氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器法測(cè)定異氟烷的含量

褚素霞，宋更申，郭毅(河北省食品藥品檢驗(yàn)院，石家莊050011)

異氟烷(Isoflurane)是國(guó)內(nèi)、外臨床上廣泛使用的高效、安全、穩(wěn)定、低毒的吸入性全身麻醉劑[1]。現(xiàn)有文獻(xiàn)[2-4]報(bào)道中，均采用氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)測(cè)定異氟烷的含量，但由于所選用溶劑在FID檢測(cè)器上均有較強(qiáng)響應(yīng)，易對(duì)含量測(cè)定產(chǎn)生干擾。為此，筆者根據(jù)異氟烷分子結(jié)構(gòu)中含有電負(fù)性的氟原子，參考相關(guān)文獻(xiàn)[5，6]，采用氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器(GC-ECD)法測(cè)定異氟烷的含量，所選溶劑環(huán)己烷在ECD檢測(cè)器上無(wú)響應(yīng)，可有效避免溶劑對(duì)含量測(cè)定的干擾，同時(shí)靈敏度也有較大提高。

1 儀器與試藥

6890型氣相色譜儀、B.02.01-SR1工作站(美國(guó)Agilent公司)；BP 211 D型電子天平(德國(guó)Sartorius公司)。

異氟烷對(duì)照品(本院標(biāo)定，批號(hào):080011，含量:100.0%)；異氟烷(河北九派制藥有限公司，批號(hào):080308、080101、080102)；環(huán)己烷(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，色譜純)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:HP-INNOWax毛細(xì)管柱(60 m×0.53 mm，1 μm)；柱溫:75℃；檢測(cè)器:ECD檢測(cè)器；檢測(cè)器溫度:250℃；進(jìn)樣方式:分流進(jìn)樣，分流比1∶1；進(jìn)樣口溫度:150℃；載氣:氮?dú)猓涣魉?5 mL·min－1；進(jìn)樣量:1μL。

2.2 溶液的制備

對(duì)照品溶液:稱取異氟烷對(duì)照品約100 mg，精密稱定，置于100 mL量瓶中，加環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

供試品溶液:稱取樣品約100 mg，精密稱定，置于100 mL量瓶中，加環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

陰性對(duì)照溶液:取環(huán)己烷適量，作為陰性對(duì)照溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

精密量取“2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜，見(jiàn)圖1。

結(jié)果表明，理論板數(shù)以異氟烷峰計(jì)為18029，溶劑在此色譜條件下沒(méi)有吸收峰，不干擾異氟烷的測(cè)定。

2.4 線性關(guān)系考察

取異氟烷對(duì)照品適量，分別加環(huán)己烷溶解并稀釋制成每1 mL中含0.1002、0.2501、0.5006、1.008、1.201 mg的溶液，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣分析。以異氟烷濃度(mg·mL－1，C)為橫坐標(biāo)，異氟烷的峰面積為縱坐標(biāo)(A)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程A＝291008.18C+403.22(r＝0.9999)。結(jié)果表明，異氟烷檢測(cè)濃度在0.1002～1.201 mg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)為080308的樣品適量，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，另取異氟烷對(duì)照品適量，按“2.2”項(xiàng)下方法制備對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣分析，重復(fù)測(cè)定樣品6次。結(jié)果，平均含量為99.9%，RSD＝0.5%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.6 中間精密度試驗(yàn)

取批號(hào)為080308的樣品適量，由3名不同試驗(yàn)者在不同時(shí)間、以不同儀器、采用不同色譜柱測(cè)定其含量。結(jié)果，RSD＝0.3%，表明本方法中間精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取批號(hào)為080308的樣品適量，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h進(jìn)樣測(cè)定峰面積。結(jié)果，平均峰面積為29101.3，RSD＝0.5%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 檢測(cè)限和定量限試驗(yàn)

用逐步稀釋法進(jìn)行測(cè)定，以信噪比約為3時(shí)計(jì)算檢出限，以信噪比約為10時(shí)計(jì)算定量限。結(jié)果，本品檢測(cè)限為0.10 pg，定量限為0.33 pg。

2.9 回收率試驗(yàn)

精密稱取異氟烷對(duì)照品適量，分別置于100 mL量瓶中，用環(huán)己烷配制成測(cè)定濃度的80%、100%、120%的溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算回收率。結(jié)果，平均回收率為99.90%～100.00%，RSD＝0.10%(n＝9)，表明該方法回收率良好，詳見(jiàn)表1。

2.10 樣品含量測(cè)定

取3批樣品各適量，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，另取異氟烷對(duì)照品適量，按“2.2”項(xiàng)下方法制備對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，并按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算異氟烷的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n＝9)Tab 1Results of recovery tests(n＝9)

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果(n＝3)Tab 2 Results of content determination of sample(n＝3)

3 討論

3.1 色譜柱的選擇

HP-INNOWax是強(qiáng)極性毛細(xì)管柱，適用于酚、碳?xì)浠衔铩⑺幬锛按嫉龋容^適合用于殘留溶劑分析。在該研究條件下異氟烷與溶解介質(zhì)可達(dá)到有效分離，且峰形好，靈敏度高，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

3.2 溶劑的選擇

本試驗(yàn)采用環(huán)己烷作溶劑，環(huán)己烷在ECD檢測(cè)器上無(wú)響應(yīng)，可有效避免溶劑及溶劑中的雜質(zhì)對(duì)含量測(cè)定的干擾。

3.3 檢測(cè)器的選擇

由于異氟烷中含有氟原子，采用ECD檢測(cè)器測(cè)定含量，較文獻(xiàn)[2-4]采用的FID檢測(cè)器靈敏度有較大提高，可有效降低進(jìn)樣量，提高分離度，避免超載。該方法也適合于測(cè)定異氟烷的有關(guān)物質(zhì)。

3.4 該方法具有的優(yōu)勢(shì)

異氟烷在本文建立的色譜條件下保留時(shí)間只有3 min，大大節(jié)約了分析時(shí)間，同時(shí)也降低了分析成本。

[1]宋更申，張毅，姜建國(guó)，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定異氟烷中的有機(jī)溶劑殘留量[J].中國(guó)藥房，2010，21(17):1595.

[2]李寶林.氣相色譜法測(cè)定異氟烷含量[J].色譜，1994，12(6):453.

[3]劉明潔，胡德福，錢(qián)利民，等.氣相色譜法測(cè)定異氟烷的含量[J].藥物分析雜志，1998，18(3):196.

[4]張勇，錢(qián)廣生，劉三康，等.大口徑毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定異氟烷注射液含量及有關(guān)物質(zhì)[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2006，37(1):153.

[5]宋更申，郭毅，付焱，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定鹽酸美金剛原料藥中三氯甲烷的殘留量[J].中國(guó)藥房，2010，21(37):3536.

[6]宋更申，姜建國(guó)，劉紅莉，等.頂空氣相色譜法測(cè)定美羅培南中有機(jī)溶劑的殘留量[J].中國(guó)藥房，2010，21(5):447.