FHIT、β-Catenin在胃癌中表達及其相關性研究

【摘要】 目的 探討胃癌中FHIT和β-Catenin的表達相關性及其與胃癌發展之間的關系。方法 應用免疫組化法檢測50例胃癌組織、10例胃良性病變組織標本中FHIT和β-Catenin表達。結果 胃癌組織FHIT和β-Catenin的陽性表達率分別為22.00%和78.00%。FHIT在胃癌組織中表達缺失，與浸潤深度和淋巴結轉移關系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關（P>0.05）。β-Catenin在胃癌組織中高表達與浸潤深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結轉移關系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡無關（P>0.05）。癌組織中FHIT和β-Catenin的表達呈負相關（r=-0.358，P=0.011）。結論 FHIT和β-Catenin在胃癌中表達成顯著負相關，提示兩者在胃癌的發生發展中可能存在重要的協同作用。

【關鍵詞】 FHIT； β-Catenin； 胃癌； 免疫組織化學

Study on the Expression and Correlation of FHIT and β-Catenin in Gastric Carcinoma YOU Li-guang， XU Ya-dong， LI Xin-lei，et al. The Fifth Clinical Hospital of Harbin Medical University， Daqing 163318， China

【Abstract】 Objective To investigate the correlation of the expression of FHIT andβ-Catenin proteins and study its role in the development of gastric carcinoma.Methods The expression of FHIT and β-Catenin proteins was detected by SP immunohistochemical technique in 50 cases of gastric carcinoma，10 cases of benigh gastric lesions in tissue samples.Results The positive rates of FHIT andβ-Catenin proteins were 22.80% and 82.46% respectively in gastric carcinoma. Reduction of FHIT had no relation to the sex or age of the patients， sizes of tumors and tumor differentiation(P>0.05). The expression of FHIT was closely related to the depth of tumors and lymph node metastasis(P<0.05). The expression of β-Catenin was not related to the sex or age of the patients (P>0.05). The expression of β-Catenin was closely related to the depth of tumors， sizes of tumors ， tumor differentiation and lymph node metastasis(P<0.05). The expression of FHIT protein had a significant negative correlation with that of β-Catenin protein in gastric carcinoma(r=-0.358，P=0.011).Conclusion There is a significant negative correlation between high expressions of FHIT andβ-Catenin proteins in gastric carcinoma. The high expressions of FHIT andβ-Catenin proteins are possibly related to the development and metastasis of gastric carcinoma.

【Key words】 FHIT; β-Catenin; Gastric carcinoma; Immunohistochemistry

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細胞癌變是多因素、多階段、多基因變異的結果。脆性組氨酸三聯體（fragile histidine triad， FHIT）表達頻繁地降低或缺失，在細胞增殖、轉化及腫瘤發生中具有十分重要的作用^［1，2］。Wnt信號轉導通路致癌的關鍵是β-Catenin降解障礙并與Tcf-lef結合進入胞核，激活下游靶基因引起細胞增殖和分化失控導致腫瘤發生^［3］。已知兩種基因與胃癌的發生發展密切相關，但兩者在胃癌中表達的相關性尚未見報道。本研究旨在探討FHIT和β-Catenin的表達相關性及其與胃癌發生發展的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本隨機取自哈爾濱醫科大學附屬腫瘤醫院病理科2004～2005年存檔胃癌組織蠟塊50例和胃良性病變組織蠟塊10例。所有材料均經福爾馬林固定，常規石蠟包埋，4 μm厚連續切片，常規染色后，復核病理診斷，并按WHO標準分型、分級。其中高中分化腺癌20例，低未分化腺癌30例，胃良性病變組織10例；癌組織直徑＜5 cm 21例，≥5 cm 29例；其中男35例，女15例，男女比為2.33∶1；年齡42～83歲，中位年齡61歲。所有病例均有淋巴結轉移情況記錄，其中轉移者30例。浸潤深度至黏膜或黏膜下及至肌層17例，浸潤至漿膜及穿透漿膜層33例。所有病例術前均未接受放療、化療。

1.2 試劑及染色法 β-Catenin多克隆抗體及鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組化染色試劑盒均為美國Santa Cruz公司產品；FHIT多克隆抗體和Envision試劑盒均為Zymed公司產品。均購自北京中山生物技術有限公司。用免疫組化SP法，將已知陽性的胃癌切片作為陽性對照，用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定 FHIT陽性反應產物呈棕黃色顆粒狀，定位在細胞漿中。β-Catenin陽性物質呈棕黃色，定位于細胞膜，即連續的細胞膜染色。參照有關文獻^［4］，每張切片隨機選取10個高倍視野，每個高倍視野計數100個癌細胞，計算陽性細胞百分率，結果判定采用盲法，并由病理科醫師對染色結果復閱核定。判定標準：（1）陰性（-）：陽性細胞數＜5%；（2）弱陽性（+）：陽性細胞數在5%～25%之間，染色淡；（3）中度陽性（++）：陽性細胞數26%～50%之間，染色清晰；（4）強陽性（+++）：陽性細胞數＞50%，染色強。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件進行分析，組間比較采用χ2檢驗及Fisher確切概率法，相關性分析采用Spearman等級相關分析，結果均以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 FHIT和β-Catenin在胃癌和胃良性病變組織中的表達 50例胃癌標本中，FHIT陽性表達11例，陽性率22.00%；β-Catenin陽性表達42例，陽性率84.00%。10例良性病變胃組織標本中FHIT全部陽性表達，β-Catenin全部陰性表達。兩組標本中的FHIT和β-Catenin表達差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 FHIT和β-Catenin表達與胃癌臨床病理特征的關系 FHIT在胃癌組織中表達缺失，與浸潤深度和淋巴結轉移關系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關（P>0.05）。β-Catenin在胃癌組織中高表達與浸潤深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結轉移關系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡無關（P>0.05）。見表2。

2.3 胃癌組織中FHIT和β-Catenin表達的相關性 由表3可見，50例胃癌組織中，Spearman 等級相關分析顯示FHIT和β-Catenin表達呈負相關（r=-0.358，P=0.011）。

3 討論

FHIT基因是于1996年首次克隆出的一個新的候選抑癌基因，其定位于染色體3p14.2，跨越人類基因組中一個最普遍的脆性位點FRA3B及腎細胞癌相關性斷裂點t。大量研究表明，FHIT基因在胃癌等腫瘤中均存在異常。本實驗研究發現，FHIT在胃癌組織中表達缺失，與浸潤深度和淋巴結轉移關系密切，與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關。Wnt信號傳導通路與腫瘤的發生發展密切相關，而β-catenin是這條通路中的核心因子，介導細胞與細胞之間的黏附^［5］。當Wnt信號蛋白與細胞膜上的受體蛋白結合后活化

細胞內蛋白Dishevelled（Dsh），Dsh的活化抑制了糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β， GSK-3β）的功能，使其不能磷酸化β-catenin，抑制了的β-catenin蛋白降解導致細胞漿內游離的β-catenin增加，促進下游靶基因的表達。研究表明，β-Catenin在胃癌組織中高表達與浸潤深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結轉移關系密切，與患者的性別、年齡無關。

兩者在胃癌中的相關性尚未見報道。本實驗中50例胃癌組織中有FHIT大量表達缺失，同時β-catenin高表達，呈明顯的負相關（r=-0.358，P=0.011），提示兩者在胃癌的發生發展中可能存在重要的協同作用，兩者的聯合檢測可能對胃癌的診治及預后有重要意義，可能會成為胃癌的靶向治療的新目標，還需進一步的研究來探討兩基因間的具體作用機制。

參 考 文 獻

［1］ Lee YC， Wu CT， Shih JY， et al. Frequent allelic deletion at the FHIT locus assosiate with p53 overexpression in squamous cell carcinoma subtype of Taiwanese non-small-cell lung cancers ［J］. Br J Cancer，2004，90(12):2378-2383.

［2］ Pekarsky Y， Palamarchuk A， Huebner K， et al. FHIT as tumou supperssor: mechanisms and therapeutic opportunitiesp［J］. Cancer Biol Ther，2002，1(3):232-236.

［3］ Kikuchi A. Regulation of beta-catenin signaling in the Wnt pathway［J］. Biochem Biophys Res Commun，2000，268(2):243.

［4］ Hao XP， Willis JE， Pretlow TG， et al. Loss of fragile histidine triad expression in colorectal carcinomas and prem alignant lesions［J］. Cancer Res，2000，60(1):18-21.

［5］ Karim R， Tse G， Putti T， et al. The significance of the Wnt pathway in the pathology of human cancers［J］. Pathology，2004，36:120-128.

（收稿日期：2011-10-21）

（本文編輯：王宇）