癌性貧血患者血清Hepcidin及炎癥介質因子LPS和IL-6表達及其意義

潘湘濤，陸 曄，程 旭，王金湖，李 蓉，嚴 敏

（蘇州大學附屬太倉醫院 血液科，江蘇 蘇州 215400）

癌性貧血患者血清Hepcidin及炎癥介質因子LPS和IL-6表達及其意義

潘湘濤＊，陸 曄，程 旭，王金湖，李 蓉，嚴 敏

（蘇州大學附屬太倉醫院 血液科，江蘇 蘇州 215400）

目的 研究Hepcidin在癌性貧血發生中的意義及其與炎癥介質因子細菌脂多糖（LPS）和白細胞介素－6（IL-6）之間的關系。方法應用雙抗夾心生物素－親和素－酶聯免疫吸附試驗（ABC-ELISA）方法檢測50例癌性貧血患者和140例無貧血癌癥患者的血清Hepcidin和LPS和IL-6，并分析Hepcidin與貧血、與IL-6以及LPS之間的相關關系。結果①癌性貧血患者血清Hepcidin為51.99±32.56μg／L明顯高于無貧血患者的36.63±31.99μg／L（P＜0.01）。②癌性貧血患者血清LPS和IL-6分別為75.33±62.63μg／L和39.36±82.60ng／L，均高于無貧血患者的63.43±38.76μg／L和10.38±22.00ng／L（均為P＜0.05）。③癌性貧血患者的 Hepcidin與LPS呈明顯的正相關關系（r＝0.397，t＝2.996，P＜0.01）；Hepcidin與IL-6也呈正相關關系（r＝0.302，t＝2.201，P＜0.05）。④癌性貧血患者的Hepcidin、LPS和IL-6三者均與血紅蛋白無相關關系。結論癌性貧血患者高表達Hepcidin、LPS和IL-6，Hepcidin與LPS和IL-6均呈正相關關系；它們在癌性貧血的發生發展過程中起重要的作用。

Hepcidin；脂多糖；白介素－6；癌癥；貧血

（ChinJLabDiagn，2012，16：0055）

Hepcidin（鐵調素，又稱肝抗菌多肽）在慢性病貧血中的作用近來已受到廣泛重視，本文應用雙抗夾心生物素－親和素－酶聯免疫吸附試驗（ABCELISA）方法檢測癌性貧血患者的血清Hepcidin和炎癥介質因子細菌脂多糖（LPS）和白細胞介素－6（IL-6），以探討Hepcidin在癌性貧血發生中的意義及其與炎癥介質因子LPS和IL-6之間的關系。

1 對象與方法

1.1 對象2009年6月－2010年5月在我院住院癌癥患者190例。男96例、女94例，年齡29－82歲、平均59.2歲。疾病種類為結直腸癌54例，乳腺癌45例，胃癌40例，肺癌16例，淋巴瘤14例，食道癌5例，子宮內膜癌4例，胰腺癌3啦，腹膜間皮瘤、卵巢癌和宮頸癌各2例，上腭癌、肝癌和膽管癌各1例。

1.2 分組方法以Hb值男性＜120.0g／L和女性＜110.0g／L作為貧血的診斷標準。將50例貧血患者列為觀察組，將其余140例無貧血的患者作為對照組。

1.3 方法Hepcidin試劑盒購自美國DRG International Inc.USA.，LPS和IL-6試劑盒為R＆D公司生產。清晨抽血被檢者分置于試管中，其中Hb測定應用常規方法即時檢測，而其余血清則超低溫冰箱保存，對190例患者血清標本同時應用ABCELISA方法檢測Hepcidin、LPS和IL-6。

1.4 統計學處理應用SPSS13.0版軟件包進行統計學分析，分別采用t檢驗和Spearman等級相關法。以P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清Hepcidin、LPS和IL-6測定結果

各組血清Hepcidin、LPS和IL-6測定結果見表1，其中觀察組的Hepcidin、LPS和IL-6均明顯高于對照組（P＜0.05）。

表1 各組血清Hepcidin、LPS和IL-6測定結果

2.2 相關分析分別對觀察組的Hb值與Hepcidin、LPS和IL-6三者之間進行相關分析，以及對Hepcidin與LPS和IL-6兩者之間進行相關分析。結果貧血患者的Hepcidin與LPS和IL-6均有相關關系（Hepcidin與 LPS為r＝0.397，t＝2.9962，P＜0.01；Hepcidin與IL-6為r＝0.302，t＝2.2012，P＜0.05）；而貧血患者的 Hb值與 Hepcidin、LPS和IL-6均無相關關系（均為P＞0.05）。

3 討論

國外大量的研究資料表明許多炎癥介質因子參與了Hepcidin的表達以及調節鐵代謝的過程，炎癥介質因子和Hepcidin共同參與了慢性病貧血的發生和發展［1］。Sasu等［2］認為 Hepcidin濃度與癌性貧血患者的炎癥標志物相關，是炎癥性貧血的診斷和判斷治療療效的有效指標，是一個鐵轉運的負性調節劑［3］。本研究則著重于Hepcidin及其炎癥介質因子LPS和IL-6在惡性腫瘤所引起的慢性病貧血中的表達特點及其臨床意義。

我們的結果表明癌性貧血患者的血清Hepcidin、LPS和IL-6均明顯高于無貧血的患者，與文獻結果基本一致，如Butterfield等［4］應用ELISA檢測34例癌癥患者發現Hepcidin明顯高于正常人，Hohaus等［5］報道Hepcidin在霍奇金淋巴瘤患者中明顯升高，與IL-6顯著正相關（P＜0.001），Ganz等［6］報道Hepcidin在炎癥、多發性骨髓瘤和慢性腎性疾病中是明顯升高的，并與鐵蛋白呈正相關。我們進一步的研究發現Hepcidin與LPS和IL-6均呈正相關關系，也與文獻報道相一致，如Hohaus等［5］報道霍奇金淋巴瘤患者中Hepcidin表達與IL-6呈顯著的正相關（P＜0.001），Igor等［7］則發現37例慢性病貧血中Hepcidin和IL-6與對照組和缺鐵性貧血比較均明顯增高，并且Hepcidin是由LPS和IL-6所介導的，支持Kanda等［8］提出的在炎癥狀態下，貧血由IL-6介導的Hepcidin過度增多所引起的觀點。Kemna等［7］的研究表明Hepcidin是由LPS和IL-6所介導，LPS注射給人體后導致IL-6的升高，之后在3～4小時 Hepcidin分泌達到高峰，Lee等［10］則通過體外細胞培養也證明了LPS誘導生成的IL-6上調Hepcidin基因表達。

我們還發現Hb值與Hepcidin、LPS和IL-6三者之間均無相關關系，這與Jacober等［11］報道的Hepcidin與貧血的程度和鐵參數沒有相關關系的結果相一致，但與 Hohaus等［5］報道的Hepcidin在貧血患者中與Hb呈負相關，而與血清鐵蛋白呈正相關的結果不一致，這可能與所選擇的研究對象不完全一致有關，與病例數多少也有一定關系。

慢性病貧血的原因很多，諸如失血、營養不良、溶血、促紅細胞生成素生成減少或相對分泌不足和紅系祖細胞對其反應降低等等，但鐵代謝的異常也是一個重要的因素。從我們的研究結果和國外文獻資料來看，癌癥患者的LPS異常增高導致了IL－6的分泌增多，繼而誘導Hepcidin的增多。而Hepcidin的異常增多引起鐵代謝的異常變化，無論是通過內分泌機制還是通過體循環，都是將鐵留在儲鐵細胞中并阻止腸道鐵的吸收，因而血清鐵降低、轉鐵蛋白和轉鐵蛋白飽和度降低，造成鐵對紅系生成的限制，進而網狀內皮系統鐵的增加和血清鐵蛋白的增多。一系列的鐵代謝改變引起機體鐵的失利用，因而導致發生貧血。

［1］Grotto HZ.Anema of cancer：an overview of mechanisms involed in its pathogenesis［J］.Med Oncol，2008，25（1）：12.

［2］Sasu BJ，Li H，Rose MJ，et al.Serum hepcidin but not prohepcidin may be an effective maker for anemia of inflammation（AI）［J］.Blood Cell Mol Dis，2010，45（3）：238.

［3］Guidi GC，Lechi S.Advancements in anemias related to chronic condition［J］.Clin Chem Lab Med，2010，48（9）：1217.

［4］Butterfield AM，Luan P，Witcher DR，et al.A Dual-monoclonal sandwich ELISA specific for hepcidin-25［J］.Clin Chem，2010，56（11）：1125.

［5］Hohaus S，Massini G，Giachelia M，et al.Anemia in Hodgkin’s lymphoma：the role of interleukin-6and hepcidin［J］.J Clin Oncol，2010，28（15）：2538.

［6］Ganz T，Olbina G，Girelli D，et al.Immunoassay for human serum hepcidin［J］.Blood，2008，112（10）：4292.

［7］Igor Theurl，Veren M，Markus S，t al.Dysregulaed monocyte iron homeostasis and erythropoietin formation in patients ith anemia of chronic disease［J］.Blood，2006；107（10）：4142.

［8］Kanda J，Uchiyama T，Tomosugi N，et al.Oncostatin M and leukemia inhibitory factor increase hepcidin expressin in hepatoma cell lines［J］.Int J Hematol，2009，90（5）：545.

［9］Kemna E，Pickkers P，Nemeh E，et al.Time-course analysis of hepcidin，serum iron，and plasma cytokine levels in muman injected with LPS［J］.Blood，2005，106（5）：1864.

［10］Lee P，peng H，Gelbart T，et al.The Il-6and lipopolysacchaide induced transcription of hepcidin in HFE，transferring receotor 2 and beta-2-microglobulin-deficient heptocytes［J］.PNAS，2004，101：9263.

［11］Jacober ML，Mamomi RL，Lima CS，et al.Anaemia in patients with cancer：role of inflammatory activity on iron metabolism and severity of anaemia［J］.Med Oncol，2007，24（3）：232.

Expression and significance of Hepcidin，LPS and IL-6in the patients with cancer-related anemia

PANXiang-tao，LU Ye，CHENGXu，etal.（TaicangHospitalofSuzhouUniversity，Suzhou215400，China）

ObjectiveTo study the expression and significance of Hepcidin，LPS and IL-6in patients with cancer-related anemia.MethodsTo test the serum levels of Hepcidin，LPS and IL-6in 190cases，including 50cases with cancerrelated anemia and 140cases of non-anemia with tumor by ABC-ELISA.Results①The serum levels of Hepcidin in patients with cancer-related anemia were higher than control group（51.99±32.56μg／L vs 36.63±31.99μg／L，P＜0.01）.②The serum levels of LPS和IL-6in patients with cancer-related anemia were 75.33±62.63ug／L and 39.36±82.60ng／L respectively，which were all higher than in cases of non-anemia with tumor respectively（63.43±38.76μg／L and 10.38±22.00ng／L respectively，P＜0.05）。③In patients with cancer-related anemia，there were positive correlation both Hepcidin and LPS （r＝0.397，t＝2.996，P＜0.01），and were positive correlation both Hepcidin and IL-6（r＝0.302，t＝2.201，P＜0.05）.④In patients with cancer-related anemia，there were no correlation between Hemoglobin and Hepcidin，LPS，and IL-6respectively.ConclusionThe expression of Hepcidin，LPS and IL-6in patients with cancer-related anemia，and there were positive correlation both Hepcidin and LPS （r＝0.397，t＝2.996，P＜0.01），and there were positive correlation among Hepcidin，LPS and IL-6）.They may be one of factors contributed the cancer-related anemia in patients with tumor.

cancer-related anemia；Hepcidin；LPS；interlukin-6（IL-6）

1007－4287（2012）01－0055－03

蘇州市2009年科技發展項目（SZD0951）

＊通訊作者

R730.4

A

2011－02－17）