女貞子水煎劑對性未成熟雌性小鼠主要臟器系數的影響*

孫曙光，李玉潔，張明昊

河南中醫學院基礎醫學院實驗教學中心 鄭州 450008

女貞子是傳統的扶正固本藥物，為木犀科植物女貞的成熟果實干燥而成[1-2]。研究[3-4]發現，女貞子有調節免疫功能、抗菌、抗炎、抗腫瘤、保肝、降血糖、降血脂及抗衰老等多種藥理作用，臨床上可用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、咽干鼻燥、腰膝酸痛及月經量多等多種疾病的治療。目前，以女貞子為主要處方組成的方劑具有補益肝腎、滋陰止血等功效，能夠緩解久病虛損、氣陰不足，促進手術、放、化療后機體正常功能的恢復，在臨床上被廣泛采用[5-6]。女貞子是植物雌激素含量較高的幾種中藥之一。作者采用經典的體內實驗方法，分析給予不同劑量女貞子水煎劑的性未成熟雌性小鼠體內主要臟器系數的變化，為中藥產品及保健食品的開發提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 21 d齡昆明種雌性小鼠60只，體質量9～12 g，購自河南省實驗動物中心。實驗期間飼喂于河南中醫學院動物實驗中心，一級環境條件下飼養，溫度(25±1)℃，控光(12 h明暗相間)，自由飲水、進食。

1.2 藥物與試劑 女貞子購自鄭州市張仲景大藥房(產自河南)，實驗前用自來水浸泡30 min后煎煮3次，混勻并濃縮至0.88 kg/L。陽性藥物己烯雌酚購自上海通用藥業股份有限公司(批號009003)，實驗前用吐溫與蒸餾水配成乳濁液。

1.3 實驗分組 小鼠適應性飼養2 d，隨機分為5組，每組12只，分別為陰性對照組、陽性對照組和女貞子低、中、高劑量組。陽性對照組給予己烯雌酚乳濁液(35 mg/kg)，陰性對照組給予等體積的蒸餾水，女貞子低、中、高劑量組分別給予 4.4、6.6和8.8 g/kg(按人給藥量的20倍、30倍、40倍計算)，以蒸餾水稀釋。均灌胃給藥，1次/d，連續給藥8 d。

1.4 臟器取材與稱量 小鼠給藥8 d后稱質量，頸椎脫臼處死，立即剖取子宮、胸腺、心臟、脾臟、腎臟及腎上腺，除去上述器官周圍的脂肪結締組織，吸盡臟器表面血液，用電子天平稱量。計算各臟器質量占體質量的百分比，即臟器系數[7]。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0進行分析，應用單因素方差分析和LSD-t檢驗分析各組間主要臟器系數的差異，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 一般狀態觀察結果 陰性對照組小鼠狀態良好，反應靈敏，皮毛有光澤;陽性對照組小鼠反應略顯遲鈍;女貞子低劑量組小鼠反應略顯遲鈍，但狀態比陽性組稍好;女貞子中、高劑量組動物狀態良好，無死亡現象。

2.2 5組小鼠主要臟器系數比較 見表1。

表1 5組小鼠主要臟器系數的比較 %

3 討論

植物雌激素可以與哺乳類動物及人體雌激素受體相結合并將其激活，在體內發揮雙向調節作用[8]。長期以來，許多中草藥及其復方被廣泛應用于婦科病的治療和保健，其中所含的植物雌激素的藥效作用不容忽視[9-11]。為了盡量減少內源性雌激素分泌對實驗結果產生的影響，作者選用了性未成熟雌性小鼠作為樣本，并以己烯雌酚作為陽性對照藥，以使檢測到的臟器系數更為準確。該實驗選用蒸餾水作為陰性對照品，主要是考慮實驗藥物女貞子煎劑為水煎劑，而實驗過程中將吐溫加入到陽性對照藥中主要是為了增加其水溶性，便于實驗給藥。以往的研究[12]顯示，吐溫毒性小，親水性強，低劑量時對小鼠體質量及臟器系數無明顯影響。人口服吐溫4.5 ～6.0 g/d，連續28 d，甚至4 a之久亦無病態反應[13]。實驗中陽性對照組和女貞子低劑量組小鼠出現了反應遲鈍的現象，導致這種現象的原因尚不清楚，有待深入研究。該實驗結果顯示女貞子中、高劑量組子宮系數與陰性對照組相比明顯增高，且隨給藥劑量的增大而增強，但女貞子低、中、高劑量組小鼠子宮系數都明顯低于陽性對照組，提示女貞子的植物雌激素樣調節作用在一定范圍內隨劑量的增大而增強。

胸腺是機體的重要淋巴器官，能夠分泌胸腺激素及激素類物質，其功能與免疫密切相關;脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心[14]。該實驗結果顯示，陽性對照組小鼠胸腺、脾臟系數與陰性對照組相比分別有降低和升高的趨勢，但差異無統計學意義，提示陽性藥物對小鼠免疫系統有一定的影響，但對胸腺和脾臟的作用不一樣，原因尚不清楚，有待研究。女貞子低、中劑量組小鼠胸腺系數與陽性對照組相比差異有統計學意義;女貞子高劑量組小鼠胸腺系數與陰、陽性對照組相比差異無統計學意義;女貞子低劑量組小鼠胸腺系數較陰性對照組增高，提示女貞子能夠在一定劑量范圍內影響小鼠機體的免疫功能，其作用可能隨給藥量變化而變化。

為了進一步考察女貞子在發揮藥理作用的同時是否還表現出一定的毒副作用，作者還記錄了各劑量組小鼠的腎臟、腎上腺、心臟、肝臟等臟器系數，結果顯示女貞子高劑量組小鼠心臟系數與陰性對照組相比明顯降低，提示女貞子隨給藥量的增大對性未成熟小鼠的心臟會產生一定的影響，這種影響可能與女貞子的毒副作用有關，具體作用還有待進一步的研究證實。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(第一部)[M].2005年版.北京:化學工業出版社，2005:229

[2]戚世媛，熊正英.女貞子提取物對大鼠骨骼肌抗氧化作用和運動能力的影響[J].西安交通大學學報:醫學版，2011，32(2):187

[3]羅世煒.女貞子的研究與開發[J].農村經濟與科技，2010，21(5):140

[4]金芝貴，金劍，肖忠革，等.女貞子的藥理作用及其臨床應用進展[J].藥學服務與研究，2011，11(3):189

[5]Collins BM，Mclachlan JA，Arnold SF.The estrogenic and antiestrogenic activities of phytechemicals with the human estrogen receptor expressed in yeast[J].Steroids，1997，62(4):365

[6]Tinwell H，Ashby J.Sensitivity of the immature rat uterotrophic assay to mixtures of estrogens[J].Environ Health Perspect，2004，112(5):575

[7]章金濤，朱奎成，杜春燕，等.豫醫卷毛大鼠與SD大鼠主要臟器系數及生長發育情況比較[J].鄭州大學學報:醫學版，2007，42(4):634

[8]郝慶秀，王繼峰，牛建昭，等.熟地等4味中藥的植物雌激素作用的實驗研究[J].中國中醫雜志，2009，34(5):620

[9]陳春，張淑麗.紅花等10種中藥的雌激素活性研究分析[J].中醫中藥，2011，9(14):296

[10]王玉梅，陳前鋒，楊莉娟，等.女貞子對大鼠成骨細胞增殖與分化的影響[J].天然產物研究與開發，2011，23(2):232

[11]王大偉，牛建昭，王繼峰，等.中藥植物雌激素受體調節劑篩選研究中的問題與對策[J].中草藥，2009，40(5):825

[12]張述禹，劉惠惠，云彩麟.吐溫-80的藥理與應用[J].中國醫院藥學雜志，1992，12(10):459

[13]馬鴻雁，叢英，張明令，等.中藥注射劑中吐溫80用量解析[J].亞太傳統醫藥，2010，6(8):17

[14]高美華.醫學免疫學[M].北京:人民軍醫出版社，1999:74