子宮肌瘤患者子宮不同部位ER\\PR\\EGFR的表達(dá)及其意義

[摘要]目的 探討子宮肌瘤患者子宮不同部位的雌、孕激素受體、表皮細(xì)胞生長因子受體的變化情況及相互關(guān)系。方法 選擇我院2008年1月～2010年12月入院治療的子宮肌瘤患者50例，手術(shù)過程中分別留取子宮肌瘤中的組織（A組）、子宮肌瘤臨近的肌層組織（B組）、子宮肌瘤遠(yuǎn)處（距離肌瘤5cm以上）平滑肌組織（C組）各1份，應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)各標(biāo)本中的雌、孕激素受體及表皮生長因子受體的表達(dá)情況。結(jié)果 三種受體進(jìn)行組內(nèi)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.O5），越靠近瘤體處表達(dá)越多。A組增生期和分泌期子宮組織中三種受體的陽性表達(dá)情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。B組雌激素受體、孕激素受體的表達(dá)在增生期和分泌期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。C組中三種受體在增生期和分泌期均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 雌、孕激素受體、表皮細(xì)胞生長因子受體表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系，離肌瘤越近、越處于肌瘤增生期，三種受體的表達(dá)則越多。

[關(guān)鍵詞] 子宮肌瘤；表皮細(xì)胞生長因子受體；雌激素；孕激素

[中圖分類號(hào)] R737.33[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B [文章編號(hào)] 1673-9701（2011）20- 48-02

子宮肌瘤（hysteromyoma）又稱為子宮平滑肌瘤，是女性生殖器官中最常見的一種良性腫瘤。患者多數(shù)無癥狀，少數(shù)臨床表現(xiàn)為陰道出血、腹部可觸及腫物以及壓迫癥狀等，嚴(yán)重者可繼發(fā)不孕，威脅著女性健康[1]。常見多發(fā)性子宮肌瘤，單發(fā)者少見。若發(fā)生蒂扭轉(zhuǎn)時(shí)可引起疼痛。本病確切病因尚不清楚，治療方法主要為激素藥物或手術(shù)治療。本研究選擇我院2008年1月～2010年12月入院治療子宮肌瘤的患者50例，手術(shù)中取一部分組織，檢測(cè)其雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、表皮細(xì)胞生長因子受體（EGFR）的表達(dá)，分析子宮肌瘤的發(fā)生與這些指標(biāo)的相關(guān)性，為臨床上應(yīng)用藥物治療子宮肌瘤提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇我院2008年1月～2010年12月入院治療子宮肌瘤的患者50例，年齡30～54歲。患者入選標(biāo)準(zhǔn)[2]：①患者于術(shù)前3個(gè)月內(nèi)未使用過任何激素類藥物；②子宮肌瘤均經(jīng)B超及病理證實(shí)后確診。③患者滿足子宮肌瘤的手術(shù)指征。④患者及家屬知情同意。術(shù)中分別取子宮肌瘤的組織（A組）、子宮肌瘤臨近的肌層組織（B組）、子宮肌瘤遠(yuǎn)處（距離肌瘤5cm以上）的平滑肌組織（C組）。對(duì)患者的子宮內(nèi)膜病理結(jié)果進(jìn)行分析，其中28例患者處于增生期，22例處于分泌期。

1.2方法

1.2.1術(shù)中取組織后進(jìn)行HE染色手術(shù)切除子宮肌瘤后，立即取子宮肌瘤組織、子宮肌瘤臨近的肌層組織、子宮肌瘤遠(yuǎn)處（距離肌瘤5cm以上）平滑肌組織各1份，用10%中性甲醛液固定，石蠟包埋后切厚度為4μm的切片。常規(guī)HE染色后用光學(xué)顯微鏡觀察組織的病理學(xué)形態(tài)，依次記錄病理診斷結(jié)果。

1.2.2采用免疫組化法[3]：檢測(cè)相應(yīng)組織中ER、PR、EGFR的表達(dá)：①將石蠟切片放入二甲苯溶液中脫蠟、去離子化；再放入乙二胺四乙酸（EDTA）緩沖液中進(jìn)行抗原高壓熱修復(fù)；將處理后的切片放在實(shí)驗(yàn)室中自然冷卻。②加入打孔劑室溫下洗滌10min；標(biāo)本放入3%過氧化氫溶液10min，用于封閉內(nèi)源性過氧化物酶，后用PBS緩沖液洗滌標(biāo)本3次，每次3min。③向標(biāo)本中滴入特異性抗體，放入濃度5%的CO2培養(yǎng)箱孵育過夜。④第2天取出標(biāo)本，再用PBS緩沖液洗滌3次，每次3min。⑤向標(biāo)本中加入PV9000試劑盒中的大分子通透劑（試劑1），于CO2培養(yǎng)箱37℃孵育0.5h；取出后再用PBS緩沖液洗滌3次，隨后加入試劑盒中抗鼠／兔抗體酶復(fù)合物（試劑2），于CO2培養(yǎng)箱37℃孵育0.5h；取出后再用PBS緩沖液洗滌3次。⑥用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）控制標(biāo)本的顯色，流水沖洗3h，蘇木素染色，封片，放在光學(xué)顯微鏡下觀察。

1.2.3光鏡下的形態(tài)判定標(biāo)準(zhǔn)陽性的雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）應(yīng)為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)染色，表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中有棕黃色顆粒；陽性的表皮細(xì)胞生長因子受體（EGFR）細(xì)胞為細(xì)胞質(zhì)染色，即表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)中有棕黃色顆粒。細(xì)胞計(jì)數(shù)：高倍鏡（×400）下取5個(gè)視野，計(jì)數(shù)陽性腫瘤細(xì)胞數(shù)目并計(jì)算其占腫瘤細(xì)胞數(shù)的百分比，陽性細(xì)胞數(shù)量超過10%時(shí)判斷為陽性表達(dá)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)以SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理。計(jì)數(shù)資料之間的比較采用行×列的χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1陽性顆粒定位特點(diǎn)

光學(xué)顯微鏡下觀察三組細(xì)胞的陽性情況，結(jié)果顯示，三組細(xì)胞均可見三種受體不同程度的表達(dá)。其特點(diǎn)分別為：表皮細(xì)胞生長因子受體的陽性棕黃色顆粒主要位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)處，染色較弱、分布不均（圖1，光鏡下放大400倍）。雌、孕激素受體的陽性棕黃色顆粒大部分位于細(xì)胞核內(nèi)，少部分位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)（圖2，光鏡下放大200倍）。

2.2三組組織中三種受體的表達(dá)情況

見表1。結(jié)果顯示，三種受體進(jìn)行組內(nèi)比較時(shí)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。雌激素、孕激素受體及表皮生長因子受體在子宮不同部位的組織中表達(dá)有差異，越靠近瘤體處表達(dá)越多（n為受體陽性表達(dá)的標(biāo)本數(shù)）。

2.3三種受體分別在增生期和分泌期的表達(dá)情況

見表2。結(jié)果顯示，A組增生期和分泌期子宮組織中三種受體的陽性表達(dá)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。B組雌激素受體、孕激素受體的表達(dá)在增生期和分泌期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。C組中三種受體在增生期和分泌期均無差異（P＞0.05）。

3討論

子宮肌瘤是女性生殖器官中最常見的一種良性腫瘤。它是依賴性激素而存在的良性腫瘤，故其發(fā)生發(fā)展均與患者卵巢的分泌功能及雌、孕激素的分泌情況有關(guān)。雌、孕激素被分泌后再通過細(xì)胞內(nèi)雌、孕激素受體發(fā)揮作用。本研究通過檢測(cè)肌瘤及其周邊子宮組織中的雌、孕激素受體、表皮生長因子受體情況，為今后的治療提供了依據(jù)。

本文結(jié)果顯示，肌瘤組織中、臨近肌瘤的肌層組織中、肌瘤外5cm的正常肌層組織中均可見三種受體的表達(dá)，但在不同部位表達(dá)的程度有所不同；我們用光學(xué)顯微鏡觀察三種受體時(shí)發(fā)現(xiàn)，三種受體均在肌瘤組織中表達(dá)最強(qiáng)，臨近肌瘤的肌層組織次之，遠(yuǎn)處正常肌層組織最弱，三種受體的表達(dá)均符合以上規(guī)律，這就提示子宮肌瘤的生長可能與雌激素受體、孕激素受體、表皮生長因子受體的表達(dá)增強(qiáng)有關(guān)。Vue等[4]取27例行子宮全切術(shù)患者的肌瘤組織標(biāo)本，應(yīng)用促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑（GnRH-a）治療半年，結(jié)果子宮肌瘤的體積比用藥前有明顯縮小，同時(shí)肌瘤組織中的雌、孕激素受體的陽性表達(dá)率也分別下降了50%和40%，提示子宮肌瘤的增大與雌、孕激素的作用密切相關(guān)。

另外，Kawaguchi D等[5]指出子宮肌瘤的體積并不是一成不變的，其在卵泡期會(huì)縮小、黃體期時(shí)又增大，妊娠期時(shí)增大速度最快。這是因?yàn)榇啤⒃屑に胤置诤笠ㄟ^一些生長因子介導(dǎo)其促細(xì)胞有絲分裂的作用，這些生長因子中以表皮細(xì)胞生長因子的作用最強(qiáng)。它是由53個(gè)氨基酸組成的多肽物質(zhì)，其生物學(xué)活性十分廣泛，是人體多種細(xì)胞分裂和增殖的必需物質(zhì)，更能調(diào)節(jié)體內(nèi)多種生理功能[6]，其生物學(xué)效應(yīng)是通過與靶細(xì)胞的細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)中的表皮生長細(xì)胞因子受體結(jié)合來實(shí)現(xiàn)的，故其效應(yīng)能否正常發(fā)揮與生長因子受體的數(shù)量息息相關(guān)。雌、孕激素在人體中常起到互相協(xié)同的作用，二者協(xié)同能調(diào)節(jié)生長因子受體的數(shù)量，因此，高雌、孕激素就會(huì)導(dǎo)致子宮肌瘤的發(fā)生和增大。

本文的結(jié)果也支持以上論點(diǎn)。表1顯示，三種受體進(jìn)行組內(nèi)比較時(shí)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果提示，雌激素、孕激素受體及表皮生長因子受體在子宮不同部位的組織中表達(dá)有差異，離肌瘤越近，三種受體的表達(dá)越高，提示三種受體相互協(xié)同的作用是促進(jìn)子宮肌瘤發(fā)生發(fā)展的原因。表2的結(jié)果顯示，A組增生期和分泌期子宮組織中三種受體的陽性表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。B組雌激素、孕激素受體的表達(dá)在增生期和分泌期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。C組中三種受體在增生期和分泌期均無差異（P＞0.05），說明腫瘤增生期三種受體的表達(dá)是相當(dāng)活躍的，分泌期時(shí)活躍程度有所下降。

綜上所述，子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展與雌激素、孕激素的分泌及其受體有重要關(guān)聯(lián)，故可應(yīng)用抗雌、孕激素的藥物治療子宮肌瘤[7]，至于其安全性及有效性仍需進(jìn)一步探討。

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（收稿日期：2011-03-09）

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