單味中藥抗大腸桿菌內毒素的實驗研究

涂可斌，余聲文

(1.咸寧市咸安區婦幼保健院，湖北咸寧437000;2.湖北省中醫院)

內毒素是細胞壁外膜結構中的脂多糖，能引起發熱、休克、器官損傷等多種病理變化和各種并發癥。中醫中內毒素是“毒”邪的一個重要組成部分，是引起衛氣營血及其傳變的一個重要病因。因而，如果利用中醫辨證施治，復方用藥特長，對內毒素引起的多方面病理損害進行多靶點的防治將具有重要臨床意義。我們采用瓊脂二倍稀釋法進行體外抗菌實驗研究，以尋找有效抗大腸桿菌內毒素的單味中藥。

1 材料與方法

1.1 藥材提取

所用玻璃儀器洗液浸泡1夜，常水洗凈，蒸餾水沖洗3遍，烤箱烤干，然后250℃干熱滅菌2h備用。生大黃、蒲公英、茵陳、赤芍、金銀花、虎杖、黃連、連翹、黃答、丹參、甘草、桅子、積實、白頭翁、敗醬草、柴胡(購于藥店)分別用適量甲醇沖洗，然后用適量甲醇浸泡1h，超聲30min，過濾;加入甲醇，再超聲30min，過濾，合并2次濾液，回收甲醇。用肉湯溶解殘渣，并定容至試驗所需濃度。

1.2 細菌培養

取凍干大腸桿菌ATCC25922安培1支用2ml無菌肉湯溶解，取1環接種于固體培訓基地中，37℃培養16～18h。然后，取1個菌落溶于2ml肉湯中，37℃培養6h，取0.1ml溶于100ml肉湯中備用。

1.3 不同中藥抗菌試驗

用二倍稀釋法對各種中藥提取液分別進行2倍稀釋，然后在不同濃度藥材提取物試管中加入等體積熱液體瓊脂培養基，混勻并斜放，待凝固后在每支試管中劃線接種大腸桿菌1環，37℃培養24h，以細菌生長的狀況作為判斷指標，觀察抗菌作用結果。接種區光滑無可見菌落為具抗菌作用;接種區可見大片細菌生長為無抗菌作用。實驗同時設陽性對照和陰性對照。陽性對照:1ml肉湯加1ml液體瓊脂在試管中混勻，斜放，待凝固后在試管中接種大腸桿菌1環;陰性對照:1ml肉湯加1ml液體瓊脂在試管中混勻，斜放，不接種大腸桿菌。陽性對照與陰性對照和樣品同時培養。

2 結果

結果陽性對照有菌落生長，陰性對照無菌落生長，樣品抗菌作用結果見表1。+:表示有白色菌落生長;－:表示無白色菌落生長。

表1 不同種類中藥抗大腸桿菌試驗結果(g/ml)

3 討論

各種感染性疾病臨床常選用不同種類的抗生素，但一般抗生素沒有抗內毒素的作用，單純使用抗生素，僅能抑制或殺滅致病菌，盡管其能有效控制菌血癥，但因其不能破壞內毒素，反而使潰破細菌大量釋放內毒素，內毒素癥狀隨菌體潰解而加重，使發熱期延長，并發癥發生率增加，如循環障礙、休克以及彌漫性血管內凝血(DIC)等，從而導致病人的死亡率仍然很高。為研究中藥對細菌內毒素的釋放是否有抑制作用，是否會引起內毒素血癥，我們選擇了幾種抗菌作用較強的中藥進行了體外抗大腸桿菌內毒素實驗。

實驗結果顯示，不同種類的中藥對大腸桿菌抗菌作用不同。黃連、赤芍抗菌作用最強，生大黃、虎杖、連翹、敗醬草次之，其它品種則更弱一些。實驗結果也表明:①并不是只有清熱解毒類中藥具抗菌作用，其它類中藥也具抗菌作用，如甘草屬補氣類，丹參屬活血類，枳實屬行氣類等均具有一定的抗菌作用;②并不是清熱解毒類中藥抗菌作用最強，如赤芍屬清熱涼血類，其抗菌作用強度與公認的抗菌作用最強中藥黃連一致;③不同功效種類的中藥均具有一定的抗菌作用，有助于說明為什么中醫臨床能同病異治，異病同治的特點。因為在某一方面，不同功效種類的中藥往往具有相同的功效。從發展的觀點看，中藥按單一功效分類如一成不變，將不利于中醫藥臨床與理論的提高。我們尋找具有較強抗菌作用的單味藥，然后以此為基礎，再結合中醫組方理論組成新的復方，將能有效避免抗生素引起的不良后果并治療因細菌大量釋放內毒素引起的內毒素血癥。