高山紅景天對阿霉素腎病大鼠腎臟病理作用研究

韓洪波，馬銘澤，陳 韜

（1．解放軍208醫院 腎內內分泌科，吉林 長春130062；2．空軍航空大學 門診部）

腎小球疾病主要侵犯雙腎小球則引起慢性腎衰（尿毒癥）的主要疾病［1］。目前多數認為起始因素為免疫介導性炎癥，發展為程度不等的腎小球硬化［1］。高山紅景天是長白山地區珍稀藥物植物，作用為抗炎、抗脂質過氧化、增強SOD活性、清除自由基、雙向調節機體的免疫力［2］。有報道喂服紅景天可降低阿霉素大鼠尿蛋白及血脂［3］，紅景天制劑對腎炎有治療作用［4］。本試驗從病理學探討高山紅景天對延緩腎小球硬化作用。

1 材料與方法

1．1 主要材料 ①動物：30只 Wister雌性大鼠，體重180－200g／只，購自吉林大學動物部。②高山紅景天：采購于長白山地區。③阿霉素：由深圳萬樂藥業有限公司生產。④721分光光度計、752紫外分光光度計：由上海第三分析儀器廠生產。

1．2 實驗方法 紅景天甙的提取：高山紅景天粗粉用70%乙醇浸泡24h后（乙醇液面需高出藥粉平面10cm），收集乙醇浸出液，經蒸餾濃縮至無乙醇味，回收濃縮液靜置，過濾，棄去沉淀物。濾液加入等量石油醚充分搖勻，混均后裝入分液漏斗靜置，分層后棄去石油醚萃取液，保留水層，用同樣方法再經石油醚萃取兩次。同理水層依次用氯仿，乙酸乙酯，正丁醇各萃取3次，最后所得水層經蒸餾濃縮，752紫外分光光度計掃描，與標準品波長222nm比較。

腎炎模型建立：參照魯斌等（3）阿霉素腎病模型的制做方法。分3次大鼠尾靜脈注射阿霉素，第一次按阿霉素3mg／kg體重給藥，7天后按2mg／kg體重給藥，第14天后再按2mg／kg體重給藥，第21天后留取尿液，查24h尿蛋白定量。

動物分組：隨機將30只大鼠分為：①正常組（n＝10）；②對照組（n＝10）：制作模型成功后，未給予藥物治療；③治療組（n＝10）：模型成功后，每日給予紅景天甙液1．5ml（相當于生藥20g／kg體重），連續灌胃28d后，留取24h尿液及血樣后，取出大鼠腎臟。

觀察指標與方法：治療前及完成后，以代謝籠收集各組大鼠24h尿液，磺基水楊酸比濁法測定尿蛋白含量，并測肝功、腎功、血膽固醇。各組腎臟標本行常規病理檢查。

統計：對各組結果進行組間t檢驗，結果以均數土標準差（x—±s）表示，P＜0．05為有統計學差異。

2 結果

2．1 大鼠尿蛋白變化（mg／24h） 見表1。

表1 各組大鼠尿蛋白比較

表1結果表明，經紅景天甙灌胃的腎炎大鼠尿蛋白含量明顯降低（P＜0．01），但未達到正常對照組的水平，而且未經治療的模型對照組的尿蛋白仍有增加趨勢，但P＞0．05。

2．2 治療后大鼠血生化指標變化 見表2。

表2表示，經紅景天甙治灌胃腎炎大鼠血中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶及血肌酐變化不明顯，而經治療后血中白蛋白明顯回升（P＜0．05），血中膽固醇也有所下降（P＜0．05），但未達到正常對照組水平。

表2 各組大鼠血生化指標ALT、AST、ALB、CHO、CRE比較

2．3 病理學變化 正常組無明顯病理改變，模型組可見多數腎小球系膜細胞增生，系膜基質增多伴有腎小球囊粘連，節段硬化。腎小管上皮細胞顆粒樣變性，蛋白管型多見。治療組病理有明顯改善，系膜細胞增生明顯減輕，系膜基質減少，腎小管上皮細胞顆粒樣變性及蛋白管型明顯減少。

3 討論

腎小球疾病目前多數認為起病為免疫機制致病［1］。其進展重要病理基礎是腎小球細胞外基質積聚［5，6］。免疫炎癥進展致系膜細胞及基質增生，而腎球硬化，腎小管縮萎，腎間質纖維化。多次小劑量阿霉素尾靜脈注射誘導大鼠慢性腎炎模型類似于人類慢性腎炎或局灶節段性腎小球硬化［7］。經高山紅景天甙治療后，腎炎大鼠腎臟系膜細胞增生明顯減輕，系膜基質減少，腎小管上皮細胞顆粒樣變性及蛋白管型明顯減少。說明高山紅景天甙對腎炎大鼠有明顯的治療作用，緩解了病情進展。另有報道紅景天提取液可明顯改善大鼠腎小球基底膜增厚［8］，紅景天抑制腎小管上皮及間質細胞向纖維細胞轉化，對纖維化有防治作用［9］。高山紅景天主要有效成分有紅景天甙（Salidroside）C14H20O7及對酪醇（Tyrosol）C6H10O2［2］。主要藥理作用為：抗缺氧、抗氧化、增強SOD活性、抗衰老、抗微波輻射、抗疲勞、抗毒、雙向調節作用、抗腫瘤，增強巨噬細胞功能等［2，6］。實驗示尿蛋白下降，可能與抗自由基作用有關。同時腎炎大鼠及正常大鼠的肝功、腎功無明顯影響（P＞0．05）；治療后的大鼠血中膽固醇有所下降（P＜0．05），血漿白蛋白有所上升（P＜0．05），可能由于尿蛋白丟失減少，使得血中白蛋白有所回升，同時體內代償性脂蛋白合成也減少，血脂也有所下降。其尿蛋白及血蛋白、血脂變化與文獻報道［3］相吻合。高山紅景天多種藥理作用及其對腎小球疾病的治療作用有待進一步研究。

［1］葉任高，陸再英，林善錟，等．內科學［M］．第5版．北京：人民衛生出版社，2001：518－519．

［2］吳維春．高山紅景天［M］．長春：吉林科學技術出版社，1987．45－57．

［3］Borkakoti N．Matrix metalloproteinase：Variations on a theme［J］．Prog Biophys Mol Biol，1998，70（1）：73．

［4］孫 波，徐君東，閆國強，等．紅景天對阿霉素大鼠尿蛋白、血脂的影響［J］．中國藥學報，2001，29（1）：43．

［5］秦 蓉．PAI－1及其在腎小球硬化中的作用及意義［J］．臨床與實驗病理學雜志，1998，14（6）：579．

［6］尹桂山，鄒靜琴，王桂香，等．紅景天根乙醇浸液的營養延緩衰老作用的研究［J］．營養學報，1992，14（1）：98．

［7］魯 斌，李新民，馬 融．對改良的阿毒素腎病模型的評價［J］．實驗動物科學與管理，1999，16（3）：5．

［8］張永娟，石永峰，徐衛峰．紅景天抑制阿霉素腎病大鼠腎小管間質α平滑肌肌動蛋白表達［J］．基礎醫學與臨床，2007，27（11）：1286．

［9］金秀男，朱后慧，賈親均，等．紅景天乙醇提取液對實驗性糖尿病大鼠血糖及腎臟結構變化影響［J］．延邊大學醫學學報，2009，32（4）：241．