血清HCV-RNA定量檢測可直接反映丙肝炎病毒水平,對預測和評價治療效果有重要作用。為了解丙肝肝組織中HCV-RNA含量變化,采用熒光定量聚合酶鏈反應檢測10例慢丙肝患者HCV-RNA含量進行了檢測。結果肝臟中HCV-RNA含量與血清病毒含量呈正比,慢性活動性肝炎HCV-RNA含量高于慢性遷延性肝炎。清中HCV-RNA含量可作為監測丙型肝炎病毒復制程度的一個指標。
資料與方法
研究對象為10例慢性丙肝患者,血清抗-HCV陽性。
HCV-RNA定量檢測:采用熒光定量PCR技術[1]。引物序列:在HCV-RNA的5′末端非編碼區內選擇內、外引物。將抽提RNA溶于DEPC溶液中,待溶解后即刻取上清液5μl進行逆轉錄反應合成cDNA,然后分別加入不對稱擴增引物和信號擴增引物等,進行熒光PCR檢測。建立標準曲線。PCR結束后,應用計算機軟件即可算出樣品中HCV-RNA的含量。每次實驗均設空白、陽性、陰性及峰值對照,每份標本取兩孔均值計算結果。
結 果
慢性丙肝患者血清中HCV-RNA的含量。
ALT與HCV-RNA含量的相互關系:治療ALT復常,血清HCV-RNA陰轉,ALT升高,血清HCV-RNA陽轉。
討 論
丙肝發病機制復雜,至今尚未完全闡明。HCV病毒主要在肝內復制,肝內HCV-RNA的含量可能與肝炎病情輕重有關[2]。本研究顯示,慢丙肝患者肝組織中HCV-RNA含量顯著高于血清中的含量,相關分析顯示血清與肝組織中HCV-RNA含量呈顯著正相關。因此,檢測肝組織HCV-RNA含量更能準確反映HCV在人體內的復制程度。
本研究發現慢性丙型肝炎血清HCV-RNA含量與ALT水平呈正相關,表明肝細胞損害程度與病毒血癥水平有關,因此,定量檢測血清和肝組織中HCV-RNA含量對認識丙肝的發病機制有重要意義,血清中HCV-RNA含量可作為監測肝內HCV-RNA復制程度的一個指標。
參考文獻
1 張復春,吳婉芬,董惠卿,等.定量聚合酶鏈反應檢測血清中HBV dNA及其臨床應用.中華傳染病雜志,1997,15:24-27.
2 Fong Tl,Shindo M,Feinstone SM,et al.Detection of replicative intermediates of hepatitis C.Viral RNA in liver and serum of patients with chronic hepatitis C.J Clin Invest,1991,88:1058-1060.