兩種梅毒血清實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)

【摘要】 目的 評(píng)價(jià)兩種梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的敏感度和特異度，以及應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì)32份梅毒陽(yáng)性標(biāo)本和32份梅毒陰性標(biāo)本采用梅毒螺旋體明膠凝集實(shí)驗(yàn)（TPPA）和快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)（RPR）進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 TPPA的敏感度為100%，特異度為100%；RPR的敏感度為75%、特異度為100%。TPPA與RPR的敏感度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P<0.01）。結(jié)論 用RPR法檢測(cè)梅毒易造成假陰性而漏檢，建議實(shí)驗(yàn)室用TPPA法檢測(cè)以提高梅毒的陽(yáng)性率，避免漏檢。

【關(guān)鍵詞】 梅毒抗體； TPPA； RPR； 實(shí)驗(yàn)方法學(xué)

梅毒螺旋體屬于密螺旋體屬、蒼白螺旋體的蒼白亞種，是引起人類梅毒的病原體。梅毒是一種系統(tǒng)性、常見的慢性性傳播疾病之一，其傳播途徑為性傳播、血液傳播和母嬰垂直傳播。不良的性行為、共用注射器等均可引起梅毒病原體的感染。感染后幾乎可以累及全身各個(gè)器官，且病程長(zhǎng)、危害大、臨床表現(xiàn)復(fù)雜，呈多樣性，即可以產(chǎn)生多種多樣的癥狀和體征，又可以很多年沒有癥狀而呈潛伏狀態(tài)，容易被漏診和誤診。同時(shí)育齡婦女還可通過(guò)胎盤傳給胎兒引起先天性梅毒。據(jù)全國(guó)流行病學(xué)調(diào)查表明，我國(guó)從1991年～2001年的性病呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，其中梅毒的增長(zhǎng)速度最快，達(dá)到61.63%【sup】［1］【/sup】。2005年國(guó)家衛(wèi)生部公布的法定報(bào)告?zhèn)魅静≈校范镜陌l(fā)病人數(shù)，從2002年的第7位躍居第5位【sup】［2］【/sup】。近年來(lái)為控制梅毒的傳播，多數(shù)醫(yī)院對(duì)手術(shù)、輸血及各種創(chuàng)傷性檢查的患者都進(jìn)行梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查。因此選擇敏感性高的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，對(duì)梅毒的早期診斷提供準(zhǔn)確及時(shí)的依據(jù)有助于梅毒的準(zhǔn)確診斷和早期治療，尤其對(duì)控制其蔓延至關(guān)重要。為了解TPPA和RPR敏感度和特異度的差異，筆者對(duì)32份梅毒陽(yáng)性標(biāo)本和32份梅毒陰性標(biāo)本分別進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集筆者所在地區(qū)2006年1月～2011年1月門診及病房確診為梅毒患者的32份陽(yáng)性血清作為實(shí)驗(yàn)組，其中男性21例，女性11例，年齡19～73歲；經(jīng)健康體檢為健康人群32份梅毒陰性血清作為對(duì)照組，男性20例，女性12例，年齡為21～60歲。

1.2 試劑 TPPA法采用日本富士瑞必株式會(huì)社提供的梅毒螺旋體抗體診斷試劑（凝集法）；RPR法采用上海科華生物有限公司提供的梅毒快速反應(yīng)素診斷試劑，兩種試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法 （1）兩種方法的操作均嚴(yán)格按試劑盒內(nèi)的操作說(shuō)明書進(jìn)行，質(zhì)控血清由廣西區(qū)臨檢中心提供。（2）敏感度和特異度計(jì)算方法：敏感度（%）真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性）×100%，特異度真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）×100%。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的32例血清用兩種方法進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果表明TPPA和RPR敏感度分別為100%和75%，特異度均為100%。TPPA法和RPR法的敏感度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025），見表1。

表1 兩種方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果比較 （n，%）

注:TPPA法與RPR法比較，χ【sup】2【/sup】9.14，【sup】*【/sup】P<0.01

3 討論

梅毒的診斷需要依據(jù)病史、臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查。目前梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查方法有病原體直接檢查法和血清學(xué)檢查法。病原體直接檢查法是用暗視野顯微鏡鏡檢測(cè)特征性的梅毒螺旋體，主要適用于人體感染梅毒的初期即一期梅毒和二期梅毒，但陰性不能完全排除，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室特別是基層實(shí)驗(yàn)室不作此實(shí)驗(yàn)。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)是目前國(guó)內(nèi)外檢測(cè)梅毒螺旋體的主要方法，人體一旦感染梅毒螺旋體后，將引起一系列血清免疫學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生兩種抗體。一類是磷脂反應(yīng)素即非特異性抗體；另一種是針對(duì)梅毒螺旋體的特異性抗原而產(chǎn)生的抗體，即梅毒的特異性抗體。TPPA實(shí)驗(yàn)是特異性梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)；RPR實(shí)驗(yàn)是非特異性梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)；由于梅毒早期的臨床表現(xiàn)不典型，血清學(xué)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)成了梅毒診斷的主要手段，TPPA法檢測(cè)的是梅毒特異性抗體，以明膠顆粒為載體，吸附梅毒螺旋體-Niohols株菌體抗原，克服了血細(xì)胞自溶而造成漏檢的弊端，有很高的敏感度和特異度，臨床實(shí)驗(yàn)室常以TPPA法陽(yáng)性作為確診梅毒的依據(jù)【sup】［3］【/sup】。RPR是非特異性梅毒血清實(shí)驗(yàn)，它將VDRL抗原吸附于活性碳顆粒的表面，若待測(cè)血清中存在反應(yīng)素時(shí)，即發(fā)生凝集，具有與TPPA法同樣的特異度，且血清不需要滅活、操作簡(jiǎn)單、所需時(shí)間短、試劑成本價(jià)格低廉，故被臨床大多基層實(shí)驗(yàn)室廣泛使用。本研究以TPPA法為金標(biāo)準(zhǔn)對(duì)RPR法進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，TPPA法和RPR法的敏感度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025）。由于RPR法檢測(cè)32份陽(yáng)性標(biāo)本的檢出率只有75%，有25%是假陰性而漏檢。也有相關(guān)報(bào)道稱由于RPR法會(huì)產(chǎn)生假陰性，陽(yáng)性結(jié)果可以直接報(bào)告，但陰性結(jié)果必須用TPPA法再確證【sup】［4，5］【/sup】。由于基層醫(yī)院檢測(cè)對(duì)象大多數(shù)為手術(shù)、輸血、各種創(chuàng)傷性檢查的患者及產(chǎn)婦，并非性病門診的高危患者，梅毒的陰性結(jié)果是遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于陽(yáng)性結(jié)果。鑒于RPR法陰性結(jié)果的不確定性，須用TPPA法再確證，這既浪費(fèi)試劑成本又增加工作人員的工作量。建議基層醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室使用TPPA法檢測(cè)梅毒，即高效又準(zhǔn)確，從而有效提高梅毒的檢出率，對(duì)梅毒進(jìn)行早診斷、早治療，控制蔓延至關(guān)重要。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 龔向東，葉順章，張君炎，等.1991～2001年我國(guó)性病流行病學(xué)分析.中華皮膚科雜志，2002，35（3）:178-182.

［2］ 程玉萍.梅毒研究近況.醫(yī)學(xué)綜述，2007，13（19）:1470-1472.

［3］ 尹躍平，施美琴，王洪春，等.快速梅毒螺旋體抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室初步評(píng)價(jià).嶺南皮膚性病科雜志，2009，16（1）:11-14.

［4］ 陳遠(yuǎn)貴，梅毒不.同血清學(xué)檢測(cè)方法的比較.臨床輸血與檢驗(yàn)，2009，11（2）:174-175.

［5］ 彭英，梁平.梅毒螺旋體膠體金法的臨床應(yīng)用價(jià)值.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2008，24（6）:825-826.

（收稿日期：2011-02-21）

（本文編輯：車艷）