肺鱗狀細胞癌組織中磷酯酶CE1的表達

葛曉晴，任景麗，楊鯤鵬，王旭廣，黃壯士，張 進，陳培楠，谷 博，王立東

1)鄭州大學第二附屬醫院胸外科鄭州450014 2)鄭州大學第二附屬醫院病理科鄭州450014 3)河南省食管癌重點開放實驗室鄭州450052

近年來，肺癌的發病率逐年上升，嚴重危害人類健康，肺鱗狀細胞瘤約占肺癌的50%。最近的研究［1］發現磷酯酶 CE1(phospholipase C epsilon-1，PLCE1)為食管癌的易感基因，而食管癌的病理類型90%以上為鱗狀上皮細胞癌。作者采用免疫組化SP法檢測肺鱗狀細胞癌組織中 PLCE1的表達，并探討其表達與臨床病理特征的關系。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集鄭州大學第二附屬醫院2006年11月至2010年7月手術切除并經病理證實的肺鱗狀細胞癌組織48例，患者男44例，女4例，年齡31～77歲，≥60歲27例;按肺癌國際TNM分期標準(第7版)，Ⅰ+Ⅱ期20例，Ⅲ期28例;組織學分級G1、G233例，G315例;有淋巴結轉移26例;術前均未經任何放療和化療。同時選取48例癌旁正常肺組織作為對照。

1.2 PLCE1檢測 標本經福爾馬林固定后石蠟包埋，連續4 μm厚度切片。切片脫蠟后，于高溫pH 9.0 EDTA抗原修復液中修復6 min，自然冷卻至室溫，以體積分數3%的H2O2阻斷內源性過氧化物酶，再經一抗、二抗(均按150倍稀釋)作用后，DAB顯色并在光鏡下控制呈色，蘇木素復染后脫水，中性樹膠封片。兔抗人PLCE1抗體購自Sigma公司，Envision試劑盒購自DAKO公司。采用已知陽性肺鱗狀細胞癌的組織切片作為陽性對照;用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判定 以細胞核或細胞質棕黃色或棕褐色顆粒狀著色為陽性細胞。每張切片隨機選取10個高倍視野，計算陽性細胞所占的百分比，≥30%為陽性［2］。

1.4 統計學處理 采用SPSS 17.0對數據進行處理，采用配對χ2檢驗比較正常和癌組織中PLCH陽性表達率的差異，采用χ2檢驗比較不同人口學與臨床病理特征腫瘤組織中PLCE1的陽性表達率，檢驗水準 α =0.05。

2 結果

2.1 肺癌及正常組織中PLCE1的表達 肺鱗狀細胞癌組織中PLCE1的陽性表達率為81.3%(39/48)，高于正常肺組織的12.5%(6/48)，見表1。

2.2 肺鱗狀細胞癌組織中PLCE1的表達與臨床病理特征的關系 見表2。

表1 肺正常和癌組織中PLCE1的表達 例

表2 不同人口學與臨床病理特征肺鱗狀細胞癌組織中PLCE1表達的比較 例(%)

3 討論

PLCE1 基因位于常染色體 10q23.32-q24.1，其編碼蛋白為 PLCE1［3］，是 PLC 家族的新成員［2］。PLCE1通過水解4，5-二磷酸(PIP2)產生第二信使肌醇1，4，5-三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)等，參與細胞信號的傳導，調控基因表達，調節細胞的生長、分化、細胞凋亡及血管新生［1，4］。在現有的研究中，發現PLCE1可能與化學致癌物誘發的皮膚腫瘤有關［5］，可能抑制結腸癌和膀胱癌的發生發展［6-9］，與腎病綜合征、家族性腎病綜合征關系密切［8-9］。

近幾年對PLCE1的研究主要與腎病綜合征的發生有關［2-6］，但對肺癌中PLCE1是否表達國內外暫無此項報道。該研究發現PLCE1在肺鱗狀細胞癌組織中的表達明顯高于正常肺上皮組織，PLCE1的表達與肺鱗狀細胞癌淋巴結轉移和腫瘤分期有關，說明PLCE1在肺鱗狀細胞癌的發生、發展中起著重要作用，PLCE1的檢測可能有助于肺鱗狀細胞癌預后的判斷。

PLCE1在肺鱗狀細胞癌組織中的作用機制尚不十分明確，需進一步探討，以期為肺鱗狀細胞癌的診斷和臨床治療提供新的線索。

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