蛋白芯片檢測(cè)肺炎支原體與膠體金法檢測(cè)肺炎支原體方法的比較

摘 要 目的：探討蛋白芯片檢測(cè)肺炎支原體與膠體金法檢測(cè)肺炎支原體方法的特異性與敏感性。方法：收集疑似肺炎支原體感染的患兒96例進(jìn)行生物芯片和膠體金法檢測(cè)肺炎支原體進(jìn)行比較。結(jié)果：兩種方法檢測(cè)96例患兒，臨床診斷肺炎支原體感染患者72例，蛋白芯片法49例陽(yáng)性，陽(yáng)性率51.0%，診斷符合率68.01%，膠體金法23例陽(yáng)性，陽(yáng)性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。結(jié)論：蛋白芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法。

關(guān)鍵詞 蛋白芯片 膠體金法 肺炎支原體 特異性 敏感性

隨著DNA芯片技術(shù)的不斷成熟，推動(dòng)了蛋白質(zhì)功能的研究［1，2］，蛋白芯片技術(shù)隨之發(fā)展壯大。蛋白芯片是近年來(lái)在生命科學(xué)領(lǐng)域中迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)高新技術(shù)，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和構(gòu)象變化均能引起活性或功能的改變，肺炎支原體(MP)是呼吸道感染性疾病的重要病原體之一，及時(shí)、有效地進(jìn)行MP的實(shí)驗(yàn)室診斷十分重要，為探討蛋白芯片檢測(cè)肺炎支原體與膠體金法檢測(cè)肺炎支原體臨床意義，收集疑似MP感染的患兒96例進(jìn)行生物芯片和膠體金法檢測(cè)肺炎支原體進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

2010年4月～2011年4月收治疑似肺炎支原體感染患兒96例，男56例，女40例，年齡6天～11歲，臨床確診為肺炎支原體感染的患兒72例。

主要儀器與試劑：生物微矩陣(芯片)分析儀，蛋白芯片技術(shù)檢測(cè)肺炎支原體抗體，肺炎支原體抗體檢測(cè)試劑盒(膠體金法)。實(shí)驗(yàn)原理：①膠體金法：滅活的MP菌體純化抗原致敏硝酸纖維素膜，同時(shí)用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標(biāo)記金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA)作為探針，利用免疫層析原理研制MP抗體快速檢測(cè)膠體金試劑，用于MP肺炎診斷。②蛋白芯片技術(shù)的基本原理［3］：是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于固相載體上，這種固相載體常用的材質(zhì)有云母、硅、以及各種膜片等，有圓形或橢圓形、長(zhǎng)條狀等不同形狀，這樣就制成了待檢用的芯片，然后，用標(biāo)記了特定熒光抗生素體的蛋白質(zhì)與芯片作用，有吸水或疏水物質(zhì)、抗體或受體、免疫復(fù)合物、與某些陰離子或陽(yáng)離子的化學(xué)基因、酶等，然后洗板，再利用激光共聚焦掃描或熒光掃描儀技術(shù)，測(cè)定芯片上各點(diǎn)的熒光強(qiáng)度，進(jìn)行測(cè)定各種蛋白質(zhì)功能的目的。

結(jié) 果

兩種方法檢測(cè)96例患兒，蛋白質(zhì)芯片法49例陽(yáng)性，陽(yáng)性率51.0%，臨床確診為肺炎支原體感染的患兒72例，診斷符合率68.0%，膠體金法陽(yáng)性23例，陽(yáng)性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。

討 論

近年來(lái)肺炎支原體感染率呈逐年上升趨勢(shì)，發(fā)病年齡趨小，臨床表現(xiàn)多種多樣，很難與其他病原微生物感染相鑒別。蛋白芯片是近年來(lái)在生命科學(xué)領(lǐng)域中迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)高新技術(shù)，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和構(gòu)象變化均能引起活性或功能的改變，肺炎支原體是呼吸道感染性疾病的重要病原體之一，因此，及時(shí)、有效地進(jìn)行肺炎支原體感染的實(shí)驗(yàn)室診斷就顯得尤為重要。目前MP感染的實(shí)驗(yàn)室診斷仍然主要依靠血清學(xué)試驗(yàn)，抗MP-IgM是機(jī)體受MP感染后最早產(chǎn)生的特異性抗體，于發(fā)病后1周左右可檢出［4］，2～4周達(dá)到高峰，一般12～16周轉(zhuǎn)陰。雖然檢測(cè)抗MP-IgG雙份血清抗體滴度升高4倍，也可以作為臨床診斷指標(biāo)，但臨床上取得雙份血清進(jìn)行檢測(cè)的可能性很小。

本組資料顯示，兩種方法檢測(cè)96例患兒，蛋白芯片法49例陽(yáng)性，陽(yáng)性率51.0%，診斷符合率68.0%，膠體金法陽(yáng)性23例，陽(yáng)性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。

蛋白芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染具有重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)［5］，但是，利用蛋白芯片技術(shù)對(duì)于蛋白質(zhì)功能的研究仍然存在著種種問(wèn)題，例如目前大多數(shù)來(lái)自于cD-NA文庫(kù)的克隆體系不能通過(guò)正確的閱讀框架編碼蛋白質(zhì)，將直接影響有關(guān)蛋白質(zhì)功能的研究，因此，蛋白質(zhì)芯片法檢測(cè)肺炎支原體感染的臨床應(yīng)用價(jià)值還需要進(jìn)一步去探索。

參考文獻(xiàn)

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