龔英峰
(唐山市灤縣人民醫院,063700)
電泳技術是根據蛋白質的物理特性對蛋白質進行分離的方法。將血清或其他體液放在特殊的載體中,根據其所帶電荷進行分離。根據蛋白質所帶電荷的多少和蛋白質分子的大小及形狀分離出不同的蛋白成分。血清蛋白電泳可以用于評價、診斷和檢測不同的疾病。傳統的電泳方法是以醋酸纖維素薄膜作為介質,但是由于醋酸纖維素薄膜雜質多,含有大量的纖維和金屬離子,造成電泳速度慢,分離不良,并有嚴重的電滲現象,而瓊脂糖凝膠則具有微細的多孔網狀結構,所以隨著電泳技術的不斷發展,瓊脂糖凝膠電泳已經逐步替代醋酸纖維素薄膜電泳并實現了自動化,且操作簡單;另外它的最大優點是幾乎不吸附蛋白質,因此電泳無拖尾現象,分離清晰、分辨率高,更適用于對大量標本的常規分析,易于在臨床實驗室普及,所以血清蛋白電泳技術已經在各個醫院普遍開展用于疾病的診斷和預后的判斷。我們利用法國Sebia公司生產的半自動瓊脂糖凝膠電泳儀對本地區65例腎病患者和75例健康人的血清蛋白電泳圖譜進行比較和分析,為臨床診治腎病提供一定的理論依據。
1.1 對象 選擇2011-01—05在我院住院確診為腎病的患者65例,年齡20~84歲,平均年齡(55.1±15.6)歲。選擇同期門診健康人(血常規、肝腎功正常,無黃疸,無高脂血癥)75例作為健康組,年齡27~83歲,平均年齡 (49.9±16.5)歲。
1.2 儀器和試劑 法國Sebia公司HYDRASYS半自動電泳儀、掃描儀和配套試劑盒。
1.3 方法 收集腎病患者及健康組空腹血液標本進行蛋白電泳分析:取10 μL血清加樣、電泳、干燥以及染色、脫色、干燥,最后取出凝膠板用掃描儀進行掃描定量。
1.4 統計學處理 采用SPSS 15.0軟件包進行統計處理。計量資料比較采用分組樣本資料t檢驗。
通過實驗研究我們發現腎病患者電泳圖譜中白蛋白百分比顯著低于健康組,差異有高度統計學意義(P<0.001);腎病患者α1、α2、β球蛋白百分比顯著高于健康組 (尤以α2球蛋白增高最顯著),差異有高度統計學意義(P<0.001);腎病患者γ球蛋白百分比與健康組比較差異無統計學意義(P>0.05,表1)。
表1 腎病患者與健康組血清蛋白電泳結果比較(±s)

表1 腎病患者與健康組血清蛋白電泳結果比較(±s)
組別 例數 ALB(%) α1(%) α2(%) β(%) γ(%)腎病患者 6550.2±9.63.7±0.818.2±6.914.6±3.413.3±5.5健康組 7564.4±3.12.6±0.39.1±1.210.3±1.313.6±1.7
腎病患者由于感染、病毒、血管病變、免疫損傷等原因而使腎小球和腎小管都有一定程度的損害,所以腎臟對蛋白質的通透性增高而重吸收能力下降,導致血清蛋白質的丟失,特別是小分子量的蛋白質(如白蛋白)[1],而α2球蛋白主要含有α2巨球蛋白[2],不易丟失,導致腎病患者電泳圖譜中α2球蛋白增高最顯著;α2球蛋白增高的另一個原因是由于低密度脂蛋白相對增加所致。α1球蛋白增加主要是為了補償由于白蛋白降低引起的低滲透壓,而使體內的α1糖蛋白增加所致,雖然α1糖蛋白也大量丟失于尿中,但體內合成量超過排泄量,故仍可增加。由于小分子量的轉鐵蛋白也排泄于尿中,所以慢性腎炎患者有時β球蛋白可降低。分子量較小的IgG在腎病時可大量丟失于尿中從而導致γ球蛋白可以降低,但是在慢性腎炎、狼瘡性腎炎時由于免疫刺激使IgG合成增加而致使γ球蛋白增加。
綜合以上資料,血清蛋白電泳在腎臟疾病的診斷及療效觀察方面有重要的意義。雖然現在我們可以采用生化或免疫方法單獨檢測多種不同的蛋白質,但是血清蛋白電泳仍然是我們了解人體內蛋白質全貌的最有價值的方法,可為多種疾病的診斷特別是腎臟疾病的診斷提供較全面的信息。相信隨著電泳技術的不斷發展其必將越來越受到同道們的青睞[3]。
[1]周新,涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗[M].3版.北京:人民衛生出版社,2004:272-273.
[2]葉應嫵,莫培生.新編臨床檢驗法:上冊[M].泰安:山東省出版總社泰安分社,1986:99.
[3]沈霞.電泳技術的現狀和發展[J].中華檢驗醫學雜志,2001,25(5):263-265.