pH值對(duì)尿β₂-微球蛋白測(cè)定結(jié)果的影響

作者單位：133000 吉林省延邊第二人民醫(yī)院

通訊作者：吳英子

【摘要】 目的 探討尿液pH值對(duì)β₂-微球蛋白（β₂-MG）測(cè)定的影響。方法 免疫散射比濁法測(cè)定正常對(duì)照組與腎臟疾病組尿液在pH值調(diào)節(jié)前后β₂-微球蛋白（β₂-MG）含量的變化。結(jié)果 尿β₂-微球蛋白（β₂-MG）在正常對(duì)照組無明顯變化（P>0.05），但在腎臟疾病組pH值調(diào)節(jié)前后有顯著變化（P<0.01）。結(jié)論 尿β₂-微球蛋白（β₂-MG）不穩(wěn)定，在酸性環(huán)境中易分解破壞。因此其測(cè)定需調(diào)節(jié)pH值并及時(shí)測(cè)定，才不會(huì)出現(xiàn)假陰性或與疾病不相符的結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】 pH值； 尿β₂-微球蛋白； 免疫散射比濁法

β₂-微球蛋白（β₂-MG）是由100多個(gè)氨基酸殘基單鏈組成，相對(duì)分子量為11 600～11 815。它是構(gòu)成細(xì)胞膜上組織相容性抗原（HLA）的一部分，人體內(nèi)幾乎所有的有核細(xì)胞都能合成微球蛋白（MG）并附于細(xì)胞表面，在代謝過程中β₂-MG與HLA分離，釋放到體液中，故血清、尿、腦脊液、胸腔積液、腹腔積液、唾液等均含有β₂-MG，正常人β₂-MG合成的釋放速度非常穩(wěn)定，全部由腎小球?yàn)V過。腎小球?yàn)V過率是估價(jià)腎功能的一個(gè)重要指標(biāo)，由腎小球?yàn)V過的β₂-MG 99%由近端腎小管重吸收，并在此全部被分解成氨基酸，故而尿液中β₂-MG的測(cè)定是診斷腎小管疾病較靈敏的特異性試驗(yàn)。濾過的β₂-MG不再返流入血液循環(huán)^［1］，所以血β₂-MG升高可反映腎小球?yàn)V過率降低和體內(nèi)合成增加。尿β₂-MG升高可反映腎小球?yàn)V過率增加和腎小管重吸收功能受損^［2］。臨床應(yīng)用中常通過測(cè)定血、尿中的β₂-MG來診斷腎盂腎炎、間質(zhì)性腎炎、腎移植成活、糖尿病腎病、腎功能不全、痛風(fēng)病、重金屬鉻汞中毒以及某些惡性腫瘤，為臨床診斷提供了可靠和靈敏的指標(biāo)。血β₂-MG不受飲食的干擾，也不受采血時(shí)間的影響，動(dòng)靜脈血含量無差別，而尿β₂-MG樣本留去方便，故血、尿β₂-MG檢測(cè)是檢查腎功能較便捷的指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2008～2010年來筆者所在醫(yī)院體檢科和腎病內(nèi)科就診的門診患者160例。正常對(duì)照組為本院體檢科健康體檢者，共100例，男56例，女44例，年齡22～55歲，平均36歲，經(jīng)檢測(cè)，各項(xiàng)常規(guī)指標(biāo)均正常。腎病組為本院腎病內(nèi)科已確診的腎病患者，共60例，男33例，女27例，年齡12～78歲，平均48歲。

1.2 儀器與試劑 儀器為合肥中國(guó)科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司GC-2010γ射線免疫計(jì)數(shù)器。試劑使用北京原子能高科股份有限公司β₂-MG放射免疫分析藥盒。pH精密試紙購自上海三愛思試劑有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 無論是正常對(duì)照組還是腎臟疾病組均留取尿液標(biāo)本，先檢測(cè)尿pH值，若尿pH<6.0，則將其分為兩份，一份標(biāo)本離心沉淀后，取上清液1 ml加1滴穩(wěn)定劑并徹底混合，待測(cè)；另一份標(biāo)本用1 N的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7～9，離心沉淀后，取上清液1 ml加1滴穩(wěn)定劑并徹底混合，待測(cè)。然后同時(shí)對(duì)酸性尿液和堿性尿液中的β₂-MG利用放射免疫分析法嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行定量測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 pH值調(diào)節(jié)前后比較采用SPSS 10.0版統(tǒng)計(jì)軟件的t檢驗(yàn)，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

尿β₂-MG測(cè)定：對(duì)100份正常對(duì)照組酸性尿和堿性尿分別進(jìn)行測(cè)定，酸性尿β₂-MG測(cè)得平均值為（112.12±34） ng/ml；堿性尿β₂-MG測(cè)得平均值為（116.01±23） ng/ml，酸性尿和堿性尿差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。因此尿β₂-MG在正常對(duì)照組無明顯變化，但在腎臟疾病組pH值調(diào)節(jié)前后有明顯變化。對(duì)60份腎病患者酸性尿和弱堿性尿分別進(jìn)行測(cè)定，酸性尿β₂-MG測(cè)得平均值為（476.99±169） ng/ml；堿性尿β₂-MG測(cè)得平均值為（567.57±222） ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

3 討論

β₂-MG作為腎小管損傷的標(biāo)志物已廣泛應(yīng)用于各臨床實(shí)驗(yàn)室，準(zhǔn)確測(cè)定尿中β₂-MG的含量是診斷和治療腎臟疾病及觀察預(yù)后的重要依據(jù)^［3］，其穩(wěn)定性是影響檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵。尿液貯存時(shí)間、溫度及pH值等因素均影響其穩(wěn)定性，在實(shí)際操作中，pH值是一個(gè)重要因素。相關(guān)研究表明，在各種尿液貯存時(shí)間、溫度條件下，β₂-MG非常容易降解^［4］。在正常飲食條件下，尿液pH在5.5～6.5之間，處于弱酸性環(huán)境。這樣尿液排出體外后，β₂-MG處于易降解的環(huán)境，因此在實(shí)際操作中，必須把尿液pH值調(diào)到7～9之間，從而避免尿β₂-MG出現(xiàn)假陰性或結(jié)果偏低的情況。尿β₂-MG結(jié)果受其他因素的影響，就不能真實(shí)反映腎小管受損情況，為能及時(shí)診斷并接受治療，一定要搞清楚影響測(cè)定的因素。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，pH值是影響尿β₂-MG測(cè)定的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)表明，腎臟疾病組尿液pH值明顯影響β₂-MG的檢測(cè)結(jié)果。即腎臟疾病組在pH調(diào)節(jié)前后尿β₂-MG的測(cè)定結(jié)果有顯著變化，腎小管受損越嚴(yán)重的患者，受到的影響就越大。正常對(duì)照組因尿中β₂-MG含量甚微，pH值對(duì)正常對(duì)照組尿β₂-MG測(cè)定的影響不明顯（P>0.05），可能因分解的β₂-MG所占比例太小。總之，尿β₂-MG的含量測(cè)定對(duì)腎病診斷和治療有重要意義，準(zhǔn)確測(cè)定其結(jié)果是保證臨床醫(yī)生掌握患者病情的重要依據(jù)。接收到尿液標(biāo)本后，應(yīng)在盡量短的時(shí)間內(nèi)調(diào)節(jié)pH值，并嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行尿β₂-MG的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

［1］ 熊立凡.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ).第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:142-143.

［2］ 林敏，朱柳君，李輝.尿微量蛋白檢測(cè)及尿蛋白電泳在腎臟疾病診斷中的應(yīng)用.放射免疫學(xué)雜志，2006，19（6）:502-503.

［3］ 張秀明，李健齋，魏明競(jìng)，現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué).北京：人民醫(yī)出版社，2001，36-37.

［4］ 王蕾，劉華.尿液貯存溫度、時(shí)間及pH值對(duì)尿半胱氨酸蛋白酶抑制劑C穩(wěn)定性的影響.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2005，20（3）:224-226.

（收稿日期：2011-05-03）

（本文編輯：郎威）