文│伋兆法(安徽省和縣畜牧獸醫局)
安徽和縣肉鴨生產規模較大,據監測顯示:肉鴨禽流感(AI)血清抗體水平普遍低,多數循環抗體水平在保護線以下,保護力很低,免疫接種達不到預期的免疫效果。為此,我們對和縣櫻桃谷肉鴨禽流感母源抗體水平的消長規律進行了研究,為制定合理的免疫程序提供參考依據。
1.試驗材料。
(1)疫苗。重組禽流感病毒滅活疫苗(H5N1亞型,Re-1株)(250毫升/瓶,肇慶大華農生物藥品有限公司)。
(2)試驗動物。1日齡健康狀況良好的櫻桃谷雛鴨400只,自由飲水和采食,飼喂同一種飼料,試驗期間不注射疫苗、不使用藥物。
(3)檢測試劑。禽流感H5亞型標準抗原、陽性血清、陰性血清(中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所生產),由省動物疫病預防與監測中心免費提供。PBS緩沖液自配。
(4)紅細胞懸液。為減少非特異性凝集反應,采集了健康、未免疫禽流感鴨的血液,制備成鴨1%紅細胞懸液,用于抽樣鴨血清樣品的檢測。
(5)試驗器材。96孔V型微量反應板,微量加樣器等。

表1 不同日齡雛鴨母源平均抗體效價
2.試驗方法。
(1)采血。采用隨機抽樣方式,從1日齡開始每3天采一次血,每次采血32只,不重復采樣。
(2)血清學檢測。應用血凝(HA)和血凝抑制(HI)試驗進行抗體效價檢測,具體操作方法參考《高致病性禽流感診斷技術規范》(GB/T18936-2003)進行,抗體效價以log2表示。
(3)判斷標準。以完全抑制凝集的血清最大稀釋孔倍數為該血清的滴度,即血清效價HI效價≥4log2,判定為合格;HI效價<4log2,判定為不合格。
1.不同日齡雛鴨的母源抗體效價。不同日齡雛鴨母源抗體效價檢測結果見表1。從表1可見,雛鴨母源抗體水平最高值在1日齡,平均達到9log2,4、7、10、13日齡的母源抗體平均效價分別為8.4log2、5.9log2、3.6log2、2.4log2,說明在7~10日齡之前,母源抗體尚能達到保護值。但10日齡以后抗體效價已起不到保護作用。
2.不同日齡雛鴨個體間保護性母源抗體的比例。由表1可見,1、4、7、10日齡雛鴨個體間的HI抗體效價在(5.9~9)log2之間,說明所有個體的母源抗體都有效,其保護性抗體的比例達到100%;到10日齡時,50%的個體達到保護要求,從22日齡開始,雛鴨母源抗體的合格率為0%。31日齡雛雞母源抗體基本為0。
3.雛鴨的母源抗體消長規律。雛鴨的母源抗體消長變化見表1。隨著雛鴨日齡的不斷增大,母源抗體效價呈現逐漸下降的趨勢。
本試驗結果表明,雛鴨在31日齡前均能檢測到母源抗體,且在7~10日齡的HI效價在臨界點(4log2)之上,此時母源抗體能起到保護作用。但隨著日齡的增長,母源抗體有逐漸下降的趨勢,31日齡之后,雛鴨的母源抗體效價基本為0。因此,該縣櫻桃谷肉鴨雛鴨的母源抗體有效保護期應為7~10日齡。