64排螺旋CT灌注評價宮頸癌血管生成的實驗研究

叢也彤，周曼瑜

（1．吉化集團公司總醫(yī)院CT科；2．吉化集團公司總醫(yī)院 骨科，吉林132021）

目前，功能成像因其在腫瘤的早期診斷和鑒別診斷、療效評價、估計預(yù)后等方面所顯示出的巨大優(yōu)越性，正成為研究的熱點。灌注成像（CTPI）就是其中的一種利用影像學(xué)方法獲得活體組織器官的血流動力學(xué)等信息，定量或半定量地分析和評價其功能狀態(tài)的功能成像方法，是一個全新的研究領(lǐng)域，由于CTPI無創(chuàng)、快捷、空間分辨力高、設(shè)備廣泛普及等優(yōu)點，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景［1－3］。目前，MSCT灌注成像技術(shù)大多應(yīng)用于腦腫瘤、腦血管疾病及肝、胰、腎等實質(zhì)器官腫瘤的診斷，應(yīng)用于宮頸癌的臨床研究較少報道。

1 材料與方法

1．1 一般資料

在2009年3月－2011年2月我院先后對36例早期宮頸癌病人進行多排螺旋CT掃描，掃描入選標(biāo)準(zhǔn)：①擬診為宮頸癌。②準(zhǔn)備入院進行手術(shù)治療的病人。36例病人中，年齡范圍45－75歲，中位年齡為55歲，病理類型：鱗癌19例，腺癌10例，小細胞癌7例。

1．2 CT掃描技術(shù)

采用 美國GE64排螺旋CT掃描，掃描前訓(xùn)練病人呼吸，在掃描期間盡量屏住呼吸，無法屏氣時行平靜呼吸。所有病人進行增強掃描，掃描參數(shù)為：120kV，50mA，矩陣512×512。采用高壓注射器注射非離子造影劑（300mg／ml），劑量為2ml／kg體重，注射速率為3ml／S，延遲60s開始掃描，然后進行薄層重建。所有病人陰道內(nèi)放置陰道栓，檢查和手術(shù)的間隔時間為7－10天。

1．3 組織標(biāo)本

選取經(jīng)手術(shù)獲得組織學(xué)證實的標(biāo)本共36例進行免疫組化染色分析，免疫組化染色一LSAB法（標(biāo)記生物素鏈親和素法）。組織標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，備用。采用LSAB法（標(biāo)記生物素鏈親和素法）染色后進行微血管密度（MicrovesselDensity，MVD）計數(shù)和檢測血管內(nèi)皮細胞生 長 因 子 （VaseularEndothelialGrowthFaetor，VEGF）表達情況。

1．4 微血管密度的染色方法和步驟、結(jié)果判定及計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)

MVD測定：在顯微鏡低倍視野下于腫瘤細胞浸潤區(qū)域選取微血管數(shù)量最密集區(qū)，以200倍視野（0．72－2／視野）范圍分別計算所有染色的微血管，記錄4個視野的微血管數(shù)，取其平均值，作為微血管密度，分析記錄微血管管腔、內(nèi)皮細胞、細胞間隙、基底膜、血管外間隙等情況。

1．5 灌注圖像分析

將掃描后獲得的原始數(shù)據(jù)輸入 ADW4．3工作站：應(yīng)用Body－perfusion軟件分析，選擇病灶同層面主動脈為參考血管，如果病變位于主動脈弓以上層面則選擇該層面頭臂干或左頸總動脈為參考血管，對于因呼吸運動或心臟搏動導(dǎo)致位移較大者應(yīng)用3D校正技術(shù)，計算機自動生成灌注偽彩圖和相應(yīng)的血流量 （BF）、相對血容量（BV）、毛細血管滲透性（PS）和達峰時間 （TTP）等灌注參數(shù)。當(dāng)病灶直徑 ＜3．0cm時，以最大層面實質(zhì)區(qū)域（除去鈣化與壞死）約60%面積為感興趣區(qū)（RegionofInterest，ROI）；當(dāng)病灶直徑≥3．0cm時，測量根據(jù)病灶的實質(zhì)部分和血容量灌注彩圖，在病灶實質(zhì)區(qū)周圍部選取任意等距離的3個等大的ROI，然后計算平均值。

1．6 數(shù)據(jù)分析

將各組資料輸入計算機，應(yīng)用SPSS 13．0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析。①組間比較：計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料比較，采用χ2檢驗；②相關(guān)分析：計量資料采用線性相關(guān)；等級資料采用等級相關(guān)。P＜0．05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0．01認(rèn)為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

見表1、表2

表1 不同病理分型宮頸癌的CT灌注參數(shù)平均值比較

表2 宮頸炎與不同分型宮頸癌 MVD比較

宮頸炎、不同分型宮頸癌 MVD之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）

4組共48例標(biāo)本做了免疫組化，其中惡性組微血管豐富，形態(tài)不規(guī)則，主要分布于病灶周邊部；VEGF陽性者占84%，強陽性表達者占64%，VEGF主要分布于胞漿、胞膜及少量胞外基質(zhì)，鱗癌陽性細胞呈彌散或局灶分布，腺癌中多以腺泡狀分布；正常對照組微血管也較豐富，管腔較規(guī)則，管壁完整，主要分布于病灶實質(zhì)部分，壞死區(qū)微血管稀少甚至沒有，VEGF陽性者占100%，主要為弱陽性，占57．1%；良勝組微血管稀疏，僅纖維包膜處見少量血管染色，VEGF陰性者71．4%，陽性者僅占28．6%。各組比較：惡性組和炎性組的 MVD均高于良性組，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）；惡性組和炎性組的MVD差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）。

3 討論

國內(nèi)外大量研究已經(jīng)證實，腫瘤血管生成是腫瘤生長、浸潤和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)，而衡量腫瘤血管生成的“金標(biāo)準(zhǔn)，一微血管密度（MVD），及其主要影響因素血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）在不同類型的腫瘤或同一腫瘤的不同發(fā)展時期存在差異［4－6］。這種差異既是腫瘤CT強化和灌注的病理基礎(chǔ)，也和腫瘤的治療效果、預(yù)后密切相關(guān)。因此，利用CTPI來反映病變的血流模式，了解其微血管功能狀況，為病變良惡性的鑒別診斷、評價治療效果以及判斷預(yù)后提供更豐富更準(zhǔn)確的功能信息，已經(jīng)成為新的研究課題。

腫瘤血管生成是腫瘤生長、浸潤和轉(zhuǎn)移的前提，隨著腫瘤惡性程度的增高，在大量促血管生成因子的作用下，出現(xiàn)了大量腫瘤新生血管，腫瘤新生血管導(dǎo)致MVD增高，從而引起組織血流灌注的改變。腫瘤組織內(nèi)有大量的促血管形成因子，促進腫瘤血管的生成，生長快速的腫瘤微血管直徑是生長緩慢腫瘤和正常微血管的5倍。因此，腫瘤血管的生成會導(dǎo)致灌注量，即BF的增加。而BV代表局部區(qū)域的血流數(shù)量，且受血管大小和毛細血管開放數(shù)量的影響，腫瘤血管的形成，必然導(dǎo)致BV的增加。腫瘤組織的灌注表現(xiàn)與其微血管密度密切相關(guān)，因此能充分反映子宮頸癌的微血管密度。PS值代表了血管的表面滲透性，是一個非常重要的灌注值，它可以用于評價腫瘤新生血管成熟度、反映腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性，其原因在于新生腫瘤血管的血管內(nèi)皮細胞不完整，相鄰細胞內(nèi)皮間隙較寬，此時滲透性即PS值增高，腫瘤細胞就較容易穿過血管，造成遠處轉(zhuǎn)移，腫瘤血管生成是腫瘤生長、浸潤和轉(zhuǎn)移的前提，隨著腫瘤惡性程度的增高，在大量促血管生成因子的作用下，出現(xiàn)了大量腫瘤新生血管，腫瘤新生血管導(dǎo)致MVD增高，從而引起組織血流灌注的改變新生血管成熟度越差，腫瘤生長越快。

本研究表明CT灌注成像參數(shù)BF、BV、PS與宮頸癌分型有顯著相關(guān)性，CT灌注成像可分地反映宮頸癌的血流灌注特點，其參數(shù)也可反映病變組織良惡性及腫瘤組織血管化程度，與腫瘤 MVD呈顯著正相關(guān)，CT灌注成像可以提供一種活體監(jiān)測腫瘤血管生成的方法，對腫瘤診斷和治療方案選擇有重要價值。

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