食管鱗癌患者血清VEGF、Endostatin水平變化及意義

錢文軍，紀 勇，茅衛東，劉少平，沈 東，林 峰，陸向東

(東南大學附屬江陰醫院，江蘇江陰214400)

腫瘤的生長和轉移必須依賴于血管生成［1］，抑制其血管生成能夠控制其生長和轉移［2］。血管內皮生長因子(VEGF)可與血管內皮細胞特異性結合，刺激血管內皮細胞增殖，并促進血管內物質滲出，為腫瘤細胞的遷徙和轉移提供條件［3］。內皮抑素(Endostatin)被認為是最有效的內源性血管生長抑制因子之一，其表達水平與多種惡性腫瘤的進展和預后密切相關［4］。本研究采用 ELISA法對126例食管鱗癌患者血清中的VEGF和Endostatin進行了檢測，觀察其水平變化并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 2006年8月～2009年6月收治的食管癌患者126例，男86例，女40例;年齡45～74歲。本組符合以下標準:病理學檢查診斷為食管鱗癌，患者術前未接受放療、化療及其他任何針對癌的治療。腫瘤位置:食管上段16例，食管中段68例，食管下段42例。腫瘤T分期:T1期24例，T2期35例，T3期44例，T4期23例。腫瘤長度(以切除后測量腫瘤侵犯食管縱軸長度為標準)3～12 cm。腫瘤組織分化程度:高分化42例，中分化36例，低分化48例。選擇體檢健康者14例作對照，男10例，女4例;年齡40～70歲。

1．2 VEGF、Endostatin檢測方法 采用非抗凝管抽取食管鱗癌患者及健康對照者的外周靜脈血5 ml，室溫放置30～60 min，5 000 r/min離心10 min，分離血清。將血清置2 ml的 Eppendorf管中，-20℃冷凍。采用ELISA法檢測血清VEGF、Endostatin。按試劑盒說明書操作，于450 nm處檢測VEGF的光密度值(OD值)，于490 nm處檢測Endostatin的OD值。結果判斷:①VEGF:以標準品濃度作橫坐標、VEGF的OD值作縱坐標繪制標準曲線，在標準曲線上查出VEGF濃度。②Endostatin:以標準品濃度作橫坐標(橫軸為對數刻度)、Endostatin的OD值作縱坐標繪制標準曲線，在標準曲線上查出Endostatin濃度。所有標本重復檢測2次，取均值。

1．3 統計學方法 采用SPSS13．0統計軟件。組內及組間均數比較用t檢驗，多組均數比較用單因素方差分析，方差不齊或非正態分布資料的比較用秩和檢驗，VEGF與Endostatin的相關性予直線回歸分析。P≤0．05為差異有統計學意義。

2 結果

食管鱗癌患者和健康對照者血清VEGF水平分別為(20．68 ± 3．09)μg/L、(3．82 ± 6．28)μg/L，Endostatin分別為(4．96 ± 1．72)μg/L、(1．60 ±0．37)μg/L，VEGF/Endostatin 分別為 4．17 ± 0．28、2．38 ±0．75，各指標相比，P 均 ＜0．05。血清 VEGF、Endostatin水平與食管鱗癌腫瘤分化程度、有無淋巴結轉移、腫瘤直徑、TNM分期有關(P均＜0．05)，詳見表1。食管鱗癌患者血清VEGF與Endostatin水平呈正相關(r=0．594，P ＜ 0．01)，回歸方程:Y=0．065 8X+90．463。

3 討論

研究表明，VEGF和Endostatin分別是目前已知的作用最強、特異性最高的血管生成促進因子和抑制因子。由于基因表達的剪切方式不同，VEGF形成5 種不同異構體，即 VEGF121、145、165、189、206，5種異構體均能誘導體內血管生成［5］。Endostatin為膠原XⅧC-末端非膠原蛋白特征結構域(NC1)中的一內源性片段，大多分布在血管的基底膜上［6］，可抑制內皮細胞的增殖、遷移，并誘導其凋亡。

表1 血清VEGF、Endostatin水平與食管鱗癌患者臨床病理參數的關系(μg/L，ˉx ±s)

Kuroi等［7］檢測了多種癌癥患者血漿中的VEGF和Endostatin，發現其水平及二者比值明顯高于健康對照組。本研究觀察到，食管鱗癌患者血清中VEGF和Endostatin水平較健康對照者顯著升高，且兩者表達呈正相關。說明在食管鱗癌發生過程中，血管生成促進因子和抑制因子水平失衡，腫瘤通過分泌大量VEGF，促進血管生成，為腫瘤轉移打下基礎;同時，腫瘤細胞可能刺激包括Endostatin在內的多種血管形成抑制因子的合成，并通過血循環到達腫瘤部位，抑制腫瘤血管生成，與腫瘤血管生成促進因子相互拮抗［8］。

本研究發現，食管鱗癌患者血清 VEGF和Endostatin水平與腫瘤病變長度、淋巴結轉移、TNM分期及分化程度等密切相關，食管鱗癌患者病變越長、細胞分化程度越低、TNM分期越晚，其血清VEGF和 Endostatin水平越高，且 VEGF/Endostatin增大。說明在食管鱗癌的發展進程中，VEGF和Endostatin相對性失衡表達，最終表現為促血管生成作用，導致腫瘤無限制生長、侵襲和轉移。

綜上所述，本研究結果進一步證明了VEGF、Endostatin表達失衡在食管鱗癌發生、發展、侵襲和轉移中均起重要作用。血清VEGF、Endostatin水平可作為預測食管鱗癌預后、惡性行為的指標。

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