國產蘭索拉唑藥代動力學研究

于維穎，孟 華，湯新強

消化性潰瘍是一種常見的消化系統疾病［1］，抑制胃酸分泌是治療該病的主要措施［2］。傳統的抗胃酸藥物主要是中和胃酸和抗組胺藥物，但其抑酸作用不夠強，潰瘍復發率高［3］。而質子泵抑制劑(PPI)能高效抑制H+-K+-ATP酶，進而強效抑制胃酸分泌［4-5］，臨床廣泛用于防治消化性潰瘍和損傷。但PPI治療后仍存在復發的問題，從根治潰瘍的觀點來看，不能說已有了理想的藥物［6］。本實驗旨在通過研究國產蘭索拉唑的藥代動力學，以尋求簡單快捷的測定蘭索拉唑血藥濃度的方法，同時為臨床合理用藥提供依據。

1 儀器與設備

日本Shimadzu液相色譜儀;受試制劑:蘭索拉唑片，規格15 mg/片，揚子江藥業集團四川海蓉藥業有限公司產品，批號:041208;蘭索拉唑標準品和內標物4'-乙氧基苯己酮由天津武田藥品有限公司提供。乙腈、三乙胺為色譜純;乙醚、二氯甲烷、丙二醇為分析純;空白血漿由大連醫科大學附屬第一醫院檢驗科提供。

2 實驗方法

2.1 色譜條件 采用 HypersilBDS C18色譜柱(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流動相為水-乙腈-三乙胺(620∶380∶1)，檢測波長為 285 nm，柱溫40℃，流速為1.0 mL/min。

2.2 血漿樣品處理 取空白血清(或加樣血清、血清樣品)0.5 mL，用萃取液乙醚-二氯甲烷(7∶3)5 mL，1 min 渦旋混勻，2 000 r/min 離心5 min，取上清液3.8 mL，再加入萃取液(二氯甲烷∶乙醚∶丙二醇)(60∶140∶1)0.5 mL，在35℃水溶液中用N2吹干，殘渣用流動相50 μL渦旋重組溶解后，備用。

2.3 專屬性試驗 分別將正常人的空白血清0.5 mL、5.0 μg/mL 蘭索拉唑二氯甲烷溶液10 μL和40 μg/mL 4'-乙氧基苯己酮的二氯甲烷溶液10 μL加入空白血清0.5 mL(1 min渦旋混勻)，再依“2.2”項下處理后，取20 μL 進樣。

2.4 標準曲線的制備 具塞提取管內分別加入5.0 μg/mL的蘭索拉唑的二氯甲烷溶液5、10、20、50、100、200 μL 及 40 μg/mL 的 4'-乙氧基苯己酮的二氯甲烷溶液10 μL，再分別加入正常人的空白血清0.5 mL，1 min渦旋混勻，每管內蘭索拉唑的實際濃度為每1 mL血清含蘭索拉唑0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μg，然后按“2.2”項方法提取后，取20 μL進樣分析。用測得的蘭索拉唑峰面積與內標峰面積比值X(A蘭/A內)與蘭索拉唑的濃度(C)進行線性回歸，計算回歸方程。

2.5 精密度的考查 分別配制含蘭索拉唑0.05、0.5、2.0 μg/mL的標準血清樣品，并分別于1 d內及連續5 d內按“2.2”項下處理，進樣20 μL測定，經計算求得其濃度，并得出標準偏差(SD)和相對標準偏差(RSD)。

2.6 回收率的測定 分別配制含蘭索拉唑0.05、0.5、2.0 μg/mL 的標準血清樣品，按“2.2”項下血清樣品的處理與測定方法操作，取20 μL進樣測定，以測得值與加入值之比計算相對回收率。

2.7 穩定性試驗 將“2.6”項下的低、中、高3個濃度的標準血清樣品，分別于第1、2、3、4、5、6、7 及第10日測定蘭索拉唑濃度，考查血樣的放置穩定性。

2.8 受試者蘭索拉唑血藥濃度的測定 受試者于試驗前一日晚8:00開始禁食，試驗當日晨7:30空腹服藥30 mg，分別于服藥前(0 h)和服藥后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0 h取血3 mL，按“2.2”項下操作處理后，取20 μL 進樣，測得每個受試者各時刻蘭索拉唑的血藥濃度。2.9 藥代動力學參數 Cmax﹑Tmax采用實測值，其余數據由中國藥理學會數學藥理委員會所選用的3p97程序擬合求得。

3 結果

3.1 血藥濃度測定方法考查結果

3.1.1 專屬性試驗的結果 見圖1(A)(B)。A為空白血清經提取后進樣的結果，在蘭索拉唑和內標峰的位置上無干擾成分出現。B為空白血清加標準品和內標物后結果，可見二峰分離完全，峰形尖銳，對稱，基線噪音小，保留時間分別為內標峰7.75 min、蘭索拉唑5.80 min。

圖1 液相色譜圖

3.2 標準曲線制備的結果

在0.05～2.0 μg/mL范圍內，蘭索拉唑濃度C與峰面積比值X(A蘭/A內)成線性關系(見圖2)，回歸方程:C=0.632 9 X+0.0563 5(r=0.999 1)。最低檢測濃度為 0.05 μg/mL。

3.3 精密度考查結果 低、中、高3個濃度的蘭索拉唑標準血清樣品日內及日間測定值RSD均＜10%，符合臨床生物樣品分析要求。見表1。

圖2 蘭索拉唑測定標準曲線(橫坐標:橫面積比)

表1 蘭索拉唑血藥濃度測定的重現性(n=5)

3.4 回收率測定結果 蘭索拉唑在0.05～0.2 μg/mL濃度范圍內的相對回收率為94% ～96%。見表2。

表2 蘭索拉唑血藥濃度測定的準確度(n=5)

3.5 穩定性試驗結果 蘭索拉唑血清樣品在-20℃儲藏，第10日蘭索拉唑濃度下降16% ～26%，血清樣品7 d內穩定。見表3。

表3 蘭索拉唑血清樣品的儲存穩定性

3.6 血藥濃度測定結果 受試制劑中蘭索拉唑的 AUC0→t、AUC0→∞分 別 為 (3.387 ± 1.225)、(3.533 ±1.237)h·μg/mL，Cmax為(0.918 ±0.252)μg/mL、Tmax、T1/2分別為(1.917 ± 0.583)、(2.081±0.771)h。蘭索拉唑的藥代動力學曲線符合一室開放模型。蘭索拉唑藥-時曲線見圖3。

圖3 蘭索拉唑血藥濃度-時間曲線

3 討論

蘭索拉唑是一種第二代質子泵抑制劑，治療十二指腸潰瘍優于H2受體拮抗劑，是治療十二指腸潰瘍的安全、有效的藥物。近年來已廣泛應用于消化性潰瘍、反流性食管炎、上消化道出血等疾病的治療，是消化性潰瘍治療的首選藥物［7］。本實驗應用高效液相色譜法測定蘭索拉唑的血藥濃度，同時研究了國產蘭索拉唑在人體內的藥代動力學參數。結果顯示，本方法測得的國產蘭索拉唑的人體藥代動力學參數與文獻報道測得的數據基本一致［8］。

高效液相色譜法測定蘭索拉唑的血藥濃度已有報道［9］。本實驗在大量研究文獻的基礎上，改變了流動相的組成，縮短了實驗的時間。實驗中使用了新的內標物4'-乙氧基苯己酮，其二氯甲烷溶液穩定，在實驗條件下，峰形較好，且與蘭索拉唑分離完全，為蘭索拉唑測定中的內標物較為理想。蘭索拉唑的乙腈-水溶液經紫外光譜掃描，在285 nm附近為一最大吸收平臺，實驗選用乙腈和水做流動相，在此處對吸收無干擾，靈敏度高。流動相中加入三乙胺起抑制峰拖尾作用。流動相pH值控制在7.0左右，否則影響出峰時間。正常人口服蘭索拉唑后，其血藥濃度在測定范圍內，靈敏度可達到測定要求。

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［3］Shiotani A，Kamada T，Kusunoki H，et al.Proton pump inhibitor H2 receptor antagonist［J］.Nihon Rinsho，2011，69:1032-1038.

［4］黎清成，譚祖穩，梁文華.每年冬季6周蘭索拉唑預防消化性潰瘍復發的療效觀察［J］.實用醫學雜志，2010，26(9):1617-1618.

［5］彭幼英.蘭索拉唑聯合克拉霉素、阿莫西林治療消化性潰瘍臨床療效觀察［J］.實用藥物與臨床，2008，11(4):208-209.

［6］Kataoka H，Jho T，Itoh M.Recent topics on important drugs for H.pylori eradication:Omeprazole［J］.Nihon Rinsho，2005，63:333-337.

［7］Hellstr?m PM，Vitols S.The choice of proton pump inhibitor:does it matter［J］.Basic Clin Pharmacol Toxicol，2004，94:106-111.

［8］Vlase L，Popa A，Neag M，et al.Effect of fluoxetine on the pharmacokinetics of lansoprazole:a two-treatment period study in healthy male subjects［J］.Clin Drug Investig，2011，31:727-733.

［9］何曉靜，菅凌燕，孫亞欣，等.高效液相色譜法測定人血漿中蘭索拉唑濃度［J］.實用藥物與臨床，2009，12(1):28-29.