糖尿病小鼠模型的建立及荔枝核復方治療效果的實驗研究

何勝 陸曉峰 銀彩林 李紅妃 梁海燕 張樹球

糖尿病嚴重威脅人類健康，其發病率不斷上升，由于其發病原因和機理尚未完全闡明，因而尚無根治藥物。為此，通過建立糖尿病動物模型深入研究本病的發病機理和治療藥物顯得尤為重要，四氧嘧啶和鏈佐霉素是目前國內外使用的主要造模藥物。陳莉和梁丹等人曾用本地產的老品種酸荔枝核提取液做實驗證明有降動物血糖作用[1-2],與傳統中醫學利用荔枝核治療消渴病相符合,本文使用四氧嘧啶造模，用另一品種良種甜荔枝核復方治療，研究其治療效果。現將實驗結果報道如下。

1 試劑與方法

1.1 試劑 四氧嘧啶為sigma產品，分析純、硫脲、硼酸、鄰甲苯胺、冰醋酸均為國產分析純。總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）試劑盒，購自四川成都邁克試劑公司。

1.2 治療藥物 鹽酸二甲雙胍，購自市內藥店;荔枝核復方合劑，由荔枝核、柚子果、番石榴果等果類提取制成，內含0.1g/ml生藥。由我院海爾福研制中心提供。

1.3 動物 小白鼠90只，昆明種，鼠齡2個月，健康，雌雄各半。由學院動物室提供。

1.4 造模 將小鼠分成四組：正常組15只、模型組25、治療1組25、治療2組25只。后三組造模。用四氧嘧啶腹腔注射，按220/kg體重劑量，蒸餾水溶解后注射，一次完成。測定造模前、注射四氧嘧啶后5d血糖。血糖高于10.0mmol/l以上者作為治療和統計對象。

1.5 治療 治療1組用中藥治療,取原液0.1ml/只，用蒸餾水稀釋到0.4ml/只，1次/d，治療2組為標準對照組，用鹽酸二甲雙胍，按成人50kg體重劑量折算，蒸餾水溶解后灌胃，1次/d。連續灌胃7d,測定治療后血糖。

1.6 測定方法 血糖用鄰甲苯胺微量法。從小鼠尾巴取20ul全血測定[3]。總膽固醇（TC）用COD-CE-APA酶法測定。甘油三酯（TG）用GPO-POD酶法測定。具體操作按說明書。

1.7 統計學處理 數據用SSTP軟件（由上海科技出版社提供，2.00版本）統計，方差分析，Q檢驗。結果用（x±s）表示。

2 結果

2.1 一般情況 90只小鼠,用75只造模,造模過程死亡10只,占13.3%,血糖升高大于10mmol/L42只,占56%。

2.2 造模前后與治療后血糖含量測定結果 造模前各組血糖含量無明顯差異(P＞0.05),造模后造模組血糖含量明顯升高,P＜0.05,P＜0.01；治療后治療1組和治療2組血糖明顯降低，以二甲雙胍組降的幅度較大，模型組治療后雖也有一定下降,但無治療兩組明顯，但三個實驗組仍明顯高于正常組，見表1。

表1 造模前后與治療后血糖含量比較

2.3 治療后血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）含量測定結果 組間甘油三酯有明顯差異，見表2。

表2 治療后血清總膽固醇、甘油三酯含量比較

3 討論

3.1 造模前各組小鼠血糖無明顯差異。造模過程死亡率較高,可能與使用四氧嘧啶劑量較大有關,但血糖升高并不明顯,原因有待研究,造模后5d，造模組血糖均比造模前明顯升高，也比正常組明顯升高（P＜0.01）,但有部分不高,成功率只有56%,可能與四氧嘧啶保存時間較長有關,或者與小鼠品種耐受性有關,因為所用的劑量己足夠大[4]。

3.2 治療1組、治療2組治療7d后血糖明顯低于治療前，用二甲雙胍的治療2組下降更明顯,說明有一定效果,不同品種的荔枝核也有作用,但均未達到正常組水平,而相比之下,模型組也有一定降低,但幅度較小,原因有待研究。

3.3 甘油三酯各組比較,治療1組明顯低于模型組;但正常組也較高,有待探討。膽固醇各組比較無明顯差異，有報道，糖尿病患者的甘油三酯和膽固醇也僅有部分病人發生異常[5-6]。

[1] 陳莉,黃日越,鐘文晴,等.荔枝核提取液治療小鼠糖尿病模型生化指標的干預作用[J].當代醫學,2008，14(3):27-28.

[2] 梁丹,黎衛沖,潭冬菊,等.糖尿病小鼠模型的建立及中藥荔枝核提取液對其治療的實驗研究[J].當代醫學,2009，15(18):41-42.

[3] 安乙敏.生化檢驗學[M].成都：四川科學技術出版社出版，1990：68.

[4] 黃松.糖尿病動物模型研究現狀及進展[J].廣西醫學,2002,24（1）：46-47.

[5] 趙世華,趙文娟,閻勝利,等.吡格列酮和二甲雙胍治療2型糖尿病的對照研究[J].天津醫藥,2004,32(8):463-465.

[6] 錢榮立.糖尿病與血脂異常[J].中國糖尿病雜志,2000,10（2）:125.