兩頭毛水提物對衰老小鼠心、肝及腎組織中 MDA、GSH和SOD含量的影響

張書偉，張莉蓉

鄭州大學基礎醫學院藥理學教研室鄭州450001

兩頭毛(incarvillea arguta royle，IAR)為彝醫習用藥材，別名嗩吶花、炮仗花或炮仗筒等。主要分布于甘肅、四川、貴州、云南及西藏等地。來源于紫葳科角蒿屬植物毛子草的帶根莖全草，具有祛風除濕，消炎止痛和活血散淤的功效［1］，主要用于治療肝炎、菌痢、癰腫、骨折血腫和風濕勞傷等。研究［2-4］發現自由基具有抗氧化作用，且與許多疾病有關。作者采用D-半乳糖致衰老小鼠模型，應用IAR后測定小鼠心、肝、腎中組織丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和還原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase，GSH)含量的變化，探討IAR的水提物對衰老小鼠的抗氧化活性及其可能的機制，為IAR的應用提供實驗性依據。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 MDA、GSH測定試劑盒和SOD試劑盒(南京建成生物工程研究所)，D-半乳糖(上海恒信化學有限公司，批號2009022)，維生素E(浙江醫藥股份有限公司新昌制藥廠，批號20100930)，Sartorius BP 211D型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)，TG16-WS高速離心機(南京賽特儀器廠產品)，UV-2409型紫外分光光度計(日本島津)。

1.2 實驗藥材及處理 IAR藥材購于昆明市金碧路圣愛中醫館。取IAR全草粉碎，過80目篩，用10倍量(大約10 L)的蒸餾水回流提取3 h，再加8倍量(大約8 L)的蒸餾水回流提取3 h，重復一次，合并3次濾液回收，得其水提物。臨用時配制成實驗所需濃度。

1.3 實驗動物分組及給藥［5］昆明種小鼠，雄性，體質量(20±2)g，由河南省實驗動物中心提供。在21～24℃、相對濕度45% ～55%的環境中適應飼養1周后實驗，期間自由飲食和飲水。72只小鼠按照隨機數字表分成6組，每組12只，分別為正常組、模型組、陽性藥物維生素E組(200 mg/kg)、IAR水提物(IAR-Water)低、中和高劑量組(相當于藥材1.9、3.8 和 7.6 g/kg)，給藥同時，模型組、陽性藥物維生素E組、IAR-Water低、中和高劑量組小鼠每天頸背部皮下注射D-半乳糖1 g/(kg·d)建立衰老小鼠模型，空白組皮下注射等量注射用水，共給藥7周。

1.4 小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量測定 給藥7周后處死小鼠，取心、肝、腎組織進行勻漿小鼠心、肝、腎各項指標測定所用測定方法均嚴格按所購ELISA試劑盒說明書進行。

1.5 統計學處理 采用SPSS 13.0分析數據，各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD含量的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量比較見表1。

表1 各組小鼠心、肝、腎組織中MDA、GSH和SOD的含量(n=12)

3 討論

研究［6］表明，IAR 中含有生物堿、黃酮、神經酰胺和三萜等多種化學成分。用叔丁基氫過氧化物為氧化劑使紅細胞氧化，加IAR提取物AB-2后，不僅可使紅細胞膜脂質的氧化物減少，還可保護膜蛋白的巰基不致氧化聚合，其作用要優于維生素E。IAR AB-2可防止血紅蛋白的自氧化及溶血，用電子自旋捕集法測羥自由基，結果說明AB-2可直接與羥自由基反應，可能是自由基的清除劑。

該研究顯示，IAR-Water能使小鼠心、肝、腎中的MDA不同程度下降，提示IAR-Water可抗脂質過氧化;能使小鼠心、肝及腎組織中的SOD和GSH不同程度升高，提示IAR-Water可清除·OH和H2O2。由此可見，IAR-Water可能通過抗脂質過氧化，清除·OH和H2O2自由基而發揮抗氧化作用。

［1］中華本草編委會.中華本草:第3卷［M］.上海:上海科學技術出版社，1999:641

［2］Luo ZY，Tang Y，You JL，et al.Protective effect of anisodamine in cultured bovine pulmonary endothelial cell injury induced by oxygen free radicals［J］.Arch Surg，1992，127(10):1204

［3］Baumgartner-Parzer SM，Wagner L，Pettermann M，et al.High-glucose-triggered apoptosis in cultured endothelial cells［J］.Diabetes，2005，44(11):1323

［4］方允輝，鄭榮梁.自由基生物學的理論與應用［M］.北京:科學出版社，2002.

［5］張振明，許愛霞，葛斌，等.太子參水提物的抗氧化活性［J］.中國醫院藥學雜志，2006，26(2):147

［6］付建軍，沈云亨，金慧子，等.兩頭毛的化學成分及藥理作用研究進展［J］.天然產物研究與開發，2007，19(B08):343