雷米普利片在健康人體的藥代動力學和相對生物利用度

陳令允

(江蘇省邳州市人民醫院,江蘇邳州,221300)

雷米普利早在2000年即被食品及藥物管理局(FDA)批準應用于降低心肌梗死、腦卒中和心血管死亡危險性[1-2]。隨后,由意大利赫斯特Aventis Pharma公司生產,北京安萬特(中國)投資有限公司分裝的雷米普利片(商品名:瑞泰)逐漸在國內廣泛應用,主要用于治療高血壓和充血性心力衰竭。國產雷米普利片與瑞泰在藥代動力學上是否具有統計學差異,2組藥物是否具有生物等效性,目前報道較少。本研究選取30例健康的受試者,進行了國產雷米普利片和進口雷米普利片的健康人體生物利用度和藥動學研究,評價2者是否具有生物等效性,以期為臨床應用提供依據,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取30例經過常規檢查的健康人,其中男16例,女14例 ,平均年齡(25±4)歲 ,體質量(64±11)kg,身高(176±12)cm,血尿常規正常,無家族病、精神病史,無吸煙、嗜酒等不良嗜好,各臟器經檢查功能均正常。在受試者簽署知情同意書和倫理委員會批準后,采用數字隨機法將30例受試者分為試驗組15例和對照組15例。試驗組男8例,女 7例,平均(25±4)歲,體質量(63±12)kg,身高(175±11)cm;對照組男8例,女7例,平均(25±4)歲,體質量(65±10)kg,身高(176±13)cm。2組受試者在性別、年齡、體質量、身高上的差異無統計學意義,具有可比性。

1.2 儀器及試劑

1.2.1 儀器:Surveyor Plus高效液相色譜儀(Thermo,美國,四元梯度泵);Finnigan TSQ Qnant-nffl discovery質譜檢測器;Surveyor溫控生物自動進樣器;Xcalibur 4液質數據工作站;AJ-30i高速冷凍離心機(BECKMAN,美國);超純水儀(Millipore,美國)。

1.2.2 主要試劑:雷米普利和雷米普利拉對照品(美國SIGMA公司);馬來酸依那普利內標(美國SIGMA公司);雷米普利片(商品名:瑞泰,賽諾菲安萬特北京制藥有限公司生產);雷米普利片(商品名:瑞素坦,昆山龍燈瑞迪制藥有限公司生產);乙腈、甲醇色譜純試劑(美國SIGMA公司);其他試劑均為分析純試劑(國藥試劑有限公司);水為超純水儀自制純化水。

1.2.3 標準溶液及內標液的配制:雷米普利標準溶液的配制:精密稱定10.00 mg雷米普利于100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得濃度為100 mg/L的雷米普利母液,4℃保存。應用時,分別精密量取雷米普利母液 0.02、0.05、0.1、0.2 、0.5 、1.0、2.0 mL 于 10 mL 容量瓶中,用流動相定容至刻度,即得濃度分別為0.20、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 和 20.00 mg/L 雷米普利系列標準溶液。雷米普利拉標準溶液配制方法與之相同。

馬來酸依那普利內標液:精密稱取馬來酸依那普利20 mg于20 mL容量瓶中,加甲醇溶劑并定容至刻度,即得1 g/L馬來酸依那普利母液,4℃保存。應用時,精密量取0.1 mL于10 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,即得濃度為10 mg/L的馬來酸依那普利內標溶液。

1.3 方法

1.3.1 試驗方案:30例受試者隨機分為試驗組15例和對照組15例,試驗組服用國產雷米普利片,對照組服用進口分裝雷米普利片。試驗采用雙周期,時間間隔為2周,10 mg/次。所有受試者試驗前1天均須禁食12 h,并分別于試驗當日早晨8︰00用200 mL溫水按劑量口服雷米普利片。用藥2 h后飲定量水,4 h后統一定量進食午餐,午餐為低脂食品。受試者于服藥前后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0 、3.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0、12.0、24.0 、36.0、48.0 和 72.0 h 分別抽取上肢前臂靜脈血3.0mL,轉移進入已加入肝素的5 mL離心管中,4℃低溫離心制備血漿后貯存于-80℃冰箱中備后續試驗用。2周后重復上述試驗。服藥及抽血前后避免劇烈活動或久臥床。試驗期間,觀察檢測受試者生理指標及不良反應情況。

1.3.2 數據分析:Tmax、Cmax均用實測值;AUC0※t以梯形面積法求得(AUC0※∞=AUC0※t+Ct/λz);相對生物利用度 F%=[AUC0※t(T)/AUC0※t(R)]×100%。將AUC0※t、AUC0※∞和 C max等藥動學參數進行對數轉換。

2 結 果

2.1 色譜專屬性

將空白血漿、加內標馬來酸依那普利血漿、加對照雷米普利血漿、加對照雷米普利拉血漿、受試者血漿制備后樣品色譜圖進行比較后發現血漿中雷米普利、雷米普利拉、馬來酸依那普利保留時間分別為 2.05 min、2.25 min和 1.95 min,峰形較對稱,無內源性雜質峰干擾。說明在該色譜條件下,專屬性較好。

2.2 標準曲線的制備

按照雷米普利標準溶液配制方法用移液器精密量取雷米普利系列標準溶液50 μ L置于1 mL離心管中,每管加入空白血漿450 μ L,配成質量濃度相當于20.0 、50.0 、100.0、200.0 、500.0、1000.0、2000.0 μ g/L 的血漿樣本,按血漿處理方法處理后進行平行處理并進樣分析。同樣方法得到雷米普利拉標準曲線樣本。以雷米普利色譜峰面積(As)與內標色譜峰面積(Ai)峰面積之比Y(Y=As/Ai)對質量濃度(C,μ g/L)進行回歸得到方程:C=0.206Y+0.009,r=0.9997。雷米普利血漿線性范圍是0.100～100.1 ng/mL,定量下限為0.05 ng/mL(S/N≥3)。以雷米普利拉色譜峰面積(As)與內標色譜峰面積(Ai)峰面積之比 Y(Y=As/Ai)對質量濃度(C,μ g/L)進行回歸得到方程:C=0.026Y-0.008,r=0.9998。雷米普利拉血漿線性范圍是0.106～100.6 ng/mL,定量下限為0.10 ng/mL(S/N≥3)。

2.3 回收率和精確度試驗

按雷米普利標準溶液配制方法分別配制低(50.00 μ g/L)、中(200.0 μ g/L)、高(1000.0 μ g/L)3種濃度的血漿標準樣品(N=50),按血漿處理方法處理樣本后進行平行處理分析,計算相對回收率和提取回收率。新制備的樣品每天進樣測定5次并重復測定5 d,分別考察本實驗方法的同一天內以及不同天數之間的精密度。同樣方法得到雷米普利拉回收率和精密度檢測結果。結果表明血樣中雷米普利和雷米普利拉的相對回收率為均>90%,日內、日間精密度<9%,符合生物樣品分析要求。

2.4 樣品穩定性試驗

分別配制低(50.00μ g/L)、中(200.0μ g/L)、高(1000.0 μ g/L)的血漿標準樣品各12份并分為3組。第1組室溫存放4 h后檢測;第2組制備后樣本即刻凍存于-80℃凍存15 d后檢測;第3組即刻凍存7 d,取出樣本融化后再次凍存7 d后檢測。求得經反復凍融后樣本各個濃度回收率為90.3%～96.7%,表明樣品在上述條件下穩定。

2.5 藥代動力學及生物利用度分析

對照組和試驗組共30例健康受試者單劑量口服國產和進口雷米普利片雙周期后的主要藥動學參數,見表1。國產與進口制劑藥物間均無顯著性差異(P>0.05)。國產制劑的平均相對生物利用度雷米普利為(104.77±21.63)%,雷米普利拉為(102.57±22.54)%。

表1 2組主要藥動學參數比較(,n=5)

表1 2組主要藥動學參數比較(,n=5)

與對照組比較,＊＊P<0.01。

參數 雷米普利實驗組 對照組雷米普利拉實驗組 對照組血藥濃度-時間曲線下面積 AUC0-t/μ g·(L·h)-1 42.91±11.43 43.16±11.34 343.65±61.58 353.63±65.57血藥濃度-時間曲線下面積 AUC0-∞/μ g·(L·h)-1 43.01±11.13 43.06±10.50 345.67±73.55 363.60±91.86血藥峰濃度 Cmax/μ g·L-1 40.61±14.21 42.32±14.50 43.82±11.53 45.78±12.57血藥濃度達峰時間Tmax/h 0.62±0.15 0.67±0.05 2.93±1.75 3.02±1.54終末半衰期t1/2/h 2.66±1.55 2.32±1.58 18.16± 6.85 19.01± 7.58

3 討 論

雷米普利化學名為N-[1(S)-乙氧羰基-3-苯丙基]-(S)-丙氨酰基-順橋-2-氮雜二環[3,3,0]辛烷-3(S)-羧酸,由德國赫斯特公司1989年研制開發上市。雷米普利為一種新型的非巰基血管緊張素轉換酶(ACE)抑制劑的前體藥物,人體吸收后水解成雷米普利拉而起作用。它能抑制ACE和持續減少血管緊張素Ⅱ直接或間接地擴張外周血管作用,降低血管的阻力[3-4]。2000年FDA批準雷米普利用于降低心肌梗死、腦卒中和心血管死亡危險性,這標志著雷米普利是第一個也是唯一的一個正式擁有此項適應證的ACE抑制劑類藥物[5-6]。

本研究采用LC-MS/MS法測定雷米普利和雷米普利拉的血漿濃度,與文獻報道方法相比,其分析周期短、成本低、靈敏度高,能達到良好的分離效果,血漿中內源性雜質對雷米普利、雷米普利拉及內標的測定均無干擾,適合于藥動學和生物利用度研究。

對雷米普利和活性代謝產物雷米普利拉的藥動學研究表明,雷米普利片口服后吸收較為迅速,平均(0.62±0.15)h血藥濃度達峰值,其活性代謝產物雷米普利拉的達峰時間(2.93±1.75)h。由于雷米普利是前藥,治療高血壓和心力衰竭作用主要是通過其活性代謝產物雷米普利拉發生的,故建議臨床使用該類藥物時,應根據患者的具體情況調整給藥劑量,以保障臨床用藥的安全性和有效性。

[1]石海蓮,劉燕,馬春來,等.雷米普利對大鼠高血壓并發左心室心肌肥厚伴心肌舒張功能不全和血管纖維化的作用[J].中國藥理學與毒理學雜志,2012,24(2):96.

[2]Jarvis S.Angiotensin receptor blockers in clinical practiceimplications of the ONTARGET study[J].Int Med Res,2012,40(1):10.

[3]敬慧智,常青,閆西艴.雷米普利治療原發性高血壓分析[J].中國現代應用藥學雜志,2006,23(9):951.

[4]愛民,何作云,覃軍,等.雷米普利對充血性心力衰竭患者血循環內皮細胞及腦鈉素的影響[J].中國微循環,2004,8(4):224.

[5]麥煒頤,馬莉,黃裕立,等.ACE抑制劑 Ramipril對大鼠急性心肌梗死后心肌細胞凋亡和左室重構的影響[J].中山大學學報,2008,29(5):550.

[6]Zhong Y,Cao P,Tong C,et al.Effect of ramipril on the electrophysiological characteristics of ventricular myocardium after myocardial infarction in rabbits[J].Cardiovasc Med,2012,13(5):313.