急性冠脈綜合征患者外周血淋巴細胞亞群測定的臨床意義

黃鶴飛 陳愛民 劉春霞 錢安斌 俞子東 浙江省新昌縣人民醫院心內科 新昌 312500

急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是以冠狀動脈粥樣硬化斑塊不穩定、破裂并繼發血栓形成導致的臨床綜合征，包括不穩定心絞痛（unstable angina，UA）、非 ST 段抬高心肌梗死（NSTEMI）和 ST段抬高心肌梗死（STEMI）。最近研究表明，免疫機制在斑塊的破裂和血栓形成中發揮重要作用，淋巴細胞通過抗原-抗體反應以及細胞免疫等機制參與了動脈粥樣斑塊的形成、破裂和繼發血小板聚集等。筆者通過不同ACS類型之間以及與非冠心病患者的外周血淋巴細胞亞群進行比較，探討淋巴細胞在ACS中的作用，并評價淋巴細胞亞群改變對ACS預后的影響，現報道如下。

1 臨床資料

選取2010年1月—2011年5月在我院住院的急性冠脈綜合征患者30例，均符合WHO關于急性冠脈綜合征的診斷標準。30例中不穩定性心絞痛（UA）12例，男 8例，女 4例，平均年齡（70±6.6）歲；非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）8例，男4例，女4例，平均年齡（68±5.9）歲；ST段抬高心肌梗死（STEMI）10 例，男 8 例，女 2 例，平均年齡（69±7.1）歲。選擇同期因非冠心病入住我科的30例患者為對照組，其中男 20例，女 10例，平均年齡（68±5.1）歲。排除嚴重肝腎功能不全、合并有感染、心力衰竭、自身免疫性疾病、風濕活動、腫瘤性疾病、近期手術和創傷、腦卒中等疾病。

2 方 法

2.1 淋巴細胞亞群檢測方法 兩組患者均于住院次日空腹采集靜脈血2mL，6 h之內作染色處理，使用美國BD公司生產FACSCalibur流式細胞儀，報告CD3+、CD4+、CD8+、B 淋巴細胞 （CD19+）、NK 細胞占總T淋巴細胞的百分比、CD4+/CD8+比值。上述操作所用試劑均由美國BD公司生產。

2.2 HsCRP和cTnI檢測 采用定量酶聯免疫測定法，按照試劑使用說明書進行試劑的配制和操作。

2.3 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件包進行數據處理，計量資料以（±s）表示，兩組間比較用t檢驗，多樣本均數比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD及Dunnetts t檢驗，如果資料服從雙變量正態分布,采用直線相關分析,如果資料不服從雙變量正態分布,采用Spearman秩和相關分析。

3 結果

3.1 兩組T淋巴細胞亞群測定及血清cTnI、HsCRP濃度比較 ACS組患者外周血CD4+T細胞、CD4+/CD8+值、NK 細胞比例較對照組明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）；而CD8+T細胞、CD19+B淋巴細胞比例及cT－nI、HsCRP 濃度明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），見表1。

表1 兩組間淋巴細胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

表1 兩組間淋巴細胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

注：與對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.05

組 別ACS組對照組n/例30 30 CD3+/%54.1±2.9 55.7±3.5 CD4+/%26.7±3.3△△30.3±4.2 CD8+/%27.9±4.7△25.7±3.1 CD19+/%13.9±2.5△△10.7±2.0 NK/%16.9±3.6△18.7±2.3 CD4+/CD8+1.9±1.1△2.6±1.5 TnI/(ng/mL)10.6±4.9△△0 HsCRP/（mg/L）23.0±7.3△△2.6±1.5

3.2 ACS各亞組間淋巴細胞亞群及血清TnI、HsCRP濃度比較 NSTEMI及STEMI組患者外周血CD4+T細胞、CD4+/CD8+值、NK細胞比例較UA組明顯降低（P＜0.05）；而CD8+T細胞，CD19+B淋巴細胞比例及cTnI、HsCRP 濃度明顯升高（P＜0.05），見表2。

表2 急性冠脈綜合征各亞組間淋巴細胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

表2 急性冠脈綜合征各亞組間淋巴細胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

注：與 UA組比較，△P＜0.05；與 NSTEMI組比較，*P＜0.05

組 別UA組NSTEMI組STEMI組n/例12 8 10 CD3+/%55.2±4.8 54.8±5.9 55.6±5.6 CD4+/%30.0±4.1 23.5±3.9△18.8±2.2△*CD8+/%22.2±4.5 26.5±3.6△31.1±3.7△*CD19+/%9.7±3.1 14.0±3.4△18.2±5.2△*NK/%19.4±4.5 14.7±3.6△9.9±4.9*△CD4+/CD8+2.0±1.4 1.2±0.6△0.6±1.0*△TnI/(ng/mL)0 9.0±2.8△13.3±5.2△*HsCRP/（mg/L）1.8±1.2 12.9±4.5△26.8±6.7△*

3.3 血清TnI濃度與淋巴細胞亞群相關性分析TnI值與CD4+T細胞、CD4+/CD8+值比例負相關，與CD8+T細胞比例正相關，見表3。

表3 TnI與淋巴細胞亞群的相關性

4 討論

研究表明，炎癥和免疫機制在急性冠脈綜合征的發生、發展中發揮著重要作用，臨床研究發現，動脈粥樣硬化斑塊內淋巴細胞占有核細胞數的10%～20%[1]。人類淋巴細胞分為T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞，其中T淋巴細胞（CD3+）按照免疫表型主要分為兩群：T 輔助/誘導細胞（CD4+）和 T 抑制/細胞毒細胞（CD8+），通常情況下兩者相互影響制約使機體免疫處于平衡狀態，兩者比例失調可導致免疫功能紊亂。研究表明[2]，動脈粥樣硬化斑塊發展過程中，T淋巴細胞增強局部的免疫應答，促進巨噬細胞的吞噬作用，并分泌細胞因子及生長因子，同時促進血管中層平滑肌細胞的增生、遷移及吞噬。活化的CD4+T細胞產生大量的干擾素γ（INF-γ）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等促炎癥細胞因子,最終影響細胞外基質的代謝和內皮細胞的功能[3]。其中CD4+CD28-T細胞具有細胞毒作用，能夠在體內殺傷內皮細胞，也可通過表達腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TRAIL）與病變中表達CCR5的血管平滑肌細胞結合誘導血管平滑肌細胞凋亡[4]；而CD4+CD25+T細胞則可以抑制該類細胞活性，抑制動脈粥樣硬化的發生，斑塊越不穩定，其CD4+CD25+T細胞含量越低[5]。Terashima等[6]研究顯示，T淋巴細胞特別是CD8+細胞的激活可能與冠狀動脈痙攣的發生機制有關。并發現心肌梗死后隨著梗死面積的增大，CD8+被進一步激活，并可識別和殺死心肌細胞。本研究中，ACS組CD4+T細胞比例和CD4+/CD8+比值較對照組明顯降低（P＜0.01）。進一步亞組分析，STEMI組較NSTEMI和UAP組下降更明顯（P＜0.05），推測與CD4+CD25+T細胞含量低，CD8+被進一步激活有關。同時Dimitrijevic和Che研究發現，心肌梗死患者發病后血B淋巴細胞比例明顯高于對照組，并認為其原因為壞死的心肌組織釋放分離抗原，導致B淋巴細胞升高[7-8]。而Jonasson等[9]研究發現,穩定和不穩定的冠心病患者的外周血CD56dim NK細胞大大減少,并伴隨NK細胞功能損失，如 INF-γ、TNF-β、IL-10、IL-13 和 GM2-CSF 等相關的免疫調節功能受損,其發展及后果包括增加冠心病的危險,與冠心病關聯的炎癥可能會進一步降低NK細胞的功能[10]。本文結果與文獻相符，ACS癥狀越重，血B淋巴胞比例越高，而NK細胞比例越低。

已有大量研究證實，血清cTnI、HsCRP水平與ACS患者預后密切相關，Syrjala等[11]研究表明，急性心肌梗死患者CD4+/CD8+比值持續降低者多提示預后較差，故通過檢測CD4+/CD8+值可以評價心肌梗死患者預后。Randa S等[12]研究發現，急性心肌梗死患者血清cTnI水平與CD4+T細胞比例、CD4+/CD8+值顯著負相關，同時進一步研究發現，cTnI升高明顯者更易發生心房顫動、完全性左束支傳導阻滯、肺水腫和再梗死或者死亡。故筆者推測，CD4+T細胞比例、CD4+/CD8+值可以作為判斷心肌梗死患者預后的一個標志物。本組資料血清cTnI水平與CD4+T細胞比例、CD4+/CD8+值顯著負相關，與文獻報道相符，但由于未對ACS患者出院后進行有效隨訪，故尚不能說明CD4+T細胞比例、CD4+/CD8+值低者預后較差。

總之，免疫反應在急性冠脈綜合征的發生、發展中具有重要作用，進行有效的免疫干預治療能否成為冠心病的治療方法之一，仍需進一步大規模的臨床試驗證實和分析。

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