫升高。

表2 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)肛溫比較 （℃，±s）

表2 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)肛溫比較 （℃，±s）

組 別 n 0.5h 1h 1.5h對(duì)照組 8 37.96±0.37**37.75±0.40 38.07±0.36**止嗽退熱合劑高劑量組 8 37.80±0.37**止嗽退熱合劑中劑量組 8 37.55±0.45*38.04±0.30**37.560.31**止嗽退熱合劑低劑量組 8 37.36±0.39**37.75±0.41 37.43±0.54 37.58±0.58 37.38±0.56**阿司匹林組 8 37.28±0.33 37.30±0.28**37.27±0.32**

2.3 止嗽退熱合劑最大給藥量毒性試驗(yàn)對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響 小鼠給予止嗽退熱合劑后5min后，動(dòng)物開(kāi)始出現(xiàn)倦臥、自發(fā)活動(dòng)減少等現(xiàn)象，持續(xù)時(shí)間10～15min不等，15min后基本恢復(fù)正常。止咳退熱合劑組連續(xù)觀察14d無(wú)動(dòng)物死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)小鼠進(jìn)行解剖，肉眼觀察臟器無(wú)明顯改變；對(duì)小鼠的體質(zhì)量等無(wú)明顯影響。提示止嗽退熱合劑對(duì)小鼠毒性較低。見(jiàn)表3。

表3 各組小鼠體質(zhì)量比較 （g，±s）

表3 各組小鼠體質(zhì)量比較 （g，±s）

組 別 n 給藥時(shí)體質(zhì)量給藥后體質(zhì)量增長(zhǎng)值第1天 第2天 第3天止嗽退熱合劑組 20 19.97±1.19 3.86±0.69 4.93±0.51 7.65±1.04對(duì)照組 10 20.15±0.96 4.67±0.80 5.26±1.69 7.69±1.60第7天12.78±3.09 12.16±2.35第15天18.32±4.34 17.28±4.63

3 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，止咳退熱合劑對(duì)發(fā)熱、咳嗽有明顯抑制作用，對(duì)動(dòng)物臟器和機(jī)體代謝均無(wú)明顯不良影響，毒性實(shí)驗(yàn)中的給藥量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)實(shí)際成人正常用量。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人雖有種屬區(qū)別，可以推斷在臨床上限于常用量是沒(méi)有毒性的，可供臨床用藥參數(shù)。止咳退熱合劑主藥金銀花、連翹，具有抗菌譜廣及明顯的抗炎、抗過(guò)敏與增強(qiáng)免疫功能等作用[4]，適用于感染性疾病的防治用藥，但其較強(qiáng)的解熱止咳作用原理尚待進(jìn)一步研究，止嗽退熱合劑雖然毒性小、用藥安全性大，但也不宜濫用。

[1]陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：625.

[2]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范[S].2003：1.

[3]《中藥、天然藥物急性毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》課題研究組.中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].2005：1.

[4]王浴生.中藥藥理與應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1983：515，703.