三種麻醉方法在骨科動物實驗中效果比較

梁佩紅，江 斌，陳居銪，譚見容，楊小紅

(暨南大學醫學院附屬廣州市紅十字會醫院，廣州市創傷外科研究所，廣州 510220)

隨著臨床醫學技術研究的飛速發展，醫學實驗中動物實驗也越來越受到重視，尤其是大多數臨床醫學技術的新嘗試，都先在動物身上做實驗，然后再應用到臨床上。在骨外科手術模型的動物實驗方面，麻醉的好壞，直接影響實驗的質量、結果和進程。傳統的麻醉藥戊巴比妥鈉，在動物實驗麻醉中，因深麻醉量與致死量很接近，實驗動物存在個體差異，麻醉劑量難掌握，極易造成術中麻醉死亡；如何提高和改進麻醉效果，是動物實驗手術的關鍵。經過參考相關文獻［3-6，9］，摸索、實踐、總結，我們逐步形成一套比傳統的單純用藥效果更佳、且操作較為簡便的麻醉方法，現報告如下。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

健康新西蘭兔80只，不分雌雄，體重2.5～3.5kg，均購于廣東省醫學實驗動物中心【SCXK(粵) 2008-0002】，單籠飼養，自由進食。于2010年9月～2011年6月在廣州市十字會醫院動物實驗中心實驗【SYXK(粵)2006-0072】，隨機分為3組，速眠新II組20只，戊巴比妥鈉組30只，復合組(速眠新II戊巴比妥鈉聯合用藥組)30只。

1.2 實驗藥品

1.2.1 麻醉藥品 速眠新II注射液：長春軍事醫學科學院 軍事獸醫研究所，批號為：吉獸藥試字(2004)005013；戊巴比妥鈉粉劑：北京化學試劑公司，批號為020919。

1.2.2 呼吸興奮劑的準備 麻醉前準備可拉明、洛貝林，在動物麻醉時，一旦發現麻醉過深，及時肌肉注射上述藥品，以減少動物死亡。

1.3 實驗方法

實驗隨機分為3組(A、B、C)，速眠新Ⅱ組(A組)：按速眠新Ⅱ0.3m l/kg，肌肉注射麻醉；戊巴比妥鈉組(B組)：用戊巴比妥鈉粉劑加生理鹽水溶解，配成0.6%水溶液，過濾除菌，按35～40mg/kg靜脈注射麻醉；復合組(C組)：先行0.6%戊巴比妥鈉按35～40mg/kg靜脈注射麻醉，待進入麻醉期后再行速眠新II按0.1mg/kg肌肉注射，表1。

表1 動物麻醉分組處理情況Tab.1 Group of anesthetic animal

1.4 觀察指標

1.4.1 誘導期 從給藥到進入麻醉的時間，此時呼吸平穩緩慢、肌肉開始松弛等。

1.4.2 麻醉期(麻醉持續時間) 進入麻醉后到蘇醒的時間，此時呼吸平穩，睫毛反射、角膜反射遲鈍或消失，肌張力顯著降低，皮膚捏痛覺消失，趾蹼反射消失。

1.4.3 蘇醒期 從開始蘇醒到站立行走的時間，實驗動物各種反射、反應開始恢復，肢體開始活動。

1.4.4 麻醉效果① 進入深麻醉時的穩定性：以兔睫毛、角膜反射減弱，肌張力松弛，兔耳皮膚夾捏反應消失為準，呼吸45±5次/m in，心率120±15次/分。② 麻醉死亡率：觀察麻醉期及術后實驗動物的存活例數。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 誘導期

A組誘導期時長為10.0±5(min)，B組與 C組誘導期時長均為4.0±2(min)。B組與 C組的誘導期時長明顯短于A組，有顯著差異(P＜0.05)，見表2。

2.2 麻醉效果

A組進入麻醉期的時間長，B組和 C組進入麻醉期較快，維持時間長，A組與B組、C組比較，維持時間有差異(P＜0.05)；復蘇期A組、B組、C組之間差異不顯著(P＞0.05)，表2。

表2 三種麻方法效果比較Tab.2 Comparation of three anesthetic methods during

2.3 麻醉期及術后的死亡率

A組與B組麻醉效果不夠理想，表現為肌肉不夠松弛，有痛覺，術中常需追加麻藥，術中死亡率較高，C組的麻醉效果較好，死亡率低；術后 A組、B組、C組死亡率差異不顯著(P＞0.05)，表3。

表3 麻醉期及術后的死亡率比較Tab.3 Comparation of anesthetic period and mortality rate after surgery

3 討論

骨外科方面的動物實驗，與其他的動物實驗相比，麻醉的要求較高，特別是脊柱手術［7］。理想的骨科手術麻醉是①麻醉藥物起效快，持續時間長；②鎮靜和鎮痛作用強，整個手術過程中動物無躁動；③有良好的肌松作用；④麻醉蘇醒快，藥物不良反應輕，術后對實驗動物影響小，死亡率低。實驗過程中，好的麻醉方法，除了保證實驗的質量外，還同時關注到實驗動物的福利和倫理道德問題［8］。

首先，從實驗動物的倫理道德來說，隨著動物保護運動的深入，實驗動物學的關注焦點逐漸從飼養管理和使用操作轉向動物福利，而且現在國際學術刊物上發表涉及實驗動物的論文，不但要求實驗動物合格證，還需要提供所在單位“實驗動物倫理委員會”的審查意見，因此，高質量的麻醉，完全符合人們日益重視動物倫理道德中的動物福利和提倡的“3R”(replace替代、reduction減少、refinement優化)原則。

其次，從實驗質量來說，實驗結果顯示，速眠新II無論從誘導期、麻醉效果、維持時間，都差于B組和C組；速眠新II是由氟哌啶醇、保定丁、新保靈等藥物制成的復合制劑。保定靈所含的二甲苯胺噻唑類似甲苯噻嗪，是 α2-受體激動劑，通過激活 α2-腎上腺素能受體起麻醉作用，鎮靜、肌松作用良好，鎮痛作用較差，抑制呼吸和心臟傳導系統，容易出現呼吸頻率和心率下降；氟哌啶醇有較強的安定、鎮痛、肌松作用，但抑制呼吸作用明顯，術中須反復追加麻醉藥，有產生快速耐受的可能，用藥量大，難以掌握，容易導致術中動物死亡，也給術者帶來麻煩。戊巴比妥鈉雖然誘導期與維持時間都較理想，但由于具有擬 γ-氨基丁酸(GABA)的作用，與GABA受體結合，麻醉劑量的戊巴比妥鈉能直接活化氯離子通道，使氯離子大量內流致突觸后膜發生超極化，從而降低神經元的興奮性，具有較強的鎮靜、鎮痛、催眠作用，對呼吸有明顯抑制。因為實驗動物存在個體差異，麻醉藥物的劑量不好控制，易導致 ① 術中蘇醒，此時需追加麻藥，這樣會影響手術的連貫性，增加實驗動物的痛刺激。② 術中麻醉意外死亡，因大量戊巴比妥鈉極易引起呼吸抑制而致死，恰恰深麻醉的量與致死量很接近，故有術中死亡的危險。且本品在蘇醒前伴有動作不協調、興奮和掙扎現象，易造成術后外傷。C組則較理想，聯合用藥，麻醉時間延長，彌補了單一用藥的不足，對于骨科手術，特別是脊柱手術，既可達到骨科實驗手術的要求，也較為安全；兩種麻醉藥的先后使用，會產生協同作用，減少兩種藥物的單一使用量，速眠新II具有中樞神經性鎮痛、鎮靜和肌肉松弛的作用，而合用后戊巴比妥鈉劑量的減少，也有效地降低了它們的毒性作用和不良反應，誘導期縮短，麻醉維持時間延長，使藥物濃度基本保持在安全范圍內，降低了實驗動物的死亡率［1、2］。

由于我們研究的方向是創傷外科，特別是骨科方面的相關研究，往往制作的動物模型都需要進行骨科手術，手術的部位比較深，且復雜，故實驗動物的麻醉效果要求高，須做到肌肉松弛，肌張力少，無牽拉反應，無痛覺；同時，自主呼吸、心跳保持良好，麻醉平穩后，維持時間能使手術順利完成。

綜上所述，3組麻醉方法中，我們認為，復合組麻醉既能實現造模的要求，保證實驗質量，也符合實驗動物的倫理道德要求。麻醉效果好、安全，是骨科手術動物模型的較佳選擇。

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［5］李峰，段小紅，吳軍正.戊巴比妥鈉麻醉口腔實驗動物效果的分析［J］.貴陽中醫學院學報，2001，29，59-60.

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