惡性腫瘤患者化療前后免疫學指標的變化及臨床應(yīng)用探討

黃晶

惡性腫瘤患者常伴有機體免疫功能異常，在抗腫瘤免疫效應(yīng)中細胞免疫比體液免疫起更為重要的作用。為了解惡性腫瘤患者的細胞免疫功能及化療藥對惡性腫瘤患者免疫功能的影響，筆者采用流式細胞儀對100例惡性腫瘤患者化療前后的T淋巴細胞亞群進行檢測和分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 100例患者均為經(jīng)病理學或細胞學確診為惡性腫瘤，男63例，女37例，年齡21～79歲，平均53歲。其中惡性淋巴瘤19例，肺癌35例，乳腺癌25例，腸癌13例，胃癌8例。對照組選擇本院職工、健康體檢者，共60例，男25例，女35例，年齡19 ～76歲，平均52.3歲。

1.2 治療方法 所有患者治療前血常規(guī)、肝腎功能、心電圖均正常，均無免疫系統(tǒng)疾病，在接受本次治療前1個月未接受化療、放療及使用其他影響免疫功能的藥物。依據(jù)腫瘤不同類型接受不同的化療方案。藥物主要有表阿霉素、5－氟尿嘧啶、長春新堿、順鉑、紫杉類等，化療前后做CT或MRI判定療效。

1.3 檢測方法 化療開始前1周及化療2周期結(jié)束后1周分別檢測患者外周血 T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)，B淋巴細胞(CD19+)及 NK細胞(CD3－/CD16+56+)。

所有患者均于清晨抽空腹血1.5 ml，EDTA－2K抗凝，用型號為FACSCalibur(美國BD公司生產(chǎn))流式細胞儀測定，試劑均采用美國BD公司產(chǎn)品，包括熒光標記單克隆抗體試劑盒，溶血素(FACSLying)等。嚴格按照說明書處理標本，通過四色熒光微球校準流式細胞儀后，用MultiSET軟件獲取并分析。

1.4 統(tǒng)計學處理 用PEMS 3.1統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，計量資料采用均數(shù)和標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

惡性腫瘤患者化療前CD3+、CD4+、CD8+均顯著低于對照組。CD4+/CD8+較對照組高，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，B細胞高于對照組，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。化療后CD3+、CD4+細胞升高，CD4+/CD8+比值增高，與治療前比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);CD8+表達治療前后差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);CD3－/CD16+56+表達較化療前降低，較對照組亦降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);CD19+表達治療前后差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組化療前后免疫指標檢測結(jié)果(x ± s，%)

3 討論

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤的消退與機體自身的免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)，T淋巴細胞在抗腫瘤免疫中引起到了重要作用［1］。T淋巴細胞由不同的亞群組成，不同亞群的T細胞具有不同的白細胞分化抗原(cluster of differentiation CD)，其細胞表面不同的白細胞分化抗原是反映其功能的重要標志，并隨著疾病的轉(zhuǎn)歸發(fā)生變化［2］。體液免疫通常僅在某些情況下起協(xié)同作用。近年來，隨著免疫學的深入研究，腫瘤與免疫的關(guān)系越來越引起臨床重視。檢測T淋巴細胞亞群及NK細胞活性是臨床觀察機體細胞免疫功能的重要方法之一。在外周血中，CD3抗原分子通常分布在成熟T細胞表面，故CD3+T細胞數(shù)量可代表機體總T細胞數(shù)量，CD4+T細胞通常代表T輔助細胞，CD8+T細胞通常代表具有抑制作用的抑制細胞，CD4+/CD8+比值反映了機體免疫功能狀態(tài)是否穩(wěn)定，只有兩者在適當?shù)谋壤拍馨l(fā)揮正常的抗腫瘤作用［3，4］。CD4+/CD8+比例降低說明細胞免疫功能降低，機體存在免疫抑制和免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。惡性腫瘤多存在不同程度的免疫功能低下。國外學者研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤患者免疫功能的下降與腫瘤細胞分泌的免疫抑制因子(TDSF)有關(guān)，TDSF可廣泛抑制NK等免疫細胞的活性，是惡性腫瘤患者免疫功能障礙的主要原因之一［5］。

化療是腫瘤治療的主要手段之一。化療藥物均為細胞毒性藥物，它不僅殺傷腫瘤細胞，對人體正常增殖和分化細胞也有殺傷作用，能夠?qū)е铝馨图毎麥p少。因此，以往人們認為腫瘤患者在化療的同時機體的免疫功能進一步降低［6］。

本組結(jié)果顯示，惡性腫瘤患者CD3+、CD4+、CD8+低于對照組，CD4+/CD8+也高于對照組，說明腫瘤患者的細胞免疫處于抑制狀態(tài)。CD4+/CD8+比值的高低，可提示惡性腫瘤患者預(yù)后的好壞，化療藥物有效與對照組結(jié)果相一致。化療后CD3+、CD4+均明顯增高，可見化療可以提高腫瘤患者的細胞免疫功能，但比值＞2.0，仍然提示化療可致免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。

NK細胞具有非特異地直接殺傷靶細胞的功能，是抗腫瘤免疫的第一道防線［7］。本組化療后NK細胞繼續(xù)減少，NK細胞顯著低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，可能與化療后檢測時間較早，骨髓抑制尚未完全恢復(fù)有關(guān)。B細胞參與體液免疫，本組腫瘤患者B細胞的表達差異無統(tǒng)計學意義，說明化療可能對患者的體液免疫功能無明顯影響。

綜上所述，腫瘤患者免疫功能低下，以細胞免疫損害為主，有效的化療可使免疫功能得到一定程度的改善，但免疫調(diào)節(jié)紊亂尚不能得到糾正。這可能會改變以往認為化療可使免疫功能完全損害的觀點。

［1］楊鎮(zhèn)．腫瘤免疫學［M］．武漢:湖北科學技術(shù)出版社，1998:31－36．

［2］劉莉，丁乾，曹如波，等．惡性腫瘤患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)T細胞的檢測及其臨床意義［J］．臨床腫瘤學雜志，2005，10(4):342．

［3］付尚志．腫瘤的免疫功能研究現(xiàn)狀［J］．臨床軍醫(yī)雜志，2002，30(5):95．

［4］Yasutomo K．The cellular and molecular mechanism of CD4+/CD8+Lineage commitmeht［J］．J Med Invest，2002，49(1 ～2):1．

［5］Illing R O，Kennedy J E，Wu F．The safety and feasibility of extracorporeal high－imtensity focused ultrasound(HIFU)for the treatment of liver and kidney tumours in a western population［J］．Br J cancer，2005，17:890．

［6］黎建軍，徐國良，羅廣裕，等．高強度聚焦超聲治療肝左葉癌的臨床研究［J］．中國超聲醫(yī)學雜志，2006，22;156．

［7］孫燕．內(nèi)科腫瘤學［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，2001:134－137．