枸杞多糖對骨質疏松大鼠血清PICP、ICTP及鈣、磷、鎂和堿性磷酸酶水平的影響

馬進峰，王一農，金 銳

1)銀川市第一人民醫院骨科 銀川 750004

2)寧夏人民醫院骨二科 銀川 750010

3)銀川市婦幼保健院生殖中心 銀川 750001

近年來，中草藥在治療骨質疏松癥方面引起了廣泛關注。枸杞多糖是寧夏特產枸杞子的有效提取成分，中醫學把骨質疏松歸于“虛勞”、“骨瘺”等，經常用含有枸杞的方劑治療[1]。Ⅰ型膠原蛋白約占骨組織有機成分的80% ～90%[2-3]，對維持骨結構的完整及骨生物力學特性具有十分重要的意義。該研究建立骨質疏松癥大鼠模型，觀察在枸杞多糖干預下模型大鼠血清Ⅰ型前膠原羧基端前肽(pro-collagen type Ⅰ carboxy-terminal propertied，PICP)、Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(carboxyterminal cross linked telopeptide of type Ⅰ collagen，ICTP)及鈣、磷、鎂、堿性磷酸酶等骨轉換生化指標水平的變化，以探討枸杞多糖治療骨質疏松癥的具體作用機制。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器 枸杞多糖由寧夏啟元藥業提供，批號H22023655;已烯雌酚由天津市金耀氨基酸有限公司提供，批號H12020536;生理鹽水由寧夏啟元國藥有限公司提供，批號100221-1;PICP和ICTP酶聯免疫檢測試劑盒為銀川易琳燊科貿有限公司進口分裝產品。BIO-RAD1575型洗板機、Model-680型酶標儀、DHP-9082型電熱恒溫培養箱、Olympus AU2700全自動生化分析儀、TD5A-WS臺式低速離心機等由寧夏醫科大學提供。

1.2 實驗分組與造模方法 3月齡雌性SD大鼠45只，體質量280～230 g，由寧夏醫科大學實驗動物中心提供。隨機數字表法分為5組，每組9只。30 g/L戊巴比妥鈉1 mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，假手術組切除卵巢周圍少量脂肪組織;余4組均切除雙側卵巢，參照文獻[2]的方法制作骨質疏松大鼠模型，常規飼養2個月后開始藥物干預。假手術組和模型組按5 mL/(kg·d)灌胃生理鹽水，枸杞多糖低、高劑量組分別按10、40 mg/(kg·d)灌胃枸杞多糖，已烯雌酚組按0.1 mg/(kg·3 d)腹腔注射已烯雌酚。藥物干預時間為3個月。

1.3 檢測指標 干預3個月后，各組大鼠麻醉后取心臟血 5 mL，3500 r/min離心 15 min，取血清，ELISA法測定樣品中PICP和ICTP水平，利用全自動生化分析儀測定鈣、磷、鎂和堿性磷酸酶水平。

1.4 統計學處理 采用SPSS 11.0處理，所有數據先行正態性和方差齊性檢驗。5組大鼠血清PICP、ICTP及鈣、磷、鎂、堿性磷酸酶水平的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗，檢驗水準 α =0.05。

2 結果

2.1 各組大鼠血清PICP和ICTP水平比較 見表1。

表1 各組大鼠血清PICP、ICTP水平的比較

2.2 各組大鼠血清鈣、磷、鎂、堿性磷酸酶水平比較見表2。

表2 各組大鼠血清鈣、磷、鎂、堿性磷酸酶水平比較

3 討論

PICP是在原膠原形成過程中由內切酶從前膠原的羧基端切下的附加肽段，其血清水平主要反映Ⅰ型膠原合成速率及骨轉換情況，其水平升高提示Ⅰ型膠原的合成速率加快，骨轉換活躍。Tahtela等[4]的研究表明，在對絕經后婦女應用雙磷酸鹽治療的監測過程中，PICP是最有效的監測指標。ICTP是Ⅰ型膠原分解過程中釋放的惟一免疫性蛋白，與Ⅰ型膠原蛋白以1∶1的比例釋放入血，由腎臟清除，反映骨吸收情況，在其他組織中含量很少，可特異地反映骨的病變[5]，也是目前國際上公認的代表骨吸收的生化指標[6]。堿性磷酸酶在以往常被用作評價骨代謝，但由于它是同工酶，血清中的堿性磷酸酶只有50%來源于骨組織，因此其對骨組織代謝的反映缺乏特異性和敏感性[7]。血清鈣、鎂、磷作為衡量骨礦化的常用指標，可以間接反映骨組織的代謝情況[8]。

該研究結果顯示:枸杞多糖低、高劑量組血清PICP、ICTP水平均較模型組顯著下降，且高劑量組下降更為顯著，表明枸杞多糖可以有效降低骨質疏松大鼠骨膠原的代謝水平，抑制其骨代謝的高轉換狀態，從而對骨質疏松大鼠的骨代謝起調節作用。枸杞多糖低、高劑量組血清鈣和鎂水平的變化表明枸杞多糖同樣可以影響骨質疏松大鼠血清鈣、鎂水平值，對骨的礦化過程也有一定的調節作用。

綜上所述，枸杞多糖可以顯著降低高轉換型骨質疏松癥的高代謝狀態，從而對骨質疏松癥具有一定的調節作用，為進一步研究枸杞多糖治療骨質疏松癥的作用機制提供了理論依據。

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