玉米及其制成品轉基因成分檢測研究

摘要概述了國內外轉基因玉米研究進展，重點介紹了目前玉米及其制成品轉基因標準化檢測方法的研究進展，特別是對制成品轉基因檢測技術的研究現狀和發展趨勢作了詳盡的敘述，提出了今后在玉米制成品轉基因檢測技術上的重點研究方向。

中圖分類號：TS207.3 文獻標識碼：A

Advance in Detecting Transgenic Components of Corn and its Downstream Products

YU Junfeng[1]， FANG Bo[2]

([1]Mudanjiang Seed Management Office， Mudanjiang， Heilongjiang 157000;)

[2] Mudanjiang Agricultural Information Centre， Mudanjiang， Heilongjiang 157000)

AbstractThe paper gives a brief account of the advance in transgenic corn research at home and abroad，emphatically introduced the present progress of standardized transgenic detection methods of corn and its downstream products，and detailed the present and the developmental trend of transgenic detecting technology of the downstream products，and also proposed key research orientations of transgenic detecting technology of the downstream products.

Key wordscorn; downstream products; transgenic plant; detection

目前，轉基因玉米及其制成品已廣泛應用于食品制造業，但由于轉基因技術本身的不足導致無法確定轉基因產品對環境和人類身體健康的安全性。 世界各國政府和公眾對轉基因產品對健康和環境潛在的風險表現出引起的極大關注和廣泛憂慮，主要集中在：（1）轉基因食品的安全性，主要有嚴重影響整個食物供給、農作物廣泛減產、副作用、不精確的技術；（2）轉基因產品是否對生態環境造成長期的影響；（3）環保的影響，主要有除草劑使用的增加、殺蟲劑使用的增加、生態被破壞、基因污染難以消除。社會普遍關注食品中轉基因成分的安全性問題。

全球轉基因植物種植面積逐年增加，2004年達到8.1千萬公頃。同時，轉基因生物及其產品的安全性問題引起國際社會的關注，許多國家制定了管理法規。中國是世界第二大玉米生產國，常年種植2400萬hm2，我國轉基因玉米研究進展較快，轉基因玉米在我國即將進入生產階段，轉基因抗蟲、除草劑玉米的產業化蓄勢待發，轉基因玉米的環境安全性研究迫在眉睫。目前國內尚沒有轉基因玉米環境安全性研究的報道。

轉基因食品的發展可以分為三代：第一代轉基因食品是改變一些農藝性狀。第二代轉基因食品是以改善食品的品質、增加食品的營養為主要特征。第三代轉基因食品以研究增加食品中的功能因子和增加食品的免疫功能為目標。

1 轉基因檢測標準化方法研究現狀

目前，全球已有40多個國家和地區頒布法令，要求對轉基因產品進行標識。建立轉基因產品的檢測技術標準是實施轉基因產品標識的技術前提。為了給各國提供可以共同遵循的檢測流程和方法，國際標準化組織（ISO）先后頒布了5個標準：

ISO 21569: 2005 Foodstuffs – Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products – Qualitative nucleic acid based methods（ISO 21569: 2005 食品——轉基因生物及其產品檢測分析方法—核酸定性檢測法）。

ISO 21570: 2005 Foodstuffs – Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products – Quantitative nucleic acid based methods（ISO 21570: 2005食品——轉基因生物及其產品檢測分析方法—核酸定量檢測法）。

ISO 21571: 2004Foodstuffs – Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products – Nucleic acid extraction（ISO 21571: 2004食品——轉基因生物及其產品檢測分析方法—核酸提取）。

ISO 21572:2004 Foodstuffs - Methods for the detection of genetically modifie organisms and derived products - Protein based methods （ISO 21572:2004 食品——轉基因生物及其產品檢測分析方法—蛋白質檢測方法）。

ISO 24276:2006. Foodstuffs – Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products – General requirements and definitions（ISO 24276:2006 食品——轉基因生物及其產品檢測分析方法—一般要求和定義）。

這5個標準分別對轉基因生物及其產品的檢測分析方法、DNA提取方法和轉基因產品檢測過程中的術語定義和注意事項等進行了規范。ISO 21569: 2005是一個對食品中的核酸進行定性檢測的標準，ISO 21570: 2005提供了對食品中核酸進行定量檢測的方法，ISO 21571: 2004標準規定了食品中核酸提取的方法，ISO 21572:2004標準中規定了對食品（下轉第105頁）（上接第97頁）中的蛋白進行檢測的方法，ISO 24276:2006提供了確定和量化食品中的轉基因物質的一般要求。

綜合各國的檢測方法，主要有四類技術：PCR定性篩選檢測方法、實時熒光定量 PCR法、基因芯片檢測法和多重連接依賴的探針擴增 (MLPA )。

1996年農業部發布了《農業生物基因工程安全管理實施辦法》。2001年國務院頒布了《農業轉基因生物安全管理條例》（以下簡稱《條例》）。《條例》頒布實施后，農業部和國家質檢總局先后制定了5個配套規章：《農業轉基因生物安全管理條例》、《農業轉基因生物安全評價管理辦法》、《農業轉基因生物標識管理辦法》、《轉基因植物及其產品食用安全性評價導則》等，發布了轉基因生物標識目錄，建立了研究、試驗、生產、加工、經營、進口許可審批和標識管理制度。

2 玉米及其制成品轉基因檢測存在的問題

以玉米為直接原料的深加工品和普通深加工品一樣， 食品在深加工過程中各種處理如加熱、 各種添加劑的使用、pH值的劇烈變化，使其 DNA斷裂，理化性質發生了很大的變化，其主要原因是由于各種深加工食品中轉基因成分的分析較難統一，轉基因成分檢測的難度大大增加，在檢測過程中難以保證結果的準確性。如果要嚴格按照歐盟現行條例中關于GMO成分的定義，在外源基因的純合近交二倍體系與雜合二倍體品系以及每個基因組只有一個外源基因的四倍體品系之間是沒有差別的：他們在形式上都是完全的轉基因成分（100%GMO）。另一方面，從分析的角度看，純合二倍體、雜合二倍體和只含一個轉基因基因組的四倍體品系來說，它們的GMO含量分別為100%，50%和25%。如果我們考慮一個銷售的產品成分，它來來自不同批次和相同物種的不同品系的隨機混合（它們在純合性、倍數性和C-值方面具有不同的基因組構成），這種情形將更加復雜。在這種情況下，不可能確定每一種成分的特殊貢獻并且純合性、倍數性和C-值的分子分析工具將不可避免地過高或過低估計產品成分的名義上的GM成分。事實上，定量一個樣品的轉基因含量為我們提供的既不是真正的外源基因分子劑量（如遺傳改變的單倍基因組數對單倍體基因組總數之比），也不能提供歐盟條例定義的含量，而是一種相對于認證標準物質的相對基因劑量。對玉米及其制成產品，只有選擇適宜的基因組提取方法才能保證后續工作的順利進行，CTAB(十六烷基三乙基溴化銨)沉淀法提取基因組的方法行之有效，而且對PCR反應的不利影響最小，對其他深加工產品分子水平的檢測具有一定的借鑒意義。

3 玉米及其制成品轉基因檢測發展趨勢

定量檢測將可能成為未來轉基因成分檢測的發展方向。近幾年，轉基因玉米的研發已進入生產性試驗階段，未來有可能獲準商業化種植，相關深加工品轉基因成分檢測的技術及其標準仍需完善。

參考文獻

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