NF-κBp50、p65 mRNA 在食管鱗癌組織中的表達及意義

王永霞，李道明，李海梅，高冬玲

(1新鄉醫學院病理學教研室，河南 新鄉 453003;2鄭州大學第一附屬醫院;3安陽市腫瘤醫院)

核轉錄因子-κB(NF-κB)是細胞信號轉導途徑中的關鍵因子，參與免疫、炎癥、腫瘤的發生和發展，細胞增殖和細胞凋亡以及血管生成等多種生理病理過程的基因調控，其主要形式為p50和p65組成的二聚體［1］。目前NF-κB是醫學特別是醫學腫瘤研究的熱點。2005年10月～2007年1月，我們采用原位雜交技術檢測了NF-κB p50、p65 mRNA在食管鱗癌組織中的表達，探討其在食管鱗癌浸潤、轉移中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 49份食管鱗癌組織標本為鄭州大學第一附屬醫院食管癌手術切除標本存檔蠟塊。所有病例術前均無化療、放療及免疫治療史。其中男27例，女22例;年齡38～75(60.6±9.5)歲。病理組織學證實均為鱗狀細胞癌，其中組織學分級Ⅰ級24例，Ⅱ級16例，Ⅲ級9例;有淋巴結轉移23例。浸潤深度:淺層組13例，深層組36例。33份癌旁組織及32份切端組織已證實為不典型增生組織和正常食管黏膜組織。

1.2 試劑及方法 采用原位雜交技術:預雜交液、胃蛋白酶和核固紅購自武漢博士德公司;SA-AP和BCIP/NBT為北京中杉金橋公司產品;焦碳酸二乙酯(DEPC)為美國Fluka公司產品。探針序列NF-κB p50:5'-CCAGCTGTCCTGTCCATTCT-3'(20 bp);NF-κB p65:5'-CACCATGGTGGGAAACTCATC-3'(21 bp)，由北京奧科公司設計合成，生物素標記。嚴格按照操作說明書進行。用不加探針的雜交液孵育組織切片做陰性對照。結果判斷標準:NF-κB p50、p65 mRNA均以核、質著紫藍色為陽性。每張切片取10個高倍視野，計算陽性細胞百分數，陽性細胞數＜10%為陰性，≥10%為陽性。

1.3 統計學方法 采用SPSS10.0統計軟件。兩樣本率的比較采用四格表資料χ2檢驗;多樣本率的比較采用行列表資料的χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 NF-κB p50、p65 mRNA 在不同食管病變組織中的表達 見表1。

表1 NF-κB p50、p65 mRNA在不同食管病變組織中的表達

2.2 NF-κB p50、p65 mRNA 的表達與食管鱗癌臨床病理參數的關系 見表2。

表2 NF-κBp50、p65 mRNA表達與食管鱗癌臨床病理參數的關系

3 討論

食管癌浸潤和轉移是影響患者預后的重要因素，但有關腫瘤浸潤、轉移的機制目前仍不完全清楚［2］。NF-κB主要形式為 p50和 p65組成的二聚體，p50是與DNA結合的部位，p65參與基因轉錄的起始調節，并可促進p50與DNA結合。NF-κB廣泛存在于真核生物中，以非活性形式存在于細胞質中，只有在受到各種活化因素的作用，NF-κB才能被激活。

近年來越來越多的證據表明，NF-κB與腫瘤的發生有密切關系，已被確定與B、T淋巴細胞的異常生長有關。Mayo等［3］報道，原癌基因Ras誘導的致癌作用需要NF-κB的活化，當NF-κB活化受到抑制后，Ras轉化的癌細胞表現出生存能力低下。在一些與病毒感染關系密切的惡性腫瘤中，NF-κB可被病毒編碼產物Tax蛋白、潛在膜蛋白(LMP-1)、X蛋白及Tat蛋白激活，因而NF-κB被認為是這些病毒致癌的共同信號分子［4］。本研究發現 NF-κB p50、p65 mRNA的陽性率從正常黏膜組織到不典型增生組織再到食管鱗癌呈逐漸增高趨勢，且組間比較差異具有統計學意義，與鄒紹靜等［5］的研究結果一致。說明NF-κB p50、p65 mRNA的異常表達參與了食管鱗癌的發生。

研究證實，NF-κB是一種重要的多向性核轉錄因子，能夠調節多種腫瘤相關基因的轉錄，除與多種腫瘤的發生有關外，還可調控細胞增殖、凋亡及浸潤和轉移［6，7］。已有研究表明乳腺癌［8］、肝癌［9］等多種腫瘤組織中NF-κB激活后均可促進惡性腫瘤的浸潤轉移。本研究結果顯示，NF-κB p50、p65 mRNA的表達在深層浸潤者明顯高于淺層浸潤者，有淋巴結轉移者高于無淋巴結轉移者，表明 NF-κB p50、p65 mRNA表達增高可促進食管鱗癌的浸潤和轉移，與相關學者在胰腺癌、胃癌中的研究結果一致［10，11］。說明 NF-κB 是參與腫瘤的浸潤和轉移的一個非常重要的核轉錄因子［12］。本研究結果還顯示隨著食管鱗癌組織學分級的增高NF-κB p50、p65 mRNA的陽性表達率呈明顯增高趨勢，但差別不具有統計學意義，可能與實驗樣本量較小有關。

綜上所述，NF-κB p50、p65 mRNA 的異常表達可促進食管鱗癌的浸潤及轉移，臨床檢測其表達對于食管鱗癌的早期發現及預后判斷具有重要意義。

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