TORCH感染的血清學篩查

江婷，劉成程，陳冬梅

(1.沈陽醫學院2009級醫學檢驗專業，遼寧 沈陽 110034;2.基礎醫學院病原生物學教研室)

TORCH，TO(Toxoplasma)即弓形蟲，R(Rubella virus)即風疹病毒，C(Cytomegalovirus)即巨細胞病毒，H(Herpes simplex virus)即單純皰疹病毒，4種病原體的縮寫形式，是目前已知的最主要的先天性致畸微生物［1］。TORCH綜合征患者引起孕婦流產、死胎，患兒勉強出生后有嚴重的智力障礙，生活不能自理，并伴有復雜的心血管病，需要家人的長期照顧，給家庭造成極大的精神及經濟負擔。同時對優生優育與人口素質也構成極大的威脅，因此它的感染診治工作已引起醫護人員的普遍關注。盡管孕期TORCH血清學篩查結果陽性并不代表一定需要終止妊娠，但能夠提示其危險性，提早采取措施，以避免新生兒各種先天性疾病的發生，對優生優育具有重大意義。

國內習慣使用TORCH 4項的IgM進行篩查，但IgM抗體試驗影響因素較多，且國內人群TORCH各項目IgM陽性率都不高，單純使用IgM篩查容易出現假陽性。IgG試驗對于排除IgM試驗假陽性有極大幫助［2］。另外，進年來隨著生活方式的多樣化，HSVⅠ生殖道感染的比例在逐年增加，英美等國家HSVⅠ的感染率占生殖器皰疹的20%以上。而不加區分HSVⅠ和HSVⅡ的篩查方法極易造成孕婦圍產期未經鑒別的HSV感染，給新生兒造成潛在嚴重危害。因此，為獲得更加準確可靠的結果，同時進行10項TORCH篩查是必要 的，包 括 TOX－IgM/IgG、RV－IgM/IgG、CMVIgM/IgG、HSVⅠ－IgM/IgG、HSVⅡ－IgM/IgG。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2011年1月至2月，在杭州市迪安醫學檢驗中心做10項TORCH檢測的孕婦800例。

1.2 標本采集及檢驗方法 各合作醫院采集待檢婦女靜脈血2 ml，分離其血清，于－20℃冰箱保存，于第2日在本檢驗中心檢測。采用邁康準TMTORCH－IgM/IgG酶聯免疫試劑盒 (美國 Trinity Biotech公司生產)進行檢測。

1.3 檢測步驟 (1)稀釋：IgG，樣本、標準品與稀釋液1：20稀釋;IgM，樣本、標準品與稀釋液1：80稀釋。 (2)洗液配制：將濃縮沖洗液(50ml)用去離子化水稀釋為1.0 L沖洗液，搖勻。(3)加樣：每項設2孔校準品，在相應微孔中加入100 μl稀釋后的校正劑及孕婦血清標本，室溫避光孵育 (25±5)min。(4)洗滌：全自動洗板機清洗5次 (洗液自配)，拍干;(5)加反應物：每孔加酶結合物100 μl室溫避光 (25±5)min，洗滌;每孔加底物液100 μl室溫避光 (10±5)min;每孔加終止液100 μl。(6)讀取：用全自動酶標儀在450/620 nm讀OD值。

1.4 結果計算 平均校正OD值=兩個校正OD值之和/2;矯正因子：標于校正品瓶外用于平衡因溫度及計時所造成的誤差。臨界值=平均校正OD值×矯正因子。ISR值=孕婦標本OD值/臨界值。ISR值≤0.90(－);0.91～1.09可疑;≥1.10(+)。

1.5 統計學方法 根據測定結果采用統計學處理，計算各項陽性率。

2 結果

2.1 800例孕婦血清標本TORCH 10項陽性率(表1)

表1 TORCH10項陽性率比較

2.2 TORCH 10項檢查存在4種篩查結果 (表2)

表2 TORCH10項檢查4種篩查結果的比較

3 討論

TORCH感染在圍生醫學中稱為TORCH綜合征，其感染呈世界性分布。婦女妊娠期間由于內分泌的改變及免疫功能下降，T淋巴細胞免疫功能減弱而易發生原發感染，同時既往受過感染的孕婦體內潛伏的病毒也易被激活而導致復發感染，造成流產、死胎及胎兒缺陷等系列臨床不良癥狀［3］。血清中的IgM抗體在感染早期 (感染后4～7 d)出現，存在約2～3個月，故IgM抗體陽性表明正在發生感染;而血清中IgG抗體出現較晚(＞14 d)，在血清中可存在數年至數十年。

TOX病是一種人畜共患性寄生蟲病，也是一種常見的胎兒宮內感染性疾病，其主要臨床表現為無腦兒、腦積水、腦內鈣化，脈絡膜視網膜炎等［4］。弓形蟲的主要宿主為貓、犬等。世界上不同國家和地區TOX感染率有很大的差別，其感染率與衛生條件、生活條件、職業等因素有關［5］。我國各地孕婦感染率為4%～10%，但近年來，由于我國家庭飼養寵物數目的增多，感染率呈現上升的趨勢，在妊娠早、中、晚期孕婦感染率分別為17%、25%和65%［6］。而在我們的調研中，杭州及周邊城市孕婦的既往感染率為1%，新近感染率為0.13%，均明顯低于全國平均感染率水平。

RV感染是一種經呼吸道傳播、臨床癥狀輕微、預后良好、易被忽視的急性病毒性傳染病。妊娠初期罹患RV感染，母體血液中的病毒可通過胎盤感染胎兒，常導致新生兒白內障、小眼球癥、重聽、心臟病和小頭癥等先天性異常，如在孕初16周內感染RV，則發病率達80%［7］。婦女RV再感染也可引起胎兒的先天性風疹綜合征 (Congenital rubella syndrome，CRS)，但十分少見。杭州及周邊地區RV的既往感染率為85.75%，新近感染率為1.13%。孕早期感染RV對胎兒影響很大：在孕8周內，CRS發生率為85%，9～12周為52%，而20周以后就很罕見［8］，因此，須早期診斷及干預。美國自從風疹疫苗被廣泛應用以來，CRS已降為每100萬活產嬰只有1例［9］。建議對RV－IgG陰性婦女 (易感者)進行婚前風疹疫苗接種，以預防新生兒CRS。

CMV是最常見的先天性宮內感染的因素，人是CMV的惟一宿主。它是引起圍產期感染較重、較常見的病原體，發生率占全部活產兒的1.0%［10］。成人的感染率＞90%，絕大多數為隱性感染，只有嬰幼兒感染者易發病。我國孕婦CMV的既往感染率普遍高于發達國家，沈陽、上海和武漢分別為96.7%、91.4%和79.5%［11］，我們的統計結果表明杭州地區既往感染率為98.25%，新近感染率為0.38%，這說明CMV感染與地區、生活習慣及人口密度不同等有較大關系，而孕婦在妊娠前存在的CMV特異性IgG抗體僅能夠提供部分保護作用。

HSV分為Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型多見于原發感染，有20～40%患者發生唇皰疹，由口腔、呼吸道途徑傳播。我們的調查結果顯示：杭州及周邊地區Ⅰ型的既往感染率為97.5%，新近感染率為0.5%;Ⅱ型可引起繼發性感染，主要感染生殖器和腰以下皮膚黏膜，以性接觸為主要傳播途徑。我們的調查結果顯示：杭州及周邊地區Ⅱ型的既往感染率為12.13%，新近感染率為0.13%。由以上可見孕婦容易發生Ⅰ型感染。Ⅰ型感染多見于原發性，可引起嬰兒眼角膜結膜炎和皮膚水皰并且感染后增加了圍生兒死亡率［12］。

針對TORCH10項檢查有4種篩查結果及解釋：(1)IgG(+)IgM(－)：曾經感染過或接種過疫苗，已產生免疫力，胎兒感染的可能性很小。危險性低，無需進一步處理。(2)IgG(－)IgM(－)：孕婦為易感人群。妊娠期最好重復IgG檢查，觀察是否陽轉。 (3)IgG(+)IgM(+)：孕婦可能為原發性感染或再感染，危險性高。應同時采取其它檢測方法 (如PCR)來進一步確診，若其他方法檢測結果顯示近期感染指標仍舊為陽性、B超顯示胎兒情況不佳，應終止妊娠。 (4)IgG(－)IgM(+)：近期感染過或為急性感染，也可能是其它干擾因素造成的IgM假陽性，需2周后復查，如IgG陽轉，為急性感染，否則判斷為假陽性。我們的調查結果顯示：對于 RV、CMV、HSV三項中IgM陽性的孕婦IgG結果大多陽性，應建議隨訪定期復查;對于IgG(－)IgM(+)也應建議隨訪，定期復查，排除假陽性的可能。

TORCH檢測中單純檢測IgM，往往會忽略感染者到底是原發性還是復發期和恢復期，由于感染階段不同，治療手段也有很大的差異，因此，同時檢測IgM和IgG非常必要。

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