三七丹參片預處理對心肌缺血再灌注大鼠SOD及MDA的影響

胡清茹 王中曉 魯宜夏

1 南陽醫學高等專科學校藥理教研室，河南省南陽市 473001； 2 成都中醫藥大學

經過多年的臨床驗證，中藥三七丹參片具有舒肝理氣、活血化淤、鎮靜安神之功效。其主要成分為三七和丹參：三七味甘、微苦、性平，歸肝、胃經，有散淤止血，消腫定痛的作用；丹參味苦、微寒，入心、肝經，可活血通絡，并能涼血養血，以止心痛之發；兩藥合用尤其能夠協同增加冠狀動脈血流量，改善心肌缺氧。本實驗通過觀察三七丹參片對大鼠心肌缺血再灌注損傷（IR）模型超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量的影響，并探討其作用機制，為其臨床治療冠心病提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SD健康成年大鼠60只，雄性，體重（280±20）g，購于河南省動物實驗中心。

1.2 主要藥品與試劑 三七丹參片：由貴州德良方藥物股份有限公司提供。MDA、SOD試劑盒：由上海朗頓生物科技有限公司提供。

1.3 實驗儀器 BSM－7105床邊監護儀（上海泰益醫療儀器設備有限公司），動物呼吸機（成都泰盟科技有限公司），2－16PK低溫冷凍離心機（德國SIGMA公司），心電監護儀（深圳市奧生科技有限公司）。

1.4 實驗方法

1.4.1 給藥及實驗分組。將雄性SD大鼠隨機分為4組，每組15只。假性處理組：連續15d灌胃生理鹽水（2ml／d），于最后1次灌胃1h后開胸完成冠狀動脈前降支下置線不結扎。再灌注損傷組（IR組）：連續15d灌胃生理鹽水（2ml／d），于最后1次灌胃1h后建立IR模型。IP組：連續15d灌胃生理鹽水（2ml／d），于最后1次灌胃1h后建立IP模型。三七丹參組：每天灌胃中藥三七丹參片2ml（4.68g／kg，劑量按人體表面積的0.018計算）連續灌胃15d，于最后1次灌胃1h后建立IR模型。

1.4.2 心肌缺血再灌注大鼠模型的建立。腹腔注射20%烏拉坦（5ml／kg）麻醉大鼠，固定背位，胸部去毛，酒精消毒，行氣管插管，連接人工呼吸機（頻率60次／min，潮氣量20ml／kg），采用心電監護儀監測心電變化。沿著左鎖骨中線，縱行將皮膚切開約2cm，在胸骨左緣第4肋骨處開胸，暴露心臟，將心包剪開，輕輕按壓胸壁，將心臟擠出。迅速穿線于冠狀動脈左前降支，將其結扎后再將心臟送回胸腔。IR組：結扎30min，剪斷結扎線之后再灌注100min。IP組：缺血5min，再灌注5min，反復3次后缺血30min，再灌注100min。假性處理組只穿線不結扎。造模后的左室發紺，心電圖有異常表現：T波高聳或倒置呈弓背向上單向曲線和（或）T段抬高標志著冠狀動脈結扎缺血的成功；再灌注損傷模型成功的標志是再灌注后，抬高的ST段和（或）R波恢復，發紺心肌顏色變紅。

1.4.3 觀察指標及測定SOD、MDA含量。大鼠腹主動脈取血，以3000r／min的速度離心5min，分離血清，用黃嘌呤氧化酶法測定血清SOD含量，硫代巴比妥酸法測定MDA含量，具體操作按SOD、MDA試劑盒說明書步驟執行。

1.5 統計學處理 采用SPSS12.0統計軟件，所有數據以均數±標準差（）表示。采用單因素方差分析計量資料，采用q檢驗進行組間多重比較，P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

見表1。

表1 各組大鼠心肌組織MDA、SOD含量（）

表1 各組大鼠心肌組織MDA、SOD含量（）

注：與IR組比較，P＜0.05。

組別 n MDA（nmol／mg.pro） SOD（U／mg.pro）假性處理組 15 4.66±1.68287.17±21.25 IR組 15 129.38±2.37 141.42±20.86 IP組 15 6.76±2.19 196.29±23.43三七丹參組 15 6.93±2.01203.35±24.45

3 討論

研究發現，預適應是目前已知效果最強的、心臟固有的自我保護機制。它既可以有效地對抗心肌缺血再灌注所造成的各種心肌損傷，又能夠改善心肌中離子異常及生化物質，同時可以減少自由基引起的細胞膜脂質過氧化損傷等。丙二醛（MDA）是生物膜不飽和脂肪酸與自由基相互作用下生成的過氧化物，機體內脂質過氧化反應的程度能夠通過其含量來反映。SOD是體內的一種特異性清除酶，該酶活性發生改變可反映體內抗氧化功能情況。因此測定血清SOD、MDA含量可間接了解自由基產生和清除情況。

本實驗假性處理組及三七丹參組術后的心肌組織SOD活性、MDA含量無明顯差異。缺血再灌注組SOD活性明顯下降、MDA含量升高，與假性處理組及三七丹參組比較，差異顯著，說明心肌缺血再灌注的急性期有大量的自由基產生，使MDA含量升高，SOD活性下降，明顯破壞了心肌組織。缺血預適應組、三七丹參組術后SOD活性明顯提高、MDA含量下降，與缺血再灌注組比較具有顯著性差異。提示缺血預適應、三七丹參預處理可通過內源性抗氧化物質的增加而對缺血心肌組織起保護作用。

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