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鹿鞭及其偽品鑒定方法的研究進展

2011-08-15 00:53:40張麗華
中國醫藥科學 2011年18期

劉 洋 張麗華 薄 艷

1.吉林市中心醫院藥學部,吉林 132002;2.北華大學藥學院,吉林 132013

鹿鞭(Testis et Penis Cervi)系鹿科動物梅花鹿(Cervus nippon Temm inck)、馬鹿(C. elaphusL.)的干燥帶睪的陰莖。其味甘、咸,性溫,具有補腎、壯陽、益精的功能,臨床可用于治療勞損、腰膝酸痛、腎虛耳聾、耳鳴、陽痿、宮冷不孕等癥。自古以來其組方很多,如金丹、鹿腎粥以及三鞭、三腎丸等。因其用藥歷史悠久,療效確切,貨源稀少,價格昂貴,為常用珍貴中藥之一。

我國鹿的種類主要有梅花鹿、馬鹿、白鹿、白唇鹿、水鹿等,《中華人民共和國衛生部藥品標準》收載的正品來源多為鹿科動物梅花鹿和馬鹿兩種。故正品分為梅花鹿鞭、馬鹿鞭兩種,主產于吉林、遼寧、黑龍江及河北等地。在商品市場上各種充偽品屢見不鮮,本研究就鹿鞭的鑒定方面的研究進展綜述如下。

1 性狀鑒別

主要從整體性狀、色澤、龜頭、尿道、橫環紋、包皮及鋒毛形狀等方面來鑒別。

1.1 正品

馬鹿鞭陰莖呈兩側稍扁的長圓柱形,長45~60 cm,直徑2~3 cm。表面灰黃色至黃棕色,呈半透明狀。在陰莖體兩側中間,有縱溝槽,頂端包皮略呈囊狀或卷曲成環套狀隆起,包皮前端形成鋒毛,在鋒毛上呈現毛鋒端色重、毛根部色淺的現象,也有呈現褐色、褐黑色毛梢;毛粗而扁,富彈性。龜頭藏于包皮內或裸露,其先端鈍圓,整個龜頭似扁指狀,可見縱棱及縱溝,表面具致密的短線狀紋理。在陰莖全長靠基部端的1/3~1/2處附有睪丸1 對,睪丸呈長橢圓形,或鼓或癟,棕褐色,有的具長的系帶(輸精管),質堅硬,不易折斷,或切斷面可見最外層為纖維體(俗稱皮膜),厚約1~2 mm,中間大部分為疏松的海綿體,可見尿道口和血管孔。氣腥,味微咸。

梅花鹿鞭與馬鹿鞭的區別是前者較短小,長25~35 cm,直徑1~2 cm。龜頭長2.8~10 cm。先端漸尖,多皺縮,表面灰黃色、黃棕色。睪丸長橢圓形。

1.2 偽品

1.2.1 牛鞭 稍扁的長圓柱形,全長35~60 cm,直徑2~3 cm,表面黃白色,不具光澤。腹部兩側的中間有一條縱溝槽,包皮一般無毛,個別夾有可脫落毛。龜頭圓錐形,先端尖,尿道口在龜頭先端尖部。一般無睪丸,帶睪丸者形似茄苞狀,較大,表面紫褐色或棕黃色。陰莖外層纖維體厚以致中間海綿體的環形肋紋不明顯,熱水泡后膻腥氣極明顯,味微咸。

1.2.2 驢鞭 長圓柱形,稍彎曲,表面黃棕色,不具光澤。背腹兩側的中間有一條縱溝槽,包皮一般無毛。龜頭較大,呈黑色,多皺縮,有橫向紋理。睪丸呈類圓形。

1.2.3 用豬皮制作的假鹿鞭

1.2.4 用動物的腸制作的假鹿鞭

1.2.5 用其他動物的腿筋偽造

1.3 真偽鹿鞭各有其不同特點

真鹿鞭特點明顯,藥用價值高 ,偽假鹿鞭無藥理作用,不能藥用,特別是粘接的鹿鞭,由于使用工業用膠還會對人體健康有害[1-2]。

2 理化鑒別

2.1 顯微鑒別

利用動物殘留獸毛對正品梅花鹿鞭、馬鹿鞭及混淆品馴鹿鞭,偽品驢鞭、牛鞭進行顯微鑒別,不同科動物獸毛顯微結構差異較大,同科的則總體相同,其毛髓質細胞形態、發達程度均不相同。為鹿鞭以原粉存在于中成藥中的鑒別提供了有力依據[3]。

2.2 光譜鑒別

比較氯仿浸出物的紫外光譜,鹿鞭與其偽品牛鞭略有區別。紅外光譜和紫外光譜,特別是前者,對鹿鞭及其偽品牛鞭具有鑒別意義,但考慮到受樣品來源、實驗條件的局限,此種鑒別方法還需要深入研究。

2.3 薄層鑒別

利用薄層色譜法,在不同的展開劑系統中,分別對鹿鞭及其類似品貂鞭、驢腎、狗腎中的氨基酸、甾體類成分作了比較鑒別。結果發現,在與天門冬氨酸、甘氨酸及膽甾醇相應的位置上,鹿鞭及其類似品均有相同顏色的斑點。

2.4 電泳鑒別

根據電泳中蛋白質的遷移速率不同,可將電泳區帶分為A、B、C三個區域。梅花鹿鞭和馬鹿鞭各有兩條區帶,牛鞭有1條區帶。梅花鹿鞭和馬鹿鞭在A區和C區各有1條區帶,在B區沒有區帶,并且各區帶的遷移率相同[4]。

2.5 X線攝片影像技術

通過X線攝片,參與比較的鹿鞭除白唇鹿鞭外表及攝片均無斜肌紋理外,無論外表有無斜肌紋理,只有斷面呈纖維狀結構的,其攝片均可清晰見到斜肌紋理結構。牛鞭攝片大多為極密集的點狀或短直線狀細碎紋理,少數呈細短,稀疏的斜肌紋理。

3 生物學鑒別

3.1 免疫學鑒別

采用免疫學方法,即以大分子抗原物質免疫動物而獲得抗血清,后者與免疫動物的抗原物質可發生免疫血清學反應,這種反應具有高效、專一的特點,從而達到用已知抗體鑒定未知抗原的目的。

3.2 DNA分子標記鑒別

近年來隨著分子生物技術的發展,已廣泛應用于中藥材品種的鑒別。DNA分子作為遺傳信息的直接載體,不受外界因素和生物體發育階段及器官組織差異的影響,以DNA分子特征進行物種鑒別準確可靠。

用于中藥材品種高特異性鑒別引物基礎上的PCR鑒別技術,雖然也是以PCR反應為基礎, 但在中藥鑒定中是一個新的實驗設計思路。通過對正品藥材及其偽品的某些DNA片段的序列研究,設計出高度特異性的正品藥材鑒別引物。當有樣本需要鑒定時,提取DNA后,用鑒別引物對樣本的DNA進行一次PCR反應,經電泳檢測,可達到準確鑒別樣本真偽的目的,檢測時不需與已知正品藥材作對照實驗[5-6]。

中藥材的鑒定最終是對其生物學本質進行鑒定,尋找有效的鑒定方法是實現中藥現代化的迫切任務。DNA分子標記鑒定技術的優勢是特異性強、穩定性好,結果直觀、可靠,便于進一步分析。存在的問題:方法不夠完善,資料不豐富,需專門儀器和專業人員,成本偏高,已涉及的中藥品種和研究人員不夠廣泛,無法有效推廣到生產第一線。

在今后的研究中,推動DNA分子標記技術對更多中藥品種進行鑒定,比較各種方法的特點和適用范圍,將更多的DNA分子標記技術應用到該領域;開發簡便易行的新方法;降低成本提高效率。

相信DNA分子標記技術將會與傳統鑒定方法并存發展,共同闡明中藥材真偽優劣,成為中藥材鑒定的有力工具,共同推進中藥現代化進程。

[1]姚玉霞,李澤鴻.感官鑒別真偽鹿鞭[J].經濟動物學報,2000,4(4):21-23.

[2]李慧珍,李水福.鹿鞭的真偽優劣鑒定[J].中國藥業,2008,17(10):66-69.

[3]王遠志,李鋒,康廷國.鞭類藥材電泳及顯微鑒定研究[J].中藥科技,2004,2(6):34-35.

[4]金躍明,李峰.鹿鞭藥材及偽品的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒別研究[J].遼寧中醫學院學報,2005,7(6):623-625.

[5]Dooley JB,Kelly EP,Stephen DG,et al.Detection of meat[J].Animal Sciences,2007,31(3):159-163.

[6]崔雨新,王小明,梁云媚.在線粒體DNA細胞色素b基因序列水平上對鬣羚系統發育的研究[J].獸類學報,2001,21(4):251-258.

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