血清表皮生長因子檢測在類風濕關節炎患者中的臨床研究

張斌國 欒清欣

類風濕關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是常見的自身免疫性疾病之一，可累及多器官系統，主要侵犯關節滑膜，表現為滑膜組織的異常增生，大量炎性細胞浸潤及軟骨與骨的進行性破壞。研究表明表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)具有刺激多種組織和細胞分裂、增殖和分化的作用［1］。多種細胞因子參與了RA的發病與演變，Koichiro等［2］報告RA患者滑膜液中EGF升高。本實驗通過檢測RA患者與正常人血清中EGF水平的變化，探討EGF在診斷RA中的意義及其在RA發病過程中可能起到的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至6月在我院住院的初治RA患者36例，所有患者均符合1987年美國風濕病學會(ACR)修訂的RA分類標準、既往未服用過激素或改善病情藥物。其中男5例，女31例。年齡24～59歲，平均(49.49±8.01)歲。依照患者雙手X線的檢查結果將RA患者分為單純骨質疏松組(Ⅰ～Ⅱ級)和骨質破壞組(Ⅲ～Ⅳ級):單純骨質疏松組平均病程為(5.86±1.35)個月;骨質破壞組平均病程為(10.67±3.58)個月。20例正常健康對照者均來自我院體檢中心健康體檢者，其中男4例，女16例。年齡20～64歲，平均(51.46±13.24)歲。各組在年齡、性別等方面均無統計學差異。

1.2 方法 抽取清晨空腹靜脈血3 ml，離心后取上清液，置于PC管中-20℃保存，同批次檢測。血清EGF水平測定采用雙抗體夾心ELISA法，試劑盒由美國Rapid Bio Lab公司提供，嚴格按照試劑盒說明書的程序進行操作。全自動酶免分析儀(瑞士Hamilton公司 MicroLab STAR IVD ELISA型-8通道)450 nm處測OD值，繪制標準曲線，計算EGF濃度值。分別采用免疫比濁法、瓊脂擴散法、魏氏法檢測類風濕因子(RF)，C反應蛋白(CRP)，紅細胞沉降率(ESR)。異常值判定均參考同期該項檢查的正常值。并收集整理患者其他臨床資料做對比。

2 結果

2.1 兩組血清EGF水平的比較(見表1) RA患者血清EGF水平顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)。

表1 RA患者與正常對照組血清EGF水平(±s)

表1 RA患者與正常對照組血清EGF水平(±s)

組別 例數 EGF(pg/ml)20 52.58±2.6036 110.15±9.12對照組RA組

2.2 RA患者單純骨質疏松組與骨質破壞組血清EGF水平的比較(見表2)骨質破壞組血清EGF水平顯著高于單純骨質疏松組，差異有統計學意義(P＜0.05)。

表2 RA患者單純骨質疏松組與骨質破壞組血清EGF水平

2.3 RA患者血清EGF水平與臨床類風濕活動指標之間的相關性 血清EGF水平與RF、ESR及CRP之間無明顯相關性(r=0.06，P ＞0.05;r=0.25，P ＞0.05;r=0.26，P ＞0.05)。

3 討論

類風濕性關節炎(Rheumatoid arthritis，簡寫RA)又稱類風濕，是一種常見病、多發病，目前公認是一種自身免疫性疾病。可能與內分泌、營養、地理、職業、心理和社會環境的差異、細菌和病毒感染及遺傳因素等方面有關系。各種細胞因子和趨化因子在RA的發病過程中發揮著重要作用。

目前對于RA的研究主要集中于滑膜細胞的類腫瘤性研究。人們注意到RA滑膜中存在過量的細胞因子、受體和與其有同源性的癌基因產物，它們可能作用于滑膜細胞信號傳導途徑的不同部位，導致持續的信號傳導，從而引起RA滑膜細胞的無限制增生［3］。該病好發于手、腕、足等小關節，以手的近端指間關節、腕關節、足的庶趾關節最為常見，反復發作，呈對稱分布。早期有關節紅腫熱痛和功能障礙，晚期關節可出現不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎縮，極易致殘。從病理改變的角度來看，類風濕性關節種主要累及關節滑膜(以后可波及到關節軟骨、骨組織、關節韌帶和肌鍵)，其次為漿膜、心、肺及眼等結締組織的廣泛性炎癥性疾病。

表皮生長因子(EGF)由53個氨基酸組成，相對分子質量為6054u，是1959年在神經生長因子研究過程偶然被發現的。它具廣泛生物學效應，是強有力的促細胞分裂因子，能加速蛋白質、DNA和RNA的合成，能刺激體內或體外培養的多種組織和細胞的分裂、增生、分化［1］。因其具有強有力的促細胞分裂、增殖及分化作用，近年成為腫瘤及創傷愈合等研究的熱點。由于類風濕關節炎病理表現為滑膜組織的異常增生，所以近年來，其與類風濕關節炎發病關系的研究逐漸受到關注［4］。有研究報道RA的關節液及滑膜組織中EGF的含量高于骨關節炎(osteoarthritis，OA)［5］。Farahat等研究 EGF與其他的細胞因子的關系，表明RA患者滑膜組織中IL-1α、IL-1β、IL-δ、TNF-α、GM-CSF 與 EGF 的表達均高于 OA。說明EGF與上述細胞因子同時參與了RA的病理過程。目前國內外對采用免疫組化方法檢測RA滑膜及滑液中EGF表達的研究報道較多［6，7］，對血清中EGF的水平變化與RA發病機制關系的研究較少。

本研究表明健康人血清中EGF表達較少，而RA患者血清中的EGF水平則顯著升高。骨質破壞組的EGF水平明顯高于單純骨質疏松組，故推測EGF可能參與了RA的發病過程，并且一定程度上提示EGF在RA的關節破壞中發揮著重要作用。血清EGF的水平與患者的RF，ESR，CRP等臨床類風濕活動指標沒有明顯相關性，表明EGF與疾病的活動性無關。本研究提示EGF在診斷RA患者中有一定的臨床價值，可能部分地參與RA的關節骨質破壞過程。然而EGF所致的關節骨質破壞的機制還不清楚，還有待于進一步研究。可以作為RA診斷手段的有益補充，因此具有廣泛的臨床應用和研究前景。

［1］宋丹，方秀.表皮生長因子的研究進展.解剖科學進展，2002，8(4):390-342.

［2］Koichiro S，Shinichi K，Masayuki S，et al.Involvement of ErbB22 in rheumatoid synovial cell growth.Arthritis Rheum，2001，44(2):260-271.

［3］燕太強，呂厚山，藥立波.類風濕關節炎滑膜細胞酪氨酸激酶信號傳導系統.中華風濕病學雜志，1999，3(2):121-123.

［4］Lui KE，Panchal AS，Santhanagopal A，et al.Epidermal growth factor stimulates proton efflux from chondrocytic cells.J Cell Physiol，2002，192(1):102-112.

［5］Farahat MN，Yanni G，Poston R，et al.Cytokine expression in synovial membranes of patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis.Ann Rheum Dis，1993，52:870-875.

［6］林星，鄭斌生，林玲，等.類風濕關節炎表皮生長因子及β2微球蛋白的測定.現代診斷與治療，2004，15(6):327-328.

［7］燕太強，呂厚山，藥立波，等.表皮生長因子對類風濕關節炎滑膜細胞的作用.中華風濕病學雜志，2000，4(5):270-273.