長春西汀片溶出度測定方法的研究

黃文姝，李久旭，孟 莉，趙 娟，王 虹

長春西汀是吲哚類生物堿藥物，廣泛用于缺血性腦血管疾病的治療［1］。長春西汀片目前所執行的質量標準仍為暫行部頒標準［WS-11(X-08)-93］，隨著制藥行業的發展，其所執行的部頒標準已不能完全體現并控制產品的質量。溶出度檢查項是口服固體制劑的必檢項目，部頒標準中該檢查項采用中國藥典溶出度檢查第一法，每籃中投入2片供試品，溶出液經0.3 μm濾膜過濾后，采用分光光度法進行測定。測定時每籃投入2片樣品的原因是為了滿足分光光度法測定濃度的需要。該方式反映的是2片的平均溶出情況，不能體現出一個制劑單位的溶出行為，顯然不符合溶出度檢查項的目的和要求，因此需要改進。本文在原標準基礎上，對其溶出度方法進行改進，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 日立L-2000高效液相色譜儀，ZRS-8G型藥物溶出儀，PE Lambda35紫外-可見分光光度計，賽多利斯天平型號 MSU125P-100-DU及CPA2P，色譜柱為 C18柱(4.6mm ×250 mm，5 μm)。

1.2 試藥 長春西汀對照品(東北制藥集團股份有限公司，純度99.7%)，長春胺乙酯對照品(東北制藥集團股份有限公司，純度98.1%)，阿樸長春胺對照品(東北制藥集團股份有限公司，純度97.3%)，長春西汀片(A廠家，批號分別為0909101、0911102、100101)，長春西汀片(B 廠家，批號為090502);乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶出條件的選擇

2.1.1 溶出度試驗條件的選擇 參照本品原部頒標準中的溶出度試驗條件，采用溶出度測定第一法(中國藥典2010年版二部附錄XC)，以稀鹽酸12 mL，加水至500 mL為溶劑(即0.067 mol/L鹽酸)，轉速為100 r/min。

2.1.2 測定方法的選擇 長春西汀片在224、270及314 nm波長處有最大吸收，見圖1?？紤]與本品含量測定項的一致性，采用280 nm作為測定波長。本品中含有VC等輔料，如采用分光光度法，在225、270 nm波長處對主成分的測定均有較大干擾，見圖2。在314 nm波長處雖然輔料沒有干擾，但溶出液吸光度值＜0.3，不適于定量測定，考慮以上因素，采用HPLC法進行本品溶出度測定。

圖1 長春西汀紫外光譜圖

圖2 長春西汀片輔料紫外光譜圖

2.2 色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;0.2 mol/L醋酸銨溶液-乙腈(30∶70)為流動相，檢測波長為280 nm。分別稱取長春胺乙酯、阿樸長春胺和長春西汀對照品適量，置同一量瓶中，加0.067 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1 mL中均含10 μg的溶液，作為系統適用性試驗溶液，取50 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，長春胺乙酯、阿樸長春胺與長春西汀之間的分離度均應符合要求。理論板數按長春西汀峰計算不低于3 000，見圖3。

圖3 長春西汀片溶出度測定系統適用性圖譜

2.3 溶出度測定方法 取本品，照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄XC第一法)，以稀鹽酸 12 mL，加水至 500 mL為溶劑，轉速為100 r/min，依法操作，經30 min時，取溶液適量，濾過，精密量取續濾液適量，作為供試品溶液，進樣50 μL;另精密稱取長春西汀對照品適量，用溶出介質溶解并稀釋制成每1 mL中約含10 μg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，計算每片的溶出量。限度為標示量的85%，應符合規定，相關圖譜見圖4。

2.4 輔料干擾試驗 取本品輔料適量，用上述溶出介質溶解后，按溶出度測定項下的色譜條件進行試驗，結果表明，本品輔料對測定無干擾，見圖5。

圖4 長春西汀片溶出度測定HPLC圖譜

圖5 長春西汀片溶出度測定空白輔料HPLC圖譜

2.5 線性試驗 取長春西汀對照品適量，加上述溶出介質溶解并稀釋制成濃度為3.0～15.0 μg/mL的溶液，按溶出度測定項下的色譜條件操作，以長春西汀的峰面積(A)對濃度(C)進行線性回歸，得到回歸方程為A=83 984 C-2 830.8，相關系數 r=0.999 7，結果表明，在3.12～15.11 μg/mL范圍內，長春西汀色譜峰面積與其濃度呈良好的線性關系。

2.6 回收率試驗 分別按處方比例稱取本品輔料及相當于主成分60%、80%及120%的長春西汀對照品適量，加溶出介質溶解并定量稀釋，按上述條件進行測定，結果本品的回收率為99.4%(n=9)，RSD=0.60%。

2.7 溶液穩定性試驗 取任意溶出度測定溶液，分別于0、2、8、18 h進行測定，結果表明，溶液放置18 h，可保持穩定。

2.8 溶出曲線均一性 取本品(批號:100101)，依據溶出度測定法，分別在5、13、20、30和45 min取樣測定，6片樣品的溶出結果見圖6，表明樣品的溶出均一性良好，長春西汀片各片溶出趨勢一致，從第二時間點開始，溶出量的 RSD不超過10%，30 min時平均溶出量為 98.2%，RSD為3.3%。

圖6 長春西汀片溶出曲線均一性(批號:100101)

2.9 樣品累積溶出量測定 取上述4批樣品，按上述方法進行累積溶出量測定，結果見表1。

表1 4批樣品累積溶出曲線結果(%，n=6)

3 討論

3.1 筆者對本品的溶出度分別采用中國藥典第一法(籃法)和第三法(小杯法)進行了考察，結果表明，采用小杯法，不同廠家的長春西汀片各批樣品的溶出量均在50%以下，均一性很差，不適合本品的測定。且小杯法是對于小規格固體制劑，當紫外法檢測無法滿足測定要求時，從第二法(槳法)衍生而來，截至目前僅我國收載［2］。該方法對于某些活性成分無法滿足溶出度漏槽條件，不能真實反映藥品的質量。因此，在建立溶出度方法時，通常的趨勢是盡量不采用小杯法，特別是仿制品種或擬出口的制劑品種，國際和國內上推薦采用經典且公認的轉籃法及槳法。通過加大進樣量，采用HPLC法等高靈敏度檢測手段，可滿足低濃度溶出液測定方法學驗證的要求［3］。

3.2 長春西汀在0.067 mol/L鹽酸中略溶，而溶出度試驗漏槽條件通常規定為溶出介質體積要大于溶解藥物主成分(制劑最大規格量)所需體積的3～5倍，以保證藥物溶出不受其溶解性的顯著影響，長春西汀片的規格為5 mg/片，0.067 mol/L鹽酸作為溶出介質則能夠滿足漏槽試驗條件，因此，選擇該溶劑為溶出介質。

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［1］張冬平，于燕.長春西汀治療急性腦梗死療效觀察［J］.實用藥物與臨床，2008，11(5):297-298.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010.

［3］謝沐風，操洪欣.溶出度測定中的若干問題［J］.中國醫藥工業雜志，2006，37(12):859-861.