小兒腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF的表達變化及意義

宮相翠

(青島市婦女兒童醫療保健中心，山東青島266011)

腎母細胞瘤是嬰幼兒時期最常見的惡性實體腫瘤之一，由腎源性上皮和間質組成。survivin蛋白是凋亡抑制蛋白因子家族的成員［1］。血管內皮生長因子(VEGF)是目前已知的促血管生成因子中作用最強，特異性最高的促有絲分裂原［2］。2008年1月～2010年12月，我們采用免疫組化法檢測腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF，探討其與腎母細胞瘤臨床病理指標的關系，為病情及預后評估提供依據。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 36例腎母細胞瘤組織均為在我院手術切除并經病理證實的病理存檔標本。36例患兒中男17例，女19例;年齡5個月～8歲。根據美國腎母細胞瘤研究組標準［3］，預后良好組織型24例，預后不良組織型12例;按美國 Wilms'瘤研究組(NWTS)臨床分期［4］，Ⅰ期8例、Ⅱ期12例、Ⅲ期11例、Ⅳ期5例;有淋巴結轉移21例，無淋巴結轉移15例。另取20例瘤旁正常腎組織標本作為對照。所有患兒術前均未行放化療及免疫治療。所有標本均采用10%甲醛液固定，石蠟包埋，4 μm連續切片。

1．2 survivin蛋白及VEGF檢測方法 ①主要試劑:兔抗人survivin多克隆抗體、兔抗人VEGF免疫組化試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)。②染色方法:采用免疫組化SP法，按試劑盒說明書操作。③結果判定:根據文獻［1，2］，均觀察 5 ～10 個高倍視野(×200)，以細胞質或細胞膜呈棕黃或棕褐色者為survivin蛋白、VEGF陽性細胞，其中陽性細胞數＜10%為VEGF陰性表達，≥10%為VEGF陽性表達。survivin蛋白表達根據著色深淺及陽性細胞數判定:無陽性染色為(－)，細胞著色較淺、陽性細胞數＜25%為+，著色較深、陽性細胞數25% ～50%為++，著色深、陽性細胞數＞50%為+++;將－、+視為陰性表達，++、+++視為陽性表達。

1．3 統計學方法 采用SPSS12．0統計軟件，數據比較用 χ2檢驗，α =0．05。

2 結果

腎母細胞瘤組織中survivin蛋白及VEGF陽性表達率分別是66．6%和80．5%，均明顯高于瘤旁正常腎組織的0和5%(P均＜0．05)。survivin蛋白及VEGF表達與腎母細胞瘤臨床分期、預后組織型、淋巴結轉移有關(P均＜0．05)。詳見表1。

表1 survivin蛋白、VEGF表達與腎母細胞瘤臨床病理參數的關系

3 討論

腎母細胞瘤是上皮細胞和間質組織組成的惡性混合瘤，它起源于未分化的后腎胚胎，是一種生長迅速的實體惡性腫瘤。研究發現［2，5］有很多因子均具有促進腫瘤新生的作用，其中VEGF是迄今為止發現的作用最強的促血管形成因子，且腫瘤細胞可通過自身分泌產生，直接作用于血管內皮細胞并刺激內皮細胞有絲分裂，促進新生血管的形成和生長;VEGF還能增強血管內皮細胞的通透性，導致纖維蛋白原的沉積和纖維凝膠的聚集，促進新生血管生長。survivin蛋白是目前發現的惟一具有抗凋亡及促血管生成作用的細胞因子，可對抗G2～M期細胞凋亡的誘導，抑制 Fas介導的細胞凋亡［6］。因此，survivin可能是新生血管形成過程中生長因子誘導的保護性基因，正常情況下維持血管內皮細胞的增殖，但在病理情況下如惡性腫瘤中survivin呈過表達，且與腫瘤侵襲性及預后有關［7］。

本研究結果顯示，腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于癌旁正常腎組織(P＜0．05)，且Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移的腎母細胞瘤患兒，其瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移者(P均 ＜0．05)。說明survivin蛋白、VEGF表達上調在腎母細胞瘤發生發展過程中起著非常重要的作用。預后不良型腎母細胞瘤分化差、生長快，具有轉移早、易復發等特點。本研究發現，預后不良組織型的腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于預后良好組織型者(P＜0．05)，說明survivin蛋白、VEGF表達上調可以作為腎母細胞瘤分化差的標志，可以評估病情并預測預后。

［1］姜忠，孫永峰，黃緒峰，等．survivin蛋白在腎母細胞瘤的表達及意義［J］．山東醫藥，2006，46(10):16-17．

［2］崔清波，楊旗，孟祥喜．兒童腎母細胞瘤中VEGF表達水平的研究［J］．實用腫瘤學雜志，2005，19(2):113-114．

［3］余亞雄．小兒外科學［M］．北京:人民衛生出版社，1997:41-44．

［4］高解春，王耀平．現代小兒腫瘤學［M］．上海:復旦大學出版社，2003:524-529．

［5］張謙，單巖，陳清江．血管內皮生長因子在預測腎母細胞瘤轉移中的作用［J］．中華兒科雜志，2005，43(3):213-214．

［6］ Miller MA，Karacay B，Breslow NE，et al．Prognostic value of quantifying apoptosisfactor expression infavorable histology Wilmstumors［J］．J Pediatr Hematol Oncol，2005，27(1):11-14．

［7］姜忠，楊傳民，江布先．凋亡相關蛋白survivin、Fas在腎母細胞瘤中的表達及其臨床意義［J］．實用兒科臨床雜志，2006，21(11):668-669．