ER\\PR和C-erbB-2在甲狀腺癌中的表達及意義

【摘要】 目的 研究ER、PR、C-erbB-2在甲狀腺癌組織中的表達情況，探討它們的相互關系及臨床意義。方法 用免疫組化的方法檢測ER、PR、C-erbB-2在甲狀腺癌、甲狀腺腺瘤和甲狀腺正常組織中的表達，分析它們在不同病變組織中的表達狀況以及與甲狀腺癌臨床病理參數的關系。結果 甲狀腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2的陽性表達率（58.5%、71.7%、41.5%）明顯高于甲狀腺腺瘤（36.0%、38.0%、20.0%）和甲狀腺正常組織（4.0%、8.0%、4.0%）（P<0.05）。甲狀腺癌患者中年齡<40歲組ER、PR陽性率（76.5%、91.2%）遠高于≥40歲年齡組（26.3%、36.8%），女性ER、PR陽性率（69.8%、83.7%）高于男性（10%、20%）；乳頭狀癌陽性率遠高于其它分型（P<0.05）。ER、PR在無淋巴結轉移患者的陽性表達率高于有淋巴結轉移者（P<0.05），而C-erbB-2的表達無淋巴結轉移者遠低于有淋巴結轉移者（P<0.05）；C-erbB-2的表達與腫瘤大小、性別、年齡無相關性（P>0.05）。結論 甲狀腺癌、甲狀腺瘤、甲狀腺正常組織中均可檢測到ER、PR、C-erbB-2的陽性表達，以甲狀腺癌最高，提示女性激素可能是誘發甲狀腺癌發生的重要因素；ER、PR、C-erbB-2在乳頭狀癌陽性率遠高于其它分型，提示乳頭狀癌可能是女性激素依賴性腫瘤；在甲狀腺癌中，ER、PR與C-erbB-2的表達呈負相關。聯合檢測ER、PR、C-erbB-2為進一步了解甲狀腺癌的發生發展，判斷甲狀腺癌的惡性程度、預后及有無淋巴結轉移有重要意義。

【關鍵詞】 ER； PR； C-erbB-2； 甲狀腺癌； 免疫組織化學

Significance of The Expression of ER，PR，C-erbB-2 in thyroid carcinoma TIAN Meng-zi^{*>/sup>，BI Yan-qing*>/sup>，ZHAO Xiao-hua.*>/sup>Dongying People's Hospital，Dongying 257091 China}

【Abstract】 Objective To study the expression of ER，PR andC-erbB-2 in thyroid carcinoma，to explore the relations among them and their clinical values.Methods Normal thyriod tissues，thyroid adenoma and thyroid carcinoma were evaluated for the expression of ER，PR and C-erbB-2 by immunohistochemistry，the levels of these proteins in tissues with different types of lesion and their correlation with clinicopathological parameters of thyroid carcinoma were analyzed.Results Compared with normal thyroid tissues and thyroid adenoma，the expression rates of ER，PR and C-erbB-2 of thyroid carcinoma increased obviously，there was significant difference between thyroid carcinoma and them（P<0.05）.The patients with thyroid carcinoma，the expression rates of ER and PR in the group with age<40 increased obviously compared with the group with age≥40，there was significant difference between them（P<0.05）.the expression rates of ER and PR in famale were higher than them in male，there was significant difference between them（P<0.05）.The positive rates of ER，PR andC-erbB-2 in papillocarcinoma were higher than them in other thyroid carcinoma pathological types（P<0.05）.the positive rates of ER and PR in patients with no-lymph node metastasis were higher than them with lymph node metastasis（P<0.05）.The positive rate ofC-erbB-2 in patients with no-lymph node metastasis were lower than that with lymph node metastasis（P<0.05）.The expression of ER， PR and C-erbB-2 were no associated with the sex，age of patients and the size of tumor（P>0.05）.Conclusion The positive expression of ER，PR andC-erbB-2 were detected in normal thyroid tissues，thyroid adenoma and thyroid carcinoma.The expression in thyroid carcinioma was highest among them.Female sex hormone was probably a improtant agent induced the devolpment of thyroid carcinoma.It was close associated with the devolpment of thyroid carcinoma.The positive rates of ER，PR andC-erbB-2 in papillocarcinoma were higher than them in other thyroid carcinoma pathological types. Papillocarcinoma was probably a female sex hormone-dependent tumor.The expression of ER and PR were negative correlated withC-erbB-2 in thyroid carcinoma. Simultan- eously examing the expression of ER，PR andC-erbB-2 may have important effect on further investigation the mechanism of the devolpment of thyroid carcinoma，judgement the degree of m alignancy，prognosis and with or without lymph node metastasis in thyroid carcinoma.

【Key words】 Estrogen receptor; Progesterone receptor; C-erbB-2; Thyroid carcinoma; Immunohistochemistry

甲狀腺癌是最常見的甲狀腺惡性腫瘤，約占甲狀腺原發性腫瘤的1/3，臨床上較少見，但近年來呈上升趨勢。其發病原因目前尚不清楚，除了一些公認的不確定因素，如可能與放射線和流行性甲狀腺腫有關，某些髓樣癌可有家族遺傳性，部分未分化癌可能來自分化性乳頭狀腺癌和濾泡狀腺癌等外，由于甲狀腺癌發病性別差異較大，估計可能有性激素等因素的參與。甲狀腺癌的發生、浸潤轉移機制尚不清楚，對甲狀腺癌的生物學行為的研究也一直是人們關注的焦點。本研究通過檢測ER、PR、C-erbB-2在甲狀腺癌中的表達，探討它們的臨床意義，為探索甲狀腺癌的發生發展的機制，判斷分化程度、預后及有無淋巴結轉移提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇濰坊醫學院附屬醫院1995年～2005年手術切除并經病理證實的甲狀腺癌存檔標本53份，男10例，女43例，中位年齡40歲（20～75歲）。選擇同期甲狀腺腺瘤標本25份，另取腺瘤旁正常甲狀腺組織25份。53例甲狀腺癌患者術前均未做放、化療，有完整臨床資料。乳頭狀癌38例，濾泡狀癌13例，未分化癌2例。

1.2 試驗方法

1.2.1 所有組織均用10%甲醛液固定，常規石蠟包埋，4 μm厚連續切片，分別做HE和免疫組化染色

1.2.2 主要試劑 ER、PR、C-erbB-2基因、二步法染色試劑盒、DAB顯色試劑盒、0.01 M PBS液、抗原修復液均購于北京中山生物技術有限公司。

1.2.3 采用二步法染色 根據試劑盒操作說明書中的要求和步驟制作標本，陽性對照采用對照片（購于北京中山試劑公司），以PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判定標準 根據著色深淺程度及陽性細胞數量（%），由兩名經驗豐富的病理科醫師在400倍光鏡下分別隨機選擇10個視野分析，并單獨作出檢驗評估。陽性細胞必須是：（1）細胞結構清晰；（2）細胞定位性好；（3）著色明顯高于背景。對表達強度進行半定量評估分級，即不著色為0分，淺黃色為1分，深黃色為2分，黃褐色為3分；計數陽性細胞百分率。將兩者相乘，得免疫組化值H:H<0.5（-）， 0.5≤H<1（+），1.5≤H（+++）。-～+視為陰性表達，++～+++視為陽性表達。

1.4 統計學處理 用SPSS 10.0統計軟件進行統計學處理。采用χ^{2>/sup>檢驗和Fisher精確概率法進行統計學分析。以P<0.05為差異統計學意義。}

2 結果

2.1 甲狀腺癌、甲狀腺瘤與甲狀腺正常組織中均可檢測到ER、PR、C-erbB-2的陽性表達，其中以甲狀腺癌的陽性表達最高，女性激素很可能是誘發甲狀腺癌發生的重要因素，與甲狀腺癌的發生發展、分化程度、淋巴結轉移、臨床分期密切相關。見表1～3。

表1 ER在甲狀腺癌、甲狀腺腺瘤及甲狀腺

正常組織中的表達（n，%）

注：與正常組織比較，^{△>/sup>P<0.05；與腺瘤組織比較，*>/sup>P<0.05}

表2 PR在甲狀腺癌、甲狀腺腺瘤及甲狀腺

正常組織中的表達（n，%）

注：與正常組織比較，^{△>/sup>P<0.05，與腺瘤組織比較，*>/sup>P<0.05}

表3 C-erbB-2在甲狀腺癌、甲狀腺腺瘤及甲狀腺

正常組織中的表達（n，%）

注：與正常組織比較，^{△>/sup>P<0.05；與腺瘤組織比較，*>/sup>P<0.05}

2.2 乳頭狀癌ER、PR、C-erbB-2的陽性率遠高于其它類型，提示乳頭狀癌很可能是女性激素依賴性腫瘤。見表4。

2.3 ER、PR與C-erbB-2在甲狀腺癌中的表達呈負相關。聯合檢測ER、PR、C-erbB-2為進一步判斷甲狀腺癌的惡性程度、預后及有無淋巴結轉移有重要意義。見表4。

3 討論

3.1 ER、PR與甲狀腺癌 由于甲狀腺癌發病存在明顯的性別差異，女性發病率明顯高于男性，且女性患者的預后也比男性好，在年齡方面也有較強的相關性，小于40歲的患者預后比大于40歲的患者好。因此，人們預測體內性激素的水平可能起著重要的作用。甲狀腺癌患者體內的性激素水平及腫瘤組織中性激素受體之間的關系正在逐步引起人們的關注。Stedmen在1980年首次報道在甲狀腺腺瘤中發現有ER存在^［1］，Molteni等^［2］在4例PTC中發現有2例ER陽性。以后不斷有報道在甲狀腺癌中檢測出ER和PR，考慮與甲狀腺和卵巢同受TSH的調節，相互間有著必然的聯系^［3］。甲狀腺癌的發病女多于男，男女之比約為1：（2～5），女性甲狀腺癌組織中ER和PR的陽性率均高于男性，受體水平的不同是女性甲狀腺癌發病高于男性的主要原因。甲狀腺癌的發病年齡以20～40歲最多，年齡越小預后越好，高于40歲預后較差，死亡率達3.7%～27%；本組年齡大于40歲的甲狀腺癌患者ER、PR陽性率明顯高于年齡小于40歲組。可以認為年齡與女性激素的關系是影響甲狀腺癌發病和預后的重要因素。PR是ER與E2復合物在癌細胞內合成的，被認為是腫瘤組織中雌激素活性標志。它的存在提示ER確實具有生物活性。本試驗顯示，甲狀腺癌組織中的ER、PR含量遠高與甲狀腺腺瘤。因此，通過檢測ER、PR有可能對早期發現甲狀腺癌和鑒別甲狀腺良惡性腫瘤提供幫助。某些腫瘤的生存有賴于一定的激素環境，稱為激素依賴性腫瘤。腫瘤對激素依賴的物質基礎在于腫瘤細胞是否含有對該激素特異性親合的受體。激素依賴性腫瘤絕大多數發源于靶器官，有些腫瘤，雖非激素靶器官來源，也有一定程度的激素依賴性。ER及PR是存在于細胞中的一種對雌、孕激素有親合力的蛋白質。在許多非靶器官的腫瘤中存在ER及PR，說明這些腫瘤和雌激素具有一定的關系。甲狀腺不是雌、孕激素的靶器官，但本研究顯示在甲狀腺癌尤其是甲狀腺乳頭狀癌中，含有存在較高的雌、孕激素受體，說明乳頭狀癌的發生發展與雌孕激素密切相關，甲狀腺乳頭狀癌有可能是激素依賴性腫瘤。

3.2 C-erbB-2與甲狀腺癌 C-erbB-2癌基因編碼的p185蛋白與EGFR具有驚人的結構相似性，因此認為C-erbB-2癌基因編碼某種未知生長因子受體^［4］。雖然在腫瘤細胞的生長和分化中，C-erbB-2的功能仍然不十分清楚，但是因為這個基因編碼生長因子受體，當其過度表達時，可能給予細胞生長優勢并予以表達^［5］。本研究顯示C-erbB-2蛋白的表達絕大部分在甲狀腺乳頭狀癌標本中，而濾泡狀癌與未分化癌中表達極少，僅有2例表達，有文獻報道認為C-erbB-2的表達是乳頭狀癌的一個特征性變化，本研究結果傾向于這個結論。甲狀腺乳頭狀癌C-erbB-2的陽性表達率高于其他類型癌，C-erbB-2的過表達可能與乳頭狀癌易發生淋巴結轉移的特點有內在聯系，但由于濾泡狀癌與未分化癌研究例數太少，在C-erbB-2的表達方面難以得出明確的結論，有待進一步研究加以證實。C-erbB-2不僅可以引起細胞的惡性轉化，而且與多種腫瘤的預后密切相關。Wright等研究發現腫瘤中C-erbB-2蛋白表達僅次于淋巴結轉移，是具有第二位預后意義的指標。本研究發現，甲狀腺癌中C-erbB-2的表達與性別、年齡、腫瘤大小無相關性（P>0.05），而在有淋巴結轉移的陽性表達率遠遠高于無淋巴結轉移的陽性表達率（P<0.05），說明C-erbB-2與甲狀腺癌的淋巴結轉移及預后密切相關，早期檢測C-erbB-2可對判斷甲狀腺癌是否有淋巴結轉移、甲狀腺癌的預后提供依據，對選擇甲狀腺癌的治療方案有重要意義。

參 考 文 獻

［1］ Weiss SW，Langloss JM，Shmookler BM，et al.Estrogen receptor protein in bone and soft tissue tumors.Lab Invest，1986，54（6）:689-694.

［2］ Molteni A，Warpeha RL，Brizio-Molteni L，et al.Estradiol receptor binding protein in head and neck neoplastic and normal tissue.Arch Surg，1981，116（2）: 207-210.

［3］ Clark OH，Gerend PL，Davis M，et al.Estrogen and thyroid-stimulating hormone （TSH） receptor in neoplastic and noneoplastic human thyroid diseases.J Surg Res，1985， 38（12）:89-96.

［4］ Kokai Y，Myers JN，Wada T，et al.Ynergistic interaction of p185 c-neu and the EGF receptor leads to transformation of rodent fibroblasts.Cell，1989，58（2）:287-292.

［5］ 李寧，沈璐華，祝慶手，等.C-erbB-2原癌基因產物在敷骨內瘤中的增強表達.中華病理學雜志，1994，23（1）:37-39.

（收稿日期：2011-06-24）

（本文編輯：梅宏偉）

表4 PR、ER及C-erbB-2的表達與甲狀腺癌臨床病理特征的關系［n，n（%）］

注：ER、PR表達與發病年齡、性別、臨床病理分型、有無淋巴結轉移有關，^{△>/sup>P<0.05；C-erbB-2表達與臨床病理分型、有無淋巴結轉移有關，*>/sup>P<0.05}