Bcl-2蛋白在乳腺癌中的表達及其臨床意義的研究

乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤，嚴重威脅女性健康。收集2003～2005年73例有完整隨訪資料的乳腺癌病例，應用免疫組化法檢測乳腺癌石蠟標本中Bcl-2的表達，研究其在乳腺癌生物學行為評估中的應用價值；為乳腺癌的基因靶向治療及預后評估提供依據。

資料與方法

2003～2005年收集乳腺癌標本73例，均為石蠟包埋組織塊；25例正常對照組標本來自乳腺癌患者乳房全切除后所切取的正常乳腺組織(癌旁5cm外切取，且經切片染色證實為正常乳腺組織)。

73例乳腺癌全部為女性患者(均有完整的隨訪資料)，年齡37～78歲，中位年齡56歲，其中年齡≤50歲27例，年齡＞50歲46例；2例為導管內癌，6例為浸潤性特殊型癌，65例為浸潤性非特殊型癌；腫瘤直徑≤2cm 24例，＞2cm 49例；淋巴結轉移29例，未轉移44例；臨床分期Ⅰ、Ⅱ期58例，Ⅲ期15例。

試驗方法：采用免疫組化SP法檢測乳腺癌組織中bcl-2的表達。Bcl-2(11640-1-AP)兔抗人多克隆抗體，PV9000二抗(抗兔)。DAB試劑盒，TBS緩沖液。

判定標準：胞質出現棕黃色顆粒為陽性，根據陽性染色所占百分比和染色強度采用半定量的積分方法判定結果，0分為陰性；2～3分為弱陽性；4～5分為陽性；6～7分為強陽性。

統計學處理：采用SPSS11.0統計軟件，應用X²檢驗或確切概率法比較組間差異，Spearman等級相關分析各參數間的相關性。

結 果

乳腺癌組織中bcl-2蛋白的表達情況及預后關系：Bcl-2蛋白陽性表達定位在乳腺癌細胞細胞漿和核膜，表現為胞漿細胞漿和核膜出現棕黃色顆粒沉淀。陽性率65.8%。淋巴結轉移與否及組織學分級不同的乳腺癌組織中，Bcl-2的表達差異具有統計學意義(P＜0.05)。淋巴結有轉移，Bcl-2表達高，組織學分級高Bcl-2表達高；ER、PR不同狀態間，Bcl-2表達差異具有統計學意義(P＜0.05)；而年齡，臨床分期，腫塊大小，HER-2，P53與Bcl-2表達無關。Bcl-2蛋白與淋巴結轉移顯著正相關(P＜0.05)，淋巴結轉移越多，Bcl-2蛋白表達越高；與組織學分級顯著正相關(P＜0.05)，組織學分級高，Bcl-2蛋白表達越高；與ER、PR蛋白表達顯著正相關(P＜0.05)，ER、PR蛋白表達高，Bcl-2蛋白表達越高。

討 論

近年來，國內外學者的研究，越來越多的分子生物學標志物被發現與乳腺癌的預后存在相關性，通過相關分子標志物的綜合分析，可以及時了解惡性程度、預測轉移、判定預后，最終通過合理治療達到滿意控制腫瘤的目的。

Bcl-2基因(即B細胞淋巴瘤/白血病-2基因)是一種原癌基因，它具有抑制凋亡的作用，目前已經發現的Bcl-2蛋白家族按功能可分為兩類，一類是象Bcl-2一樣具有抑制凋亡作用，而另一類具有促進凋亡作用，如Bax、Bcl-Xs、Bad、Bak、Bik/Nbk、Bid和Harakiri［1］。而主要的抗凋亡成員Bcl-2 和Bcl-xl主要定位于線粒體外膜、內質網膜和核膜等［2］。

Bcl-2表達于正常的乳腺導管上皮細胞，關于Bcl-2在乳腺癌中的表達研究頗多，目前存在兩種不同的觀點，從理論上講，Bcl-2蛋白抑制細胞凋亡，延長細胞生存周期。Bcl-2表達越強腫瘤惡性程度越高，其病理生物學特性越差。籍敏等研究表明，bcl-2的表達與腋淋巴結轉移、組織學分級、ER、PR的表達呈正相關；bcl-2的表達可能與腫瘤的進展有關，bcl-2是乳腺癌預后的重要生物學指標［3］。然而Hellemans等研究表明bcl-2蛋白與組織學分級呈負相關，bcl-2蛋白陽性表示癌細胞分化程度高，增殖能力和侵襲力弱；bcl-2蛋白是由雌激素調節的，bcl-2蛋白高表達與預后較好有密切關系，這可能與bcl-2蛋白多局限在擁有ER的乳腺癌細胞中，而ER陽性又是內分泌治療的必要條件，故認為bcl-2高表達的患者預后好可能是由于其對激素治療反應好所致［4］。

在本研究中，bcl-2在乳腺癌中，表達的陽性率高達65.8%，bcl-2與組織學分級及淋巴結轉移成正相關，與ER、PR的表達呈負相關，這也正是bcl-2在乳腺癌的發生中，起著促進腫瘤生長，抑制凋亡的重要作用，bcl-2陽性的乳腺癌患者預后不良。

參考文獻

1 Brown R.British Medical Bulletin，1996，53:466.

2 Murphy KM，Streips UN，Lock RB.Bcl-2 inhibits a Fas induced conformational change in the Bas N terminus and Bax mitochondrial translocation.J Biol Chem，2000，275(23):17225.

3 籍敏，王全紅.bcl-2在乳腺癌中的表達及意義.山西醫科大學學報，2007，38(4):337.

4 Abramenko IV，Filehenkov AA.Evaluation of apoptosis and diagnosis of cancer，prognosis and improvement of therapy.Vopr onkol，2003，49(1):21.