小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血清一氧化氮一氧化氮合酶丙二醛超氧化物歧化酶的影響

姜 勝，于世明，譚麗娟，范宏剛，王洪斌

（東北農業大學動物醫學學院，黑龍江 哈爾濱 150030）

經過前期研究課題組開發出小型豬復合麻醉劑（XFM）［1］，近期課題組又開發出了以阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等為主要成分的小型豬特異性麻醉頡頏劑，保障XFM的安全性及可控性。本試驗通過檢測小型豬血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）濃度的變化，判斷小型豬特異性麻醉頡頏劑對機體的氧化損傷程度，進而評價小型豬特異性麻醉頡頏劑對XFM的特異性頡頏效果，以及小型豬復合麻醉頡頏劑組方的合理性及臨床安全性。

具有高度活性的氧自由基分子不僅能造成蛋白質、DNA損傷，誘發癌癥和囊性纖維化［2-3］，還能誘導脂質過氧化反應，使多不飽和脂類發生裂解，膜結構發生破壞，導致細胞功能障礙［4］，并產生能夠反映脂質過氧化的程度，且被認為是檢測組織過氧化的生物學指標的 MDA［2，5］。不穩定自由基 NO，與正超氧陰離子（O-2）作用時可形成過氧化亞硝基陰離子（ONOO-），并進而分解為毒性極強的羥自由基（OH-）和 NO-2自由基［6］，在體內引起多方面的損害如脂質過氧化［7］。SOD是機體抗脂質過氧化酶促防御系統中的一個重要酶，它不僅能有效清除生物氧化產生的超氧陽離子自由基，并有終止自由基鏈鎖反應的作用［8］，還能減少 ONOO-形成［9］，故可減輕NO的不利作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 中國實驗用小型豬14頭，16～18月齡，體重49.8±5.2kg，購于中國農業大學實驗用小型豬繁育基地，臨床檢查健康，營養狀況良好。

1.2 試驗材料 XFM（東北農業大學外科教研室，批號：20100821）；小型豬特異性麻醉頡頏劑（東北農業大學外科教研室，批號：20100824）。NOS、NO及考馬斯亮藍蛋白含量測定試劑盒，購自南京建成生物工程研究所；AvantiTM30Centrifuge高速冷凍離心機、7230分光光度計等。

1.3 試驗方法 14頭小型豬禁食12h，隨機分為實驗組和對照組，每組7頭。兩組動物麻醉之前均采前腔靜脈空白血（記為0min），采血完成后立即注射XFM并計時。至30 min時，采前腔靜脈血（記為30min），此后試驗組立即注射小型豬特異性麻醉頡頏劑，對照組則注射等量生理鹽水。至1、2、8h和1、3、7d時分別進行前腔靜脈采血，并記錄各項生理反射指標的恢復時間，直至兩組動物均能行走為止。采集的血樣室溫靜置1h，3000r／min離心分離血清，置于-80℃冰箱內冷凍保存，待檢。

2 試驗結果

2.1 蘇醒時間 如表1所示，在注射頡頏劑后，試驗組內各生物反射指標的恢復時間比對照組短且差異顯著（P＜0.05）。

2.2 抗氧化能力測定結果 具體結果見表2。注射麻醉劑后，小型豬血清MDA及SOD呈現無規則變化，且變化趨勢不明顯（P＞0.05），血清NOS及NO在注射XFM 30min后極明顯降低（P＜0.01），然后逐漸回升，60min后恢復正常。小型豬在注射XFM頡頏劑后與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表1 兩組蘇醒時間比較（n＝7）

表2 抗氧化能力監測結果（n＝7）

3 討論

從蘇醒時間看，本試驗表明，注射頡頏劑后，小型豬生理反射恢復的時間短，蘇醒效果明顯，能夠達到較快蘇醒的目的。

許多麻醉藥物的效應和毒性均可抑制酶的活性，促使氧自由基、脂質過氧化物（Lipid peroxide，LPO）、MDA 等體液因子的釋放增加［10］，因此需要拮抗劑抑制麻醉藥的中樞抑制作用，控制麻醉時間和濃度，逆轉麻醉藥的不良作用和對機體的損傷。從抗氧化結果看，小型豬血清SOD、MDA指標變化均無明顯趨勢，這說明小型豬特異性麻醉頡頏劑沒有產生明顯的過氧化損傷，分析原因可能與納洛酮有一定關系：國外一些研究顯示，納洛酮在細胞水平具有抗休克作用，主要是因為其具有穩定溶酶體膜，明顯抑制嗜中性粒細胞釋放O-2的能力［11］，并且體外試驗發現，納洛酮能抑制脂質過氧化反應的速率，尤其是可能在鐵離子催化的脂質過氧化反應中充當抗氧化劑［12］。小型豬血清NO及NOS在麻醉后30 min顯著降低，然后逐漸回升，從這一過程中來看與徐瑞芬等［13］報道的全麻能明顯抑制NOS的活性，降低NO的生成這一結果一致。由此分析，催醒過程中阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等特異性拮抗劑［14］與XFM競爭同一受體，從而拮抗麻醉劑的藥理作用，并沒有引起機體產生大量自由基，對小型豬的抗氧化能力沒有明顯影響。

4 結語

綜合試驗結果表明，小型豬特異性麻醉頡頏劑能夠很好的拮抗XFM麻醉效果，產生較快的蘇醒效果，在催醒過程中對小型豬沒有產生明顯的過氧化損傷，臨床安全性較好。

［1］范宏剛，王洪斌，盧德章，等.復合麻醉劑（XFM）對小型豬效果觀察［J］.中國獸醫雜志，2009，45（11）：63-65.

［2］Isaksson C，Sturve J，Almroth B C，et al.The impact of urban environment on oxidative damage（TBARS）and antioxidant systems in lungs and liver of great tits，Parus major［J］.Enviromental Research，2009（109）：46-50.

［3］Trachootham D，Lu W，Ogasaawara M A，et al.Redox regulation of cell survival［J］.Antioxid Redox Signal，2008，10（8）：1343-1374.

［4］Puntel R L，Roos D H，Paixao M W，et al.Oxalate modulates thiobarbituric acid reactive species（TBARS）production in supernatants of homogenates from rat brain，liver and kidney：Effect of diphenyl diselenide and diphenyl ditelluride［J］.Chem Biol Interact，2007，165（2）：87-98.

［5］羅剛，張倩，趙蕓慧，等.丙泊酚和異氟醚對腦腫瘤患者圍手術期血清 NO、NOS、MDA 的影響［J］.臨床麻醉學雜志，2005，21（6）：371-373.

［6］Anggand E.Nitric oxide：mediator，murderer，and medicine［J］.Lancet，1994，343（8907）：1199-1206.

［7］Okada M，Sagawa T，Tominage A，et al.Tw0mechanisms for platelet-mediated killing of tumour cells：one cyclo-oxygenase depenent and the other nitric oxide dependent［J］.Immunology，1996（89）：158-164.

［8］許曉路，章子貴，申秀英.氟中毒對小鼠學習記憶行為及腦內SOD活性和 MDA含量的影響［J］.中國公共衛生，2001，17（1）：8-10.

［9］Dawson V L，Dawson T M，Bartley D A，et al.Mechanism of nitric oxide-mediated neurotoxity in primary brain cultures［J］.J Neurosci，1993，13（6）：2651-2659.

［10］馮春生，楊希革，黃 興，等.異丙酚與安氟醚或七氟醚靜吸復合麻醉對氧自由基的影響［J］.吉林大學學報，2002，28（6）：623-626.

［11］Simpkins C O，Ives N，Tate E，et al.Naloxone inhibits superoxide release from human neutrophils［J］.Life Sci，1985，37（15）：1381-1386.

［12］Koreh K，Seligma M L，Flamm E S，et al.Lipid antioxidant properties of naloxone in vitro［J］.Biocem Biophys Res Commun，1981，102（4）：1317-1322.

［13］徐瑞芬，徐禮鮮，盧玲玲，等.比較局麻與全麻對病人血清NOS及 NO濃度的影響［J］.臨床麻醉學雜志，2003，19（2）：74-75.

［14］馬福德，王洪斌.特異性動物麻醉拮抗劑研究進展［J］.現代畜牧獸醫，2006，3：49-51.