犬排卵檢測技術的研究

劉成武 李向黨

犬排卵檢測技術的研究

劉成武 李向黨

犬的發情周期與很多動物不同，犬是單次發情動物，發情周期為6個月左右，即在一個發情周期內交配沒有受孕，犬都將再經過6個月到達下一個發情周期才允許交配。因此，準確掌握犬排卵的時間尤為重要，只有正確地掌握母犬的排卵時間，才能做到適時配種，提高母犬的受孕率和繁殖力。

一、犬的卵泡發育、排卵機制

犬的卵巢是由卵巢囊包裹，排出的卵直接進入卵巢囊內，輸卵管與卵巢囊相接，靠輸卵管的運動而將卵子送到輸卵管漏斗部。卵泡充血時是排卵開始，成熟卵泡的直徑為6～7mm。犬的卵巢囊由長約8mm的腹腔口開口于腹腔，發情時輸卵管傘充血、增厚，與卵巢囊相接處的部分長出腹腔口，安全遮住了卵巢囊腹腔口，使得排出的卵不致于落入腹腔中。犬的排卵發生于發情期初期，排卵時卵是初級卵母細胞，剛排出時尚未成熟，在輸卵管內繼續發育并進行第一次成熟分裂，放出第一極體而變為次級卵母細胞，此時才具有受精能力，這是犬不同于其他動物的特性。卵從卵巢排出，又經過第二次成熟分裂，分裂后，在輸卵管與精子結合形成合子。犬的卵在排卵后保持4天的受精能力。要得到較高的受胎率，必須使卵子和精子在活力最強時相遇。

二、排卵檢測方法

（一）陰道外觀檢測：犬處在發情期，生殖道會表現出規律性的變化。表現為陰唇腫脹，臨近排卵時腫脹程度最高，而后逐漸消退；陰道的肌肉組織由緊張狀態逐漸變成松弛狀態，使陰道松軟，陰腔逐漸變大，在排卵期變得最大，而后逐漸恢復正常；陰道壁和子宮內膜組織增生，陰道流出血樣物質，開始時呈暗紅或鮮紅色，而后逐漸變淡，至排卵期時呈淡淡的粉紅色或無色，之后逐漸消失。

（二）促黃體生成素(LH)測定法：LH是由α和β兩個亞基組成的糖蛋白，含有219個氨基酸。LH的主要生理作用是：協同FSH發揮作用，促進卵泡成熟，粒膜增生，使卵泡內膜產生雌激素，并在與FSH達到一定比例時，導致排卵，對排卵起著主要作用。排卵前1天，LH的分泌出現高峰，通常根據LH的高峰值可以準確地判斷出排卵時間。

（三）促卵泡素（FSH)測定法：FSH為一種由α和β兩個亞基組成的糖蛋白，糖基是以N-糖苷鍵的方式分別連接在α和β兩個亞基上。FSH的主要生理作用是：刺激卵泡的生長發育，卵泡生長至有腔卵泡時，FSH能夠刺激它繼續發育增大至接近成熟。FSH高峰出現的時間與LH出現的高峰時間相當，但LH的高峰明顯高于FSH的高峰。

（四）雌激素(E2)測定法：母犬的產生部位主要是卵泡膜內層及胎盤，卵巢的間質細胞也能產生。E2主要生理作用是：刺激并維持母犬生殖道的發育。發情時E2的分泌將逐漸增多，排卵前到達高峰。

（五）孕酮測定法：在不發情期或發情前期，孕酮水平是非常低的。在促黃體激素增長之前，孕酮含量就已經開始上升了，而在LH峰值的時候，孕酮含量已經達到1.5～2.5 ng/ml，并且繼續上升。孕酮升到3 ng/ml，該母犬處于排卵的第一天。排卵后黃體形成，分泌多量孕酮（黃體酮），比排卵前的孕酮明顯增加。

（六）B超診斷法檢測：B超檢測排卵是比較安全的，具有經濟、無創、直觀性好、重復性強的優點，為臨床提供了監測排卵的可靠方法。由于B超檢測需要母犬積尿充盈膀胱，但是臨床上犬不會大量積尿或者B超刺激后會馬上排尿，為檢測帶來困難。陰道超聲可以解決此問題，與腹部超聲檢查相比，母犬無需充盈膀胱就能直接觀察到卵泡生長、成熟及排卵的特征，成為監測卵泡發育的重要手段。在發情的第8天開始每天給母犬進行B超監測1次，直至卵泡破裂排卵為止。成熟的卵泡呈圓形或橢圓形，直徑達6～9 mm，卵泡內呈無回聲暗區，亮度好，境界清晰，80%的成熟卵泡可以見到卵丘結構，卵泡周圍出現透聲環。排卵后卵泡消失或體積縮小，內部呈現光點，1～2天完全消失。

（七）陰道上皮細胞檢測：陰道上皮的細胞學變化，是在母犬體內激素作用下產生的。采取陰道粘膜采片法，按其細胞涂片的形態學觀察能更客觀更準確地反映卵巢的活動，為選定母犬最佳適時交配期提供可靠依據。乏情期陰道上皮細胞數量少，細胞直徑小，細胞核清楚；發情前期細胞學變化主要為出現大量的帶核的表皮細胞，這一時期細胞直徑變大，呈多角形，核呈空泡狀；進入發情期，帶核表皮細胞形態上發生角化，變成無核的角化鱗狀細胞；發情后期細胞形態逐漸恢復，無核、角化細胞消失，細胞形態規則、核明顯。

（八） 唾液檢測：近年來發現，在雌激素的影響下，唾液中的蛋白質、氯化鈉及水分的含量發生變化，唾液結晶隨發情周期的變化而發生明顯的規律性變化。發情期開始后，顯微鏡下唾液結晶的形狀為典型羊齒狀或松針狀，主梗直而粗硬，分枝密而長，且排卵后2天結晶消失，表明唾液羊齒結晶出現及消失的時間比較集中，可預測排卵期。

繁殖是養犬業發展的基礎，而較高的受孕率是繁殖的重要保障。只有正確地掌握母犬的排卵時期，才能做到適時配種，提高受孕率。在臨床上應該陰道外觀檢查、陰道細胞學檢查、B 超檢查和激素檢測方法結合起來，才能更準確地確定母犬的排卵時間。

（作者單位：公安部警犬技術學校，330100）

（編輯：李 冰）