腎結(jié)核患者分枝桿菌培養(yǎng)診斷價(jià)值的分析

作者單位：650301 昆明市第三人民醫(yī)院結(jié)核病院

通訊作者：李瓊秀

【摘要】 目的 分析BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)和羅氏培養(yǎng)法在腎結(jié)核患者尿液分枝桿菌培養(yǎng)中的診斷價(jià)值。方法 收集昆明結(jié)核病防治院2007年9月～2010年8月期間256例門診和住院的腎結(jié)核患者尿液標(biāo)本，用BacT/ALERT3D和羅氏培養(yǎng)這兩種方法進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，分析兩種培養(yǎng)方法對腎結(jié)核的診斷價(jià)值。結(jié)果 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)陽性率為43%，羅氏培養(yǎng)法陽性率為25.4%，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的陽性率明顯高于羅氏培養(yǎng)法，結(jié)果所需時(shí)間短于羅氏培養(yǎng)法，但是培養(yǎng)費(fèi)用高于羅氏培養(yǎng)法。結(jié)論 通過結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)兩種方法的比較，對選擇腎結(jié)核的檢查方法有一定意義。

【關(guān)鍵詞】 腎結(jié)核； 分枝桿菌培養(yǎng)； BacT/ALERT3D

腎結(jié)核病是由于結(jié)核菌侵犯了人體的腎臟組織而導(dǎo)致的疾病，腎結(jié)核起病隱匿，不易發(fā)覺，導(dǎo)致腎結(jié)核病很難在發(fā)病早期得到及時(shí)的確診，患者尿液結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)可以確診腎結(jié)核，使疾病在早期得到治療，傳統(tǒng)的羅氏培養(yǎng)法和BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)兩種方法都能幫助診斷腎結(jié)核，為了解兩種方法的臨床應(yīng)用價(jià)值，特對兩種方法進(jìn)行比較，以對選擇檢查方法有所幫助。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源：系2007年9月～2010年8月期間筆者所在醫(yī)院門診和住院腎結(jié)核患者的尿液標(biāo)本，共計(jì)256份。BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)142例，其中男87例，女55例，年齡19～56歲，平均37歲；羅氏培養(yǎng)114例，其中男68例，女46例，年齡23～55歲，平均35歲。同時(shí)收集其相關(guān)臨床資料。

1.1.2 試劑與儀器 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)儀和與其配套的MB/Bact培養(yǎng)瓶、MAS抗生素添加劑。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本處理 留取全量夜尿，靜置4～5 h后，棄上清液，取沉淀部分10 ml，經(jīng)3000 r/min離心30 min，取沉淀進(jìn)行堿處理［與等倍量4%氫氧化鈉（NaOH）混合，處理15 min］后接種。

1.2.2 標(biāo)本接種 （1）BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng):加10 ml reconstituein flud至抗生素MSA中使其溶解，然后加0.5 ml溶解的MAS到MB/BacT培養(yǎng)瓶中，用注射器取0.5 ml標(biāo)本加入該培養(yǎng)瓶中，經(jīng)掃描培養(yǎng)瓶條碼后放入BacT/ALERT3D儀內(nèi)自動檢測。（2）羅氏培養(yǎng)法:取標(biāo)本0.1 ml均勻接種在整個(gè)培養(yǎng)基斜面上，每份標(biāo)本接種2支培養(yǎng)基。接種后斜面向上于37 ℃環(huán)境中平放24 h后，檢查培養(yǎng)基污染情況，擰緊瓶蓋，直立放置，37 ℃繼續(xù)培養(yǎng)。羅氏培養(yǎng)法結(jié)果判斷參照臨床技術(shù)操作規(guī)范-結(jié)核病分冊^［1］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用χ²檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法的結(jié)果 在腎結(jié)核活動期，較易檢出結(jié)核菌，256份標(biāo)本用兩種方法檢測，結(jié)果BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的陽性率為43%，羅氏培養(yǎng)法陽性率為25.4%，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的陽性率明顯高于羅氏培養(yǎng)法（P＜0.01）。見表1。

表1 兩種檢測方法的結(jié)果（n，%）

注：χ²8.51，P＜0.01

2.2 兩種檢測方法的時(shí)間和費(fèi)用 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)細(xì)菌生長報(bào)告陽性時(shí)間平均為12.8 d；羅氏培養(yǎng)法細(xì)菌生長報(bào)告陽性時(shí)間平均為20.2 d。BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)為70元，羅氏培養(yǎng)法的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)為30元。見表2。

表2 兩種檢測方法的時(shí)間和費(fèi)用

3 討論

結(jié)核病是當(dāng)今全球范圍對人類最具威脅性的感染性疾病之一，是單病因所致的感染性疾病中死亡率最高的疾病。中國是全球結(jié)核病的重災(zāi)區(qū)，結(jié)核病的發(fā)病總?cè)藬?shù)居全球第二。由于不規(guī)范的抗結(jié)核治療導(dǎo)致耐藥結(jié)核分枝桿菌，尤其是耐多藥結(jié)核病（MDR-TB）的產(chǎn)生與傳播是造成全球結(jié)核病嚴(yán)峻形勢的主要原因之一^［2］。2006年以來，廣泛耐藥結(jié)核病（XDR-TB）的出現(xiàn)使得結(jié)核病的防控更加棘手^［3，4］，腎結(jié)核病的檢測周期長，羅氏培養(yǎng)法得到結(jié)果的時(shí)間晚于BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)。羅氏培養(yǎng)法的陽性率也明顯低于BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)。腎結(jié)核的診斷方法較少，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)診斷腎結(jié)核就顯得尤為重要和珍貴。

BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)原理：此系統(tǒng)用一個(gè)比色計(jì)傳感器和反射光監(jiān)測溶解于培養(yǎng)基內(nèi)的CO₂的存在和生成。如果檢測標(biāo)本中有結(jié)核分枝桿菌存在，則生物代謝培養(yǎng)基中的底物產(chǎn)生CO₂。位于每個(gè)培養(yǎng)瓶底部的透氣傳感器的顏色就會由藍(lán)綠色變?yōu)辄S色。即使輕微的顏色改變亦導(dǎo)致系統(tǒng)監(jiān)測的反射率增加，瓶底的反射率每10分鐘由儀器監(jiān)測并記錄一次，在報(bào)告陽性時(shí)，大概每毫升的細(xì)菌濃度為10⁶～10⁷。

BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)檢測系統(tǒng)自動化程度高、陽性率高、污染率低、檢測時(shí)間短等優(yōu)勢，然而BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養(yǎng)儀需要進(jìn)口，與其配套的培養(yǎng)基也需要進(jìn)口，價(jià)格昂貴，成本明顯高于羅氏培養(yǎng)法。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 中華醫(yī)學(xué)會.臨床技術(shù)操作規(guī)范-結(jié)核病分冊.第1版.北京：人民軍醫(yī)出版社，2004，3:32.

［2］ 劉家云，徐修禮，孫惠平，等.耐藥結(jié)核分枝桿菌基因突變分析.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，33：594-598.

［3］ Banerjee R，Schecter GF，F(xiàn)lood J，et al. Extensively drug-resistant tuberculosis:new strains，new challenges. Expert Rev Anti Infect Ther，2008，6:713-724.

［4］ Gandhi NR，Moll A，Sturm AW，et al. Extensively drug-resistant tuberculosis as a cause of death in patients co-infected with tuberculosis and HIV in a rural area of South Africa. Lancet，2006，368:1554-1556.

（收稿日期：2011-03-07）

（本文編輯：陳丹云）