藥用植物浸制標本液的配置方法改良初探

《藥用植物學》課程是我校中藥、制藥、藥檢專業的必修課程，該課程分為植物器官形態、顯微構造、植物分類學等三部分內容。其中，植物器官形態部分的教學需要學生對花、果實等器官進行解剖或觀察等操作，而在實際教學中，因為受到季節、天氣等因素的影響，每次都使用新鮮材料的方法是不現實的，需要教師事先準備好部分植物浸制標本。但如果在浸制時所使用的固定液和保存液不合適的話，將會影響標本的色澤及觀察效果。為此，筆者對常用的幾種浸制液進行了實踐與改良，目前我校所使用的浸制液，對于保持植物標本的原色效果明顯。在此進行比較說明。

一、簡易浸制液配比方法及優缺點比較

70%乙醇5ml，蒸餾水100ml，按此比例混合使用，能使標本保存時間較長而不腐爛發霉，但標本易脫色。

5～10ml甲醛（福爾馬林），蒸餾水100ml，它的特點是價格較低，能使標本保存時間較長，但保存液本身易變成褐色，標本亦易褪色。

95%乙醇100ml，甘油5～10ml，蒸餾水195ml，混合后使用，此保存液效果較好，但價格較貴，亦會使標本褪色。

以上方法配置的浸制液，其配比方法簡單實用，原料來源方便，易操作，費用少，適合短期內保存標本。但是，這些方法的共同缺點在于：浸制標本的原色容易喪失，影響標本在教學中的直觀性，不適用需要長期保存及保持原色的標本。

二、常用浸制液簡介

1.綠色標本的浸制液處理

在50 ml 水里加入50 ml 冰醋酸，配成100 ml 體積分數為50％的乙酸溶液，再逐漸放進6g硫酸銅碎塊，不斷攪拌，制成飽和的乙酸銅原液。然后，將此飽和溶液按照1份溶液4份水的比例進行稀釋，隨后加熱。當加熱到80℃的時候，把修剪清潔過的綠色標本投入到溶液中，并輕輕翻動。在加熱過程中，綠色標本由綠轉黃，再次變成綠色時即可停止加熱。將標本在清水里洗滌干凈后，移入5％的甲醛中固定2～3天，最后在標本瓶中用配比為40％的甲醛40ml+95％的乙醇10ml+亞硫酸飽和水液50ml+蒸餾水1000ml所制的混合液浸泡保存，或者直接用5％～10％的甲醛或0.01～0.04g/ml的亞硫酸溶液浸泡，長期保存。

禾本科植物或較易軟爛的植物，可以直接浸到飽和醋酸銅（制法如上所述）100ml和乙酸10～16ml的混合液中，或者浸到硫酸銅、甲醛混合液中，浸泡10～20天后再更換一次混合液并浸泡10天至恢復原色，取出洗凈，用5％的甲醛保存。

2.多色標本的浸制液處理

對于植株上有多種顏色的植物，先用質量分數為20％的氯化鎂溶液浸泡1～4天，然后分別用質量分數為30％、50％、75％的氯化鎂溶液依次浸泡，每次浸泡5～7天（pH為5.8），再分別用質量分數為85％、95％、100％的氯化鎂溶液浸泡，每次浸泡7～10天。最后，在過飽和氯化鎂固定液中保持原色。

優缺點分析：以上浸制液處理后的標本，存放時間較長，標本的原色亦能保持。但是，這些浸制液的配制較為復雜，費用較高，處理程序繁瑣耗時，且所用的甲醛具揮發作用，對空氣造成污染，且對人體有一定的毒害作用，不利于保管人員及參觀人員的身體健康。

三、改良浸制液簡介

為解決以上問題，筆者與實驗老師經過探索，自2004年以來，配比了幾種不同的浸制液，經過比較，擇取了目前最為經濟，操作簡易的浸制液，用該浸制液制取的浸泡植物標本，從2004年至今，色澤、外觀均與新鮮材料差異不大，現將本法簡介如下：

1.實驗試劑

冰醋酸、硫酸銅、水合氯醛、乙醇、純凈水等。

2.實驗器材

標本瓶16個，浸泡用大缸4個，采集、鑒定工具若干。

3.植物材料

益母草（帶紅花）、禺毛茛（帶黃花）、蓖麻（帶紫紅色果實）、老鼠拉冬瓜（帶綠色、黑色果實）。其中益母草、禺毛茛為全株帶白色根部，蓖麻折取帶果枝條，老鼠拉冬瓜剪取中間部分藤枝。

4.實驗步驟說明

先將以上植物材料進行清潔、剪枝處理，去除蟲卵、泥巴以及多余的枝條，保持植株美觀。然后分四組進行試驗，分別采用不同的試劑制取浸制液對標本進行處理，在多種環境中比較標本的變色及腐敗情況，最終完成實驗，得出結論。

5.處理方法

分對比組、實驗組1、實驗組2、實驗組3。每組均含以上四種植物標本，四種標本分別含有不同顏色的器官，可檢驗浸制液對多種色素的保色情況。

6.過程

（1）分別對四組植物材料進行保色處理。

對比組：以常規方法，用冰醋酸、硫酸銅、純凈水制取乙酸銅溶液，將植物材料置于該溶液中浸泡，當看到植物體綠色部分轉黃褐色再轉回綠色時，及時取出清洗干凈后存于75％乙醇溶液中密封保存。

實驗組1：將植物材料按常規方法進行保綠處理后，以0.2％水合氯醛溶液浸泡24h固定。然后清洗干凈存于75％乙醇溶液中密封保存。

實驗組2：直接將清潔好的植物材料置于3.5％水合氯醛溶液中浸泡24h固定。取出后以純凈水不斷浸泡漂洗至水合氯醛全部被純凈水替換。然后以75％乙醇溶液密封保存。

實驗組3：處理方法同實驗組2，只是把水合氯醛的濃度調低為0.2％。

（2）實驗組處理原理分析。水合氯醛試液為常用優良的化學透明劑之一，特點是能迅速透入組織，使干燥收縮的細胞逐漸膨脹復原，并能溶解大多數細胞內含物，如淀粉粒、葉綠體、菊糖、樹脂、蛋白質、揮發油等，使細胞組織清晰透明，易于觀察。筆者在用徒手切片法制做臨時裝片時發現，用水合氯醛固定葉的橫切面裝片，當濃度配比合適時，葉片橫切面中的葉綠體不但沒有被溶解，反而整個裝片在一段時間內能保持其色澤不變。據此，筆者大膽推測，是否可以用水合氯醛直接對植物材料進行固定處理，去除其體內的淀粉粒、多糖、脂肪、蛋白質、樹脂等易氧化、分解的物質，保留原有色素，達到保色的目的。本實驗方法基于此原理進行。

（3）分階段檢查各組材料變色情況。本實驗時間自2004年6月始，其間經一個月、三個月、一年、兩年、五年幾個階段對各組材料進行檢查，結果如表1所示。

7.結果分析

表1顯示，四組浸泡標本分別產生了不同變化。對比組為傳統浸制液處理，其綠色能長期保持，但是，該綠色與自然界植物比較，顏色有偏差，帶藍綠的色澤，其他顏色均在一段時期后褪色。實驗組1為傳統方法處理后，加0.2％水合氯醛固定。該法能使植物體的色澤長期保持，但同對比組一樣，顏色與原植物比較有偏差。實驗組2、3撇棄傳統方法，直接以不同濃度水合氯醛溶液對植物標本進行固定。實驗組2以3.5％水合氯醛溶液處理，本組標本褪色較嚴重，從水合氯醛能溶解脂肪等物質的原理分析，用較高濃度的水合氯醛處理標本，不僅使淀粉粒、多糖等溶解，亦破壞了葉黃素、胡蘿卜素等脂溶性色素的結構，從而導致標本的褪色。實驗組3以0.2％水合氯醛溶液對植物材料進行處理，結果顯示，經本法處理的標本，在較長一段時期內能保持其原色鮮艷不變。考慮后期繼續以不同濃度的水合氯醛溶液進行實驗，以求找到最合適的配比方法。

四、結論

我校對藥用植物浸制標本液的改良方法探索結果顯示，本法所用的試劑水合氯醛對人體毒害性較小，臨床上亦用作催眠藥。水合氯醛須在加熱的情況下才會產生揮發性的有毒氣體，常溫下揮發性非常小。當以合適濃度的水合氯醛對藥用植物標本進行固定時，能使植物標本長期保持原色。經過固定的標本直接保存于75％濃度的乙醇溶液中。本法處理方式簡單，試液制取簡便易行，費用低廉。長期用于教學和參觀不會影響人員的身體健康。

但是，由于本實驗所處理的植物標本數量、類型有限，未知本法對植物體內含有乳汁、樹脂等植物的保色效果是否能達到預期目的，且目前所取水合氯醛濃度是否為最佳處理，這些都有待進一步實驗論證。

（作者單位：廣西藥科學校，廣西衛生職業技術學院）

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